Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Кэтти Д. -> "Антитела. Методы. Книга 1" -> 7

Антитела. Методы. Книга 1 - Кэтти Д.

Кэтти Д., Райкундалия Ч., Браун Дж., Линг Н.Р. Антитела. Методы. Книга 1 — М.: Мир, 1991. — 287 c.
ISBN 5-03-002363-1
Скачать (прямая ссылка): metodikn11991.djvu
Предыдущая << 1 .. 2 3 4 5 6 < 7 > 8 9 10 11 12 13 .. 122 >> Следующая

В терминах термодинамики это можно рассматривать как прочность (энергию)
целого ряда нековалентных взаимодействий между рецептором
(антигенсвязывающим центром антитела) и лигандом (антигенной
детерминантой). Математически аффинность выражается как константа
ассоциации (/(, л/моль), которую можно рассчитать в условиях равновесия
между связанным и несвязанным лигандом в его обратимом взаимодействии с
гомогенным источником антигенсвязывающих центров. Поскольку гетерогенная
популяция антител обладает различной аффинностью по отношению к
определенной антигенной детерминанте, то результирующая константа
ассоциации представляет собой усредненное значение. В связи с этим
невозможно оценить аффинность антисыворотки, обладающей
полиспецифичностью, т. е. специфичной по отношению к множеству
детерминант одного антигена. Однако такие сыворотки можно сравнивать друг
с другом по их общим, суммарным характеристикам связывания с антигеном -
по общей "силе" реакции в выбранной тест-системе, обозначаемой как
авидность антител. Авидность - это строго функциональный термин, который
описывает поведение антител (антисыворотки) в конкретной реакции. В
условиях данного теста каждая из множества составляющих компонент
взаимодействия подчиняется законам действия масс, для которых применима в
данном случае формула:
АТ + АГ ч==^АТ • АГ
Исходя из этого положения, можно дать более строгое определение
авидности, выразив ее как константу ассоциации /(а.
Свойства антител И антигенов
21
5. Специфичность антител: перекрестные реакции
Каждая молекула антитела специфична по отношению к той антигенной
детерминанте, с которой она связывается, - таково представление о
специфичности в наиболее узком смысле. В отличие от этого специфичность
антисыворотки определяется множеством специфичностей образующих ее
антител. Антисыворотка связывается с одним определенным антигеном только
в том случае, если совокупность специфичностей антигенсвязывающих центров
всех антител в сыворотке направлена на детерминанты лишь этого антигена.
Однако, как правило, некоторые детерминанты являются общими для
нескольких молекул антигенов, особенно если речь идет о сходных молекулах
родственных видов животных. В этом случае некоторые из антител,
образовавшихся в ответ на стимуляцию данным антигеном, могут связываться
и с другими антигенами. Такие антитела называют перекрестно-реагирующими,
а содержащую их антисыворотку - неспецифичной или перекрестно-
реагирующей. Специфичность подобной антисыворотки можно повысить путем
очистки на сорбенте, которую называют истощением сыворотки. В процессе
истощения перекрестно-реаги-рующие антитела удаляются путем контакта с
антигенами, которые обладают общими с индуцирующим антигеном
детерминантами и преимущественно находятся в нерастворимой форме
(иммуносорбент).
Понятие перекрестной реактивности может быть применено и к антигенам.
Перекрестно-реагирующий антиген - это такой антиген, который связывается
с антителами, образование которых было индуцировано различными
молекулами, обладающими с этим антигеном общими детерминантами. Однако
такие соображения ничего не добавляют к концепции перекрестной
реактивности.
6. Свойства поликлональных антисывороток и моноклональных антител
Используя специфические связывающие свойства антител, исследователь может
выбирать между двумя различными формами реагента, приготовленного на их
основе; это обычные поликлональные антисыворотки (или иммуноглобулиновые
фракции, полученные из сыворотки) и моноклональные антитела (МКА).
Препараты и тех, и других получают различными путями с различной целью;
выбор между ними осуществляется зачастую не произвольно, а в большой
степени зависит от соответствия специфических свойств антител требованиям
теста.
22
Глава 1
6.1. Поликлональные антисыворотки
Поликлональная антисыворотка - это сыворотка иммунизированного животного,
обычно кролика, барана или козы. Она содержит антитела неодинаковой
специфичности по отношению к различным эпитопам полидетерминантного
иммуногена. Основное преимущество поликлональных антисывороток
заключается в их способности к образованию больших нерастворимых иммунных
комплексов с антигеном либо к быстрой агглютинации клеток. Такие реакции
можно наблюдать и регистрировать визуально или определять фотометрически,
например путем нефелометрии. При всей своей ценности использование
антисывороток животных в иммунологических тестах ограничено. Наиболее
существенное ограничение - это гетерогенность антисывороток по их
специфичности даже при взаимодействии с антигенами небольшой мол. массы.
Другое ограничение связано с нестандартностью антисывороток,
обусловленной необходимостью использовать для иммунизации более одного
животного и в разные сроки. Антисыворотка образуется в результате
функционирования многочисленных клеточных клонов и, следовательно,
гетерогенна на самых разных уровнях: по классу и подклассу (изотипу)
Предыдущая << 1 .. 2 3 4 5 6 < 7 > 8 9 10 11 12 13 .. 122 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed