Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Колесниченко А.В. -> "Стрессовый белок БХШ 310: характеристика и функции в растительной клетке" -> 43

Стрессовый белок БХШ 310: характеристика и функции в растительной клетке - Колесниченко А.В.

Колесниченко А.В., Грабельных О.И., Побежимова Т.П., Колесниченко В.В. Стрессовый белок БХШ 310: характеристика и функции в растительной клетке — Арт-Пресс , 2004. — 225 c.
ISBN 5-98000-005-4
Скачать (прямая ссылка): stressoviybelokbhsh2004.pdf
Предыдущая << 1 .. 37 38 39 40 41 42 < 43 > 44 45 46 47 48 49 .. 72 >> Следующая

(Kolesnichenko et al., 2000b). При этом показано, что ингибирование
разобщающей активности БХШ 310 при помощи инкубации изолированных
митохондрий с антисывороткой против этого стрессового белка вызывает
сопряжение митохондрий (Kolesnichenko et al., 2001c). Эти данные
позволяют предположить, что ингибирование функциональной активности БХШ
310 в митохондриях при помощи антисыворотки против этого белка будет
также индуцировать реакции ПОЛ в митохондриях. В связи с этим было
проведено изучение влияния антисыворотки против БХШ 310 на ПОЛ в
митохондриях озимой пшеницы. Определение первичных продуктов перекисного
окисления липидов - диеновых коньюгатов ненасыщенных жирных кислот -
проводили спектрофотометрически по методике (Стальная, 1977).
В ходе экспериментов по изучению влияния сыворотки против БХШ 310 на ПОЛ
в митохондриях озимой пшеницы установлено, что добавление антисыворотки в
концентрации 1 мг на 1 мл среды инкубации вызывало достоверное (около
55%) повышение уровня спонтанного ПОЛ в митохондриях озимой пшеницы (рис.
51). Таким образом, связывание эндогенного БХШ 310 при помощи
антисыворотки, подобно ингибированию UCP-подобных растительных
разобщающих белков, вызывает индукцию процессов ПОЛ в митохондриях.
135
При этом необходимо отметить, что добавление неимунной сыворотки не
оказывало заметного влияния на процессы ПОЛ в ин кубируемых in vitro
митохондриях (рис. 51). Эти результаты свидетельствуют о том, что
индукция ПОЛ в данном случае является следствием ингибирования
активности эндогенного БХШ 310 вследствие его связывания антисывороткой,
а не следствием присутствия в среде ин кубации сывороточных белков
(Kolesnichenko et al., 2001 d).
s
d G
? с
2 ID 2 ?
i *
S к
x n
" I
i 5
ф o
t ?
Л s
С E
14.0
12,0
10,0
8,0
6.0
4.0
¦2,0
0,0
контроль
нешлмунная
сьворотка
анти-БХШ 310
Р и с. 51. Изучение влияния сыворотки против БХШ 310 и неиммунной сыворо
ки на спонтанное ПОЛ в изолированных митохондриях озимой пшеницы при
инкубации в течение 40 мин при 27°С .
Следовательно, можно предположить, что при
ингибировании фун кционирования БХШ 310 антисывороткой против этого белка
происходит либо увеличение степени восстановленности убихинона вследствие
повышения степени сопряжения митохондрий, либо локальное повышение
136
содержания О2 из-за снижения скорости дыхания в состоянии 4 и, вследствие
этого, меньшего его расходования в митохондриях. Обе эти причины приводят
к увеличению образования активных форм кислорода митохондриями, и, как
следствие, повышению уровня ПОЛ.
Таким образом, полученные данные позволяют предполагать, что эндогенный
БХШ 310 подобно другим известным к настоящему времени разобщающим
растительным белкам (Kowaltowski et al., 1998), может участвовать в
системе защиты клетки от окислительного стресса.
15.2 Динамика влияния БХШ 310 и антисыворотки против БХШ 310 на ПОЛ в
изолированныхмитохондриях озимой пшеницы
Ранее при изучении влияния БХШ 310 на энергетическую активность
митохондрий озимой пшеницы было установлено, что разобщающее влияние БХШ
310 на энергетические параметры митохондрий сохраняется при инкубации
митохондрий с БХШ 310 в течение 1.5 часов (Grabelnych et al., 2001a). В
связи с этим было проведено исследование динамики влияния ингибирования
разобщающей активности БХШ 310 при помощи антисыворотки против этого
стрессового белка и присутствия экзогенного стрессового белка БХШ 310 на
ПОЛ в изолированных митохондриях озимой пшеницы при инкубации в течение 2
часов при 270С.
В ходе эксперимента были получены следующие результаты. В системе
спонтанного ПОЛ в митохондриях озимой пшеницы индукция ПОЛ была отмечена
после 1 часа инкубации митохондрий при 270С (около 140%). При этом в
первые 60 мин инкубации наблюдались лишь незначительные (110%) колебания
индукции ПОЛ по (рис. 52). Затем вплоть до 2 ч скорость образования
продуктов ПОЛ - диеновых конъюгатов монотонно увеличивалась до 150% (рис.
52) (Kolesnichenko et al., 2001d; Zykova et al., 2001b).
137
л .
0 .
2
1 -
3,0 -\--1-----1----1-----1----1----1------1-----1----
0 15 30 45 1 ч 1ч 15 1 ч 30 1 ч 45 2 ч
Время инкубации
Рис. 52. Изучение влияния БХШ 310 (1 мг/мл) и сыворотки против БХШ 310 (2
мг/мл) на спонтанное ПОЛ в изолированные митохондриях озимой пшеницы1 при
их инкубации в течение 2 часов при 27°С.
Добавление к митохондриям антисыворотки против стрессового белка БХШ 310
выбывало немедленное увеличение содержания диеновых конъюгатов с 4.2 до
6.4 нМ/мг митохондриального белка, т.е. примерно на 50% (рис. 52).
Содержание диеновых конъюгатов в этом варианте опыта сохранялось
приблизительно на одном уровне в течение первого часа ин кубации
митохондрий. Дальнейшая ин кубация митохондрий с антисывороткой против
БХШ 310 выюывала увеличение концентрации диеновых конъюгатов до 8.8 нМ/мг
митохондриального белка (рис. 52). К двум часам ин кубации митохондрий с
антисывороткой отмечалось уменьшение содержания в митохондриях диеновых
Предыдущая << 1 .. 37 38 39 40 41 42 < 43 > 44 45 46 47 48 49 .. 72 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed