Стрессовый белок БХШ 310: характеристика и функции в растительной клетке - Колесниченко А.В.
ISBN 5-98000-005-4
Скачать (прямая ссылка):
комплекса I был использован малат, для комплекса II - сукцинат, для
комплекса III - НАДН, для комплекса IV - аскорбат плюс ТМФД (тетраметил-
п-фенилдиамин).
Влиян и е БХШ 310 и ант и сыворотки проти в БХШ 310 на процесс ПОЛ при
функцион и рован и и различных комплексов дыхательной /(3 и м итохондр
и й,
изоли рованных из нестресси рованных проростков оз и мой пшен и цы. При
изучении влияния БХШ 310 и антисыворотки против БХШ 310 на процесс ПОЛ
при функционировании различных комплексов дыхательной цепи митохондрий,
изолированных из нестрессированных проростков озимой пшеницы, оказалось,
что, если перенос электронов осуществляется через комплексы I, II или
III, то интенсивность ПОЛ в митохондриях довольно низка и примерно
одинакова во всех случаях (около 4 нмоль диеновых конъюгатов/мг
митохондриального белка) (рис. 59). При взаимодействии субстрата с
комплексом IV дыхательной цепи интенсивность ПОЛ была на 50% выше и
составляла около 7
152
нмоль/мг митохондриального белка (рис. 59) (Kolesnichenko et al., 2001d;
Zykova et al., 2001b).
Ц.
Ю
О
X
-Q
Q.
4
X
о
X
о
н
ш
о
2
г*
X
о
и
X
л
ш
о
X
а>
X
С?
л
с:
о
10,0
9.0
8.0
7.0
6.0
5.0
4.0
3.0
2.0 1,0 0,0
? контроль
? БХШ 310
S анти-БХШ 310
f-
I
I
I
I
IV
комплексы дыхательной цепи
Рис. 59. Влияние БХШ 310 (1 мг/мл) и антисыворотки против БХШ 310 (2
мг/мл) на ПОЛ в митохондриях при функционировании различных комплексов
дыхательной цепи митохондрий, изолированных из нестрессированных
проростков озимой пшеницы во время инкубации в течение 20 мин при 27°С.
Эти результаты можно объяснить тем, что при функционировании первых двух
комплексов ды1хательной цепи электроны переносятся через убихиноновый
комплекс, которыш функционирует как эффективная антиоксидантная система
(Побежимова, Войников, 1999). Добавление БХШ 310 в среду инкубации
митохондрий оказывало незначительное влияние (рис. 59). Достоверные
отличия от контроля (около 25%) были при этом отмечены только при
функционировании комплекса I. Добавление в среду инкубации митохондрий
антисыворотки против БХШ 310 вытзывало более
153
значительную индукцию ПОЛ, чем добавление БХШ 310. В этом случае прирост
ПОЛ составлял 29, 24, 36 и 27% при использовании субстратов комплекса I,
II, III и IV дыхательной цепи, соответственно (рис. 59). При фун
кционировании комплекса IV дыхательной цепи индукция ПОЛ составляла 26%,
т.е. была относительно ниже, чем при использовании субстрата комплекса
III, одна ко в абсолютном значении выход диеновых конъюгатов в этом
случае увеличился на 125% по отношению к варианту фун кционирования
комплекса I (рис. 59).
Таким образом, при функционировании разных комплексов дыхательной цепи
ПОЛ в митохондриях озимой пшеницы протекает с различной интенсивностью.
При активировании комплекса IV дыхательной цепи митохондрий,
изолированных из проростков озимой пшеницы, отмечается наибольший выход
продуктов ПОЛ - диеновых конъюгатов. БХШ 310 по-разному влияет на ПОЛ при
функционировании различных комплексов дыхательной цепи митохондрий озимой
пшеницы. При этом экзогенный БХШ 310 индуцирует ПОЛ только при
функционировании комплекса I дыхательной цепи. Присутствие в среде
инкубации митохондрий сыворотки против стрессового белка БХШ 310 вызывает
за счет повышения степени сопряжения окисления и фосфорилирования более
значительную индукцию ПОЛ в митохондриях, чем присутствие БХШ 310
(Kolesnichenko et al., 2001d; Zykova et al., 2001b).
Вли ян и е анти сыворотк и проти в БХШ 310 на ПОЛ в митохондриях при
функцион и рован и и различных комплексов дыхательной цеп и м итохондр
и й,
изоли рованных из проростков оз и мой пшен и цы, подвергнутых н
изкотемпературному стрессу. При изучении влияния низкотемпературного
стресса на интенсивность ПОЛ в митохондриях озимой пшеницы при
функционировании различных комплексов дыхательной цепи, оказалось, что,
если перенос электронов осуществляется к
154
комплексам I, II или III, то интенсивность ПОЛ довольно низка и примерно
одинакова (рис. 60). В то же время при переносе электронов через комплекс
IV дыхательной цепи интенсивность ПОЛ была значительно (на 80%) выше
(рис. 60). Необходимо отметить, что при функционировании комплекса II
дыхательной цепи абсолютные значения ПОЛ в митохондриях, выделенных из
стрессированных проростков, были несколько ниже, чем в митохондриях,
выделенных из нестрессированных проростков (рис. 59, 60). Образование
диеновых конъюгатов при переносе электронов к I, III и IV комплексам
дыхательной цепи митохондрий, выделенных из стрессированных проростков,
достоверно не отличалось от образования диеновых конъюгатов при
функционировании соответствующих комплексов дыхательной цепи митохондрий,
выделенных из нестрессированных проростков (рис. 60). Эти результаты
можно так же, как и полученные при изучении ПОЛ в нестрессированных
проростках, объяснить тем, что при функционировании первых двух
