Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Колесниченко А.В. -> "Стрессовый белок БХШ 310: характеристика и функции в растительной клетке" -> 7

Стрессовый белок БХШ 310: характеристика и функции в растительной клетке - Колесниченко А.В.

Колесниченко А.В., Грабельных О.И., Побежимова Т.П., Колесниченко В.В. Стрессовый белок БХШ 310: характеристика и функции в растительной клетке — Арт-Пресс , 2004. — 225 c.
ISBN 5-98000-005-4
Скачать (прямая ссылка): stressoviybelokbhsh2004.pdf
Предыдущая << 1 .. 2 3 4 5 6 < 7 > 8 9 10 11 12 13 .. 72 >> Следующая

преципитации позволили выявить существенные различия в содержании
антигенов с ОЭП 0.24 и 0.30 у охлажденных и неохлажденных растений озимой
ржи и пшеницы (рис. 2). В частности, охлаждение растений привело к
значительному увеличению площадей пиков преципитации антигенов ОЭП 0.35 у
озимой ржи и 0.30 у пшеницы (увеличение на 59% и 54%, соответственно).
Одновременно произошло уменьшение площади пиков преципитации антигена
0.24 на 20% у ржи и на 14% у пшеницы. У пшеницы под воздействием низкой
18
температуры резко уменьшилось так же содержание антигена ОЭП 0,57 на 42%.
Рис. 2. Двумерный иммуноэлектрофорез по Грабар и Уильямс "контрольных"
(К) и "шоковых" (Ш) белков ржи (А) и пшениц (Б, В, Г). В геле содержится
градиент антител на антигены "контрольных" проростков пшеницы сорта
"Альбидум-24".
Цифрами обозначены антигены с ОЭП 0.24 (1),
0.30/0.35 (2) и 0.57 (3).
В дальнейшем, при изучении содержания антигенов с ОЭП 0.30 и 0.24 у
малохолодоустойчивого сорта Безостая 1 и высо кохолодоустойчивого сорта
Альбидум 114 методом пере крестного иммуноэле ктрофореза (Мишарин и др.,
1990) и у ряда различающихся по холодоустойчивости генотипов озимой
пшеницы методом двойной иммунодиффузии через барьер (Колесниченко, 1988;
Колесниченко и др., 1990) было установлено, что отношение содержания
конститутивно синтезирующихся антигенов с ОЭП 0.30 и 0.24 у "контрольных"
трехсуточных проростков, выращенных при 26°С, хорошо коррелирует со
степенью морозоустойчивости сорта. У более холодоустойчивых сортов
содержание антигена с ОЭП 0.30 было выше, а содержание антигена с ОЭП
0.24 -ниже, чем у менее холодоустойчивых сортов. Данный факт позволил
разработать метод определения морозоустойчивости сортов и линий озимой
пшеницы и получить на него авторс кое свидетельство на изобретение
(Колесничен ко и др., 1990).
19
Рис. 3. Электрофоретические спектры нативных белков одномесячных растений
озимой пшеницы (1), трехсуточных "контрольных" проростков озимой ржи (2)
и трехсуточных проростков озимой ржи, подвергнутых низкотемпературному
стрессу (-1°С, 1 час) (3). 4 - белки-маркеры.
Кажущееся противоречие полученных результатов об отсутствии новых
антигенных детерминант в составе нативных белков злаков с имеющимися в
литературе данными о синтезе во время низкотемпературного стресса новых
полипептидов (Браун, 1983; Кравец, 1996 и многие другие работы) может
быть, по всей видимости, объяснено либо тем, что у вновь синтезируемых
под действием низкой температуры полипептидов имеются те же антигенные
детерминанты, что и у синтезируемых конститутивно полипептидов, либо тем,
что, несмотря на отличия в первичной и вторичной структурах вновь
синтезируемых полипептидов от синтезирующихся в клетке конститутивно,
третичная и четвертичная структуры нативных белков, определяющие их
антигенные детерминанты, сохраняются неизменными.
В связи с тем, что при электрофорезе в агарозе относительная
электрофоретическая подвижность белков зависит, в основном, не от их моле
кулярной массы, а от заряда белковой макромолекулы, иммуноэлектрофорез в
агарозе не позволяет установить молекулярную массу исследуемого белка. В
то же время это можно сделать путем электрофоретического разделения
белков в полиакриламидном геле (ПААГ), в частности, при использовании
электрофореза в
2 3 4
310
420
290
200
97
80
62
У
669
440
232
140
67
20
градиенте пористости геля по Андерсон, Борг и Микаэльсон (Anderson et
al., 1972). При сравнении электрофоретических спектров нативных белков
трехсуточных "контрольных" проростков озимой ржи, трехсуточных
проростков, подвергнутых в течение одного часа холодовому шоку (-10С), и
одномесячных растений озимой ржи были выявлены значительные различия
между белковыми спектрами трехсуточных проростков и одномесячных растений
озимой
Т-\ w W
ржи. В частности, у одномесячных растений озимой ржи практически
полностью отсутствовали в спектре нативных белков белки с молекулярными
массами 310 кДа, 180 кДа, 97 кДа и сильно снижалось содержание белка с
молекулярной массой около 80 кДа по сравнению с трехсуточными проростками
(рис. 3).
1 9 •
"контрольных" и "стрессированных" проростков озимой ржи (первое
направление - электрофорез в агарозе, второе направление - электрофорез в
градиенте ПААГ.
1- стрессированные (-10С, 1 час) проростки;
2- "контрольные" проростки.
В то же время у одномесячных растений на значительно более высоком уровне
было содержание белков с
21
молекулярными массами 420 кДа, 290 кДа и 200 кДа. Между белками
"контрольных" и стрессированных трехсуточных проростков также наблюдались
некоторые различия. В частности, под действием гипотермии увеличивалось
содержание белков с молекулярными массами около 310 кДа, 180-190 кДа, 80
кДа и 62 кДа (рис. 3).
При сравнении двумерных электрофоретических спектров белков "контрольных"
трехсуточных проростков и белков трехсуточных проростков, подвергнутых
действию низкотемпературного стресса -10С в течение 1 часа, при котором в
Предыдущая << 1 .. 2 3 4 5 6 < 7 > 8 9 10 11 12 13 .. 72 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed