Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Кэтти Д. -> "Антитела. Методы. Книга 1" -> 4

Антитела. Методы. Книга 1 - Кэтти Д.

Кэтти Д., Райкундалия Ч., Браун Дж., Линг Н.Р. Антитела. Методы. Книга 1 — М.: Мир, 1991. — 287 c.
ISBN 5-03-002363-1
Скачать (прямая ссылка): metodikn11991.djvu
Предыдущая << 1 .. 2 3 < 4 > 5 6 7 8 9 10 .. 122 >> Следующая

настоящее время в иммуноцитохимии используются как флуоресцентные
красители, так и находящие все более широкое распространение фермент-
субстратные системы (например, иммуно-пероксидазный метод). Разработка
последних связана с тем, что в 1966г. Аврамеас и Уриель [16], а
такжеНакане и Пирс [17] обнаружили возможность конъюгации фермента с
антителом или антигеном. О важности этого открытия свидетельствует то
обстоятельство, насколько широко в настоящее время для обнаружения и
количественного определения растворимых антигенов применяются различные
хромогенные, флуо-
14
Введение
рогенные или люминесцентные фермент-субстратные системы, чувствительность
которых приближается к чувствительности радиоиммунологического анализа.
Основоположниками имму-ноферментного анализа были Энгвалль и Перльман
[18] в 1971 г. и Ван Вееман и Шуре в том же году [19], а в настоящее
время известно огромное количество твердофазных имму-ноферементных
систем, которые применяются как в исследовательской работе, так и для
проведения повседневных серологических тестов и обладают свойствами
идеального метода иммунологического анализа-они просты в исполнении,
дешевы (особенно, если применять реагенты, приготовленные самим
исследователем), надежны ч при этом достигают уровня чувствительности,
более чем до гаточного для решения большинства задач. Возможность
получения моноклональных антител еще больше расширила область применения
иммунофер-ментных методов.
С накоплением опыта по получению специфических антисывороток и увеличению
их антигенсвязывающей активности иммунологические методы находили все
более широкое применение. Их, в частности, стали использовать для
изучения компонентов клеточных мембран, и опять значительный успех в этой
области исследований был обусловлен использованием моноклональных
антител. Было обнаружено, что комплемент-связывающие антитела способны
избирательно повреждать клеткн-мишени в гетерогенной клеточной культуре,
оставляя нетронутыми другие клетки, не экспрессирующие специфического
антигена. Естественно, что такие антитела в первую очередь были применены
в клинике, например, для иммуносупрессии с помощью антилимфоцитарной
сыворотки. Однако, после того как в 1956 г. Горрер и О'Горман [20]
открыли лимфоцитотоксические антитела у мышей, антитела с подобными
свойствами стали применять и в лаборатории как основной инструмент
тканевого типирования. После открытия Доссе в 1958 г. [21] главного
комплекса антигенов гистосовместимости появилась возможность типирования
и человеческих тканей, а в 1964 г. данный метод был модифицирован
Терасаки и Мак-Клеландом [22]. Все шире используются антитела для
идентификации клеточных популяций, несущих определенные поверхностные
маркеры. Эта область развивается очень быстро, особенно после разработки
в 1970 г. принципа флуоресцентной сортировки клеток, с помощью которой
клетки определенных популяций, меченные флуоресцентными антителами, можно
подсчитать и разделить по интенсивности флуоресценции. И здесь
возможности идентификации клеточных популяций по поверхностным маркерам
были существенно расширены благодаря применению моноклональных антител.
Введение
15
Ценность антител к компонентам клеточной поверхности заключается не
только в их способности селективно уничтожать или идентифицировать
клеточные популяции, но и в возможности определения конкретных молекул-
мишеней. В настоящее время с помощью антител можно выделить компоненты,
входящие в состав клеточных мембран, и определить их природу путем
аффинного мечения после разделения в полиакриламидном геле. Такие методы
лежат в основе современных исследований во многих областях клеточной
биологии.
Прошло уже почти сто лет с того дня, как в процессе изучения
бактериальных инфекций были открыты антитела. За это время методы,
основанные на их использовании, радикальным образом расширили наши
возможности идентификации различных молекул и изучения их свойств (см.
табл. В.1).
В этой книге в логической последовательности изложены методы получения и
применения антител. Поскольку эта область достаточно широка, а темпы
развития новых методов и технологий очень велики, некоторые аспекты
неизбежно должны были быть исключены из рассмотрения. Мы сосредоточили
внимание на детальном описании самых популярных и наиболее часто
используемых методов, осваивая которые можно быстро овладеть основными
принципами работы с антителами. Вторая цель, которую мы преследовали,
заключается в описании методов, представляющих самостоятельную ценность
для прикладных исследований, а также тех, которые имеют большое
клиническое значение в областях, где в настоящее время происходит
особенно быстрое накопление знаний, и, следовательно, нуждающихся в
проверке современной лабораторной практикой.
Литература
1. von Behring Е., Kitasato S. In: Immunology for Students of Medicine,
Humphrey J. H. and White R. G. (eds.), Blackwell Scientific Publications,
Предыдущая << 1 .. 2 3 < 4 > 5 6 7 8 9 10 .. 122 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed