Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Хеншен А. -> "Высокоэффективная жидкостная хроматография в биохимии" -> 57

Высокоэффективная жидкостная хроматография в биохимии - Хеншен А.

Хеншен А. Высокоэффективная жидкостная хроматография в биохимии — М.: Мир, 1988. — 688 c.
ISBN 5-03-001337-7
Скачать (прямая ссылка): visokoeffektivnayajidkostnayahromatograf1988.djvu
Предыдущая << 1 .. 51 52 53 54 55 56 < 57 > 58 59 60 61 62 63 .. 296 >> Следующая

котором сила тока после резкого увеличения практически не меняется с
изменением приложенного напряжения. Этот ток называется предельным.
В связи с практически мгновенным электрохимическим превращением,
происходящим на границе раздела электрод - раствор, возникает градиент
концентрации, противоположный направлению диффузии анализируемых молекул
к электроду. Однако диффузия протекает сравнительно медленно, в
результате чего устанавливается равновесие, при котором величина тока
ограничивается скоростью переноса электроактивных веществ на электрод.
Величина такого диффузионного тока пропорциональна концентрации
анализируемых веществ и геометрическим параметрам ячейки. Эту зависимость
можно выразить количественно путем решения уравнений массопереноса
Аппаратура 148
для ячейки. Уравнения Ильяковича для некоторых типов ячеек
вольтамперометрических детекторов рассмотрены в работе Ханекампа и др.
[46].
Из рис. 3.25 видно, что в величину предельного тока вносит вклад
раствор электролита подвижной фазы (остаточный или фоновый ток).
Диффузионный ток представляет собой разность между предельным и фоновым
токами. На количественные измерения методом вольтамперометрни влияет,
таким образом, величина диффузионного тока, который можно измерить при
наличии остаточного или фонового тока. Следует помнить о том, что фоновые
токи в электрохимических детекторах для ВЭЖХ могут в ряде случаев в 1000
и более раз превышать диффузионные.
Другая характерная особенность вольтамперограммы - так называемый
потенциал полуволны, или такое значение потенциала, при котором ток равен
половине величины диффузионного тока в данных конкретных условиях
эксперимента, что также можно использовать для получения количественной
информации.
В ВЭЖХ с электрохимическим обнаружением или в электрохимическом
анализе, основывающихся на использовании амперометрических методов, в
ячейке детектора создается такая разность потенциалов, при которой
достигается предельный ток для какого-то ряда или класса анализируемых
соединений. Амперометрические детекторы, в которых применяется капающий
ртутный электрод, называются полярографическими детекторами.
Анализируемые соединения в вольтамперометрических детекторах
претерпевают минимальные электрохимические превращения. Степень
превращения составляет всего от 1 до 3%. Однако возможно создание ячеек,
степень превращения в которых достигает 100%. Детекторы такого типа
называются кулонометрическими. Ограничения, связанные с массопереносом, в
этом случае удается обойти путем уменьшения пути диффузии соединения,
например используя пористый электрод с развитой поверхностью, покрытой
тонкой пленкой жидкости (<50 мкм) [47].
Если считать, что степень превращения соединения в кулонометрическом
детекторе постоянна и реакция протекает количественно, то регистрируемый
ток пропорционален потоку анализируемого соединения (моль/с). Такой
детектор определяет абсолютное количество соединения, тогда как
вольтампе-рометрический детектор определяет его концентрацию в растворе.
Сравним теперь характеристики амперометрических и кулонометрических
детекторов для ВЭЖХ (табл. 3.2).
144 Глава 3
Таблица 3.2. Свойства амперометрических (с твердыми электродами) и
кулонометрических детекторов для ВЭЖХ
Амперометрические детекторы Кулонометрические детекторы
Измеряют концентрацию (моль/л) Измеряют количество (моль)
Изменение объемной скорости влия Изменение объемной скорости не
ет на площади пиков влияет на площади пиков
Величина сигнала возрастает с увели Величина сигнала уменьшается с
чением объемной скорости увеличением объемной скорости
Пассивирование поверхности элект Пассивирование поверхности элект
родов быстро снижает величину родов постепенно влияет на вели
сигнала чину сигнала
Шумы <10 пА Шумы 1 нА
Фоновый ток от 10 до 100 нА Фоновый ток от 1 до 10 мкА
Поскольку амперометрические детекторы чувствительны к
концентрации, площади пиков изменяются с изменением объ-
емной скорости элюента. Поэтому для достижения высокой чувствительности
при работе с этими детекторами в первую очередь необходимо поддерживать
строго постоянную объемную скорость. Кроме того, величина сигнала
амперометрического детектора, т. е. высота пика, возрастает с увеличением
объемной скорости. Это понятно, так как толщина диффузионного слоя,
который формируется за миллисекунды, пока анализируемое соединение
протекает по поверхности электрода, уменьшается с увеличением объемной
скорости. Расход элект-роактивного вещества восполняется быстрее, в
результате чего большее количество вещества, поступившего на границу
раздела электрод/жидкость, может претерпевать превращения (рис. 3.26).
Пример этого явления приведен в работе [48].
Предыдущая << 1 .. 51 52 53 54 55 56 < 57 > 58 59 60 61 62 63 .. 296 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed