Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Кочетов Г.А. -> "Тиаминовые ферменты " -> 29

Тиаминовые ферменты - Кочетов Г.А.

Кочетов Г.А. Тиаминовые ферменты — М.: Наука, 1978. — 234 c.
Скачать (прямая ссылка): tiaminovinoviefermenti1978.djvu
Предыдущая << 1 .. 23 24 25 26 27 28 < 29 > 30 31 32 33 34 35 .. 86 >> Следующая

Опыты ставили при pH 7,6. Относительное содержание апофермента в исходных препаратах трипскстолазы (в %). а — 20; б — 50; в —85;
/—степень фотоинактивацни; 2— относительное содержание апотраискетолазы в контрольных пробах (фермент в тимноте с метиленовым енним и на свету без метиленового синего) в процессе проведения эксперимента. По оси ординат—степень фотоинактивации, % от исходной активности (опытные пробы) и содержание апофермента в контрольных пробах (в %)
рость снижения ферментативной активности. Создавалось впечатление, что снижение транскетолазной активности связано с восприимчивостью к фотооблучению только (или, по крайней мере, преимущественно) апофермента и что наличие в транскетолазе тиаминпирофос-фата (холофермент) предохраняет ее от фотоинактивации. В пользу этого говорил и тот факт, что в процессе фотооблучения процентное содержание холофермента в опытных пробах увеличивается (табл. 6).
Это естественно, если количество апофермента со временем уменьшается — он фотоинактивируется, а количество холофермента остается неизменным, так как он не подвержен действию фотооблучения. Согласуется это и с тем, что при более высоком исходном содержании апотраискетолазы в исходном ферментном препарате относительное содержание в нем холотранскетолазы увеличивается в большей степени по сравнению с препаратами, где исходное содержание апотраискетолазы было низким: в первом случае скорость фотоинактивации выше, больше разрушается (фотоинактивируется) апофермента, значит и относительное содержание холофермента увеличивается в большей степени (см. табл. 6).
Вернемся еще раз к рис. 18. Обращают на себя внимание два обстоятельства.
83
Таблица 6
Влияние исходной степени отщепления ; офермента на фотоинактивацию транскетолазы (pH 7,6) [22]
Время Содержание, % Степень фото- Содержание, %
апофер холофер апофермента холофермента
мента мента

Контрольные пробы Опытные пробы
0 83 13 0 8; 15
13 ---. 58 --- ---¦
:Ю 83 13 78 30 70
и 50 50 0 50 50
1Г> 50 50 50 30 70
ни 50 50 04 30 70
0 20 80 0 20 80
г> 36 64 30 --- ---
зо 50 30 54 10 90
1. Достаточно высокая скорость фотоинактнвацин ферментных препаратов с низким содержанием апофермента: в конце эксперимента она даже несколько превышает таковую для препаратов фермента со значительно более высоким исходным содержанием в них апотранске-толазы (сравни на рис. 18, а, б, в, кривые /).
2. В конце эксперимента степень фотоинактивации транскетолазы превышает исходное (а также измеренное в конце эксперимента — в контроле) содержание в препаратах апотранскетолазы (сравни на рис. 18, а, б, кривые 1 и 2).
По первому пункту объяснение напрашивается само собой. Действительно, при низком исходном содержании апотранскетолазы в контроле (на рис. 18, а, кривая 2) происходит отщепление тиаминпирофосфата и образование апофермента. То же самое должно иметь место и в опытных пробах. Поэтому наряду с фотоокислением апотранскетолазы идет непрерывное ее новообразование из холотранскетолазы, за счет чего и поддерживается, примерно, постоянная скорость фотоинактивации (рис. 18, а, кривая /). Если же в исходном ферментном препарате много апотранскетотазы (см. рис. 18, в), то и
«4
скорость фотоинактивации высокая (на рис. 18, в, кривая /); затем она, однако, существенно снижается, так как количество апофермента уменьшается (он фотоокис-ляется), а новообразования его из холофермента в данном случае не происходит (см. рис. 18, в, прямая 2).
Превышение степени фотоинактивации транскетолазы над количественным содержанием апофермента в контроле (см. рис. 18, а, б,) на первый взгляд свидетельствует о возможности разрушения не только апотранске-толазы, но в камон-то степени и холотранскетолазы. Оказалось, однако, что, несмотря на высокую степень фото-инактивацип в этих пробах (превышающую, как только что говорилось, содержание апотранскетолазы в соответствующих контрольных пробах), в них апофермеит не исчезает полностью и даже в конце эксперимента остается в достаточно высоких количествах (см. табл. 6). Предпочтительнее поэтому кажется другое объяснение, заключающееся в том, что фотооблучение, разрушая апотранскетолазу, способствует тем самым распаду холофермента на кофермент и апофермент, в результате чего скорость образования апотранскетолазы в опытных пробах выше, чем в контрольных.
Следующая серия экспериментов была поставлена по той же схеме, что и предыдущая, только при pH 6. В этих условиях за время проведения эксперимента холотранс-кетолаза на апо- и кофермент >не распадалась (табл. 7, контрольные пробы).
Предыдущая << 1 .. 23 24 25 26 27 28 < 29 > 30 31 32 33 34 35 .. 86 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed