Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Хеншен А. -> "Высокоэффективная жидкостная хроматография в биохимии" -> 55

Высокоэффективная жидкостная хроматография в биохимии - Хеншен А.

Хеншен А. Высокоэффективная жидкостная хроматография в биохимии — М.: Мир, 1988. — 688 c.
ISBN 5-03-001337-7
Скачать (прямая ссылка): visokoeffektivnayajidkostnayahromatograf1988.djvu
Предыдущая << 1 .. 49 50 51 52 53 54 < 55 > 56 57 58 59 60 61 .. 296 >> Следующая

Детекторы, основанные на применении электроаналитических методов,
становятся в последние годы все более популярными. И это имеет свои
причины (см. далее). Так, например, эти детекторы предпочтительны в
анализе микропримесей и в ионной хроматографии.
Поскольку электроанализ представляет собой большой набор дисциплин,
необходимо провести классификацию методов, используемых для обнаружения в
ВЭЖХ. Мы различаем следующие типы детекторов: а) реагирующие на изменения
параметров элюата и б) реагирующие на отдельные компоненты элюата.
Детекторы первого типа реагируют на изменения электрохимических
свойств всей жидкости, проходящей через измерительную ячейку детектора.
Изменения электропроводности подвижной фазы, регистрируемые в виде
изменения сопротивления ячейки, и изменения диэлектрической проницаемости
протекающей жидкости [39-41], регистрируемые в виде изменения
электрической емкости ячейки, положены в основу двух наиболее
распространенных электроаналитических методов обнаружения изменений
электрохимических параметров элюата. В частности, особое значение в
последние годы приобрел кон-дуктометрический детектор. Этот детектор в
комбинации с так называемыми компенсационными колонками дает очень гибкую
систему, пригодную для хроматографии ионов.
Электрохимические детекторы второго типа, регистрирующие отдельные
растворенные вещества, реагируют на изменения разности потенциалов
(потенциометрия) или тока (вольт-амперометрия или кулонометрия) при
прохождении анализируемого соединения через ячейку детектора.
Потенциометрический принцип обнаружения не получил широкого
распространения в ВЭЖХ [42, 43], поскольку характеризуется слишком
высоким значением нижнего предела обнаружения. Однако при тщательной
разработке конструкции электрода возможно создание детектора с очень
высокой избирательностью.
Большая часть электрохимических детекторов основана на
вольтамперометрическом или кулонометрическом методе обнаружения
анализируемого соединения в потоке жидкости. Главное условие получения
сигнала детектора-наличие электрофора (по аналогии с хромофором в
фотометрическом детектировании) в молекуле изучаемого вещества.
Электрофор представляет собой структуру (или субструктуру) в молекуле,
которая способна легко принимать (восстанавливаться) или отдавать
электроны (окисляться) в определенных условиях (и при определенном
потенциале). Таким образом, при применении вольтамперометрического и
кулонометрического ме-
Аппаратура 139
тодов обнаружения в ВЭЖХ регистрируется изменение тока, протекающего
через ячейку, обусловленное изменением концентрации анализируемого
соединения.
Потенциометрические детекторы не поступают в продажу, тогда как
вольтамперометрические и кулонометрические детекторы производятся
многочисленными фирмами. Поэтому более подробно мы рассмотрим детекторы
двух последних типов, а также кондуктометрический детектор.
3.6.5.1. Кондуктометрические детекторы. Общие принципы. При создании
разности потенциалов находящиеся в растворе ионы начинают перемещаться к
электродам, имеющим проти: воположный их собственному заряд. Проводимость
- величина, обратная электрическому сопротивлению, - зависит
непосредственно от числа заряженных частиц в растворе. Эта зависимость
положена в основу количественных измерений в кои-дуктометрии. В то же
время следует четко представлять, что данный метод имеет ряд внутренних
ограничений. Для объяснения этого следует рассмотреть ряд основных
соотношений.
Проводимость раствора G есть величина, обратная его. электрическому
сопротивлению:
G = MRe
По аналогии с сопротивлением электрического проводника удельную
проводимость можно определить как
G = x(A/l) =х-константа ячейки
где А - площадь поверхности электродов и I - расстояние между ними. Таким
образом, именно удельная проводимость к является параметром, зависящим от
концентрации. Соотношение All, называемое константой ячейки, определяется
только ее геометрией. Если необходимо определить абсолютные значения
проводимости, константу ячейки можно установить, используя стандартные
растворы с известным значением х. Если кондуктометр используется как
детектор в ВЭЖХ, абсолютные значения проводимости не требуются.
Подвижность ионов будет различаться в зависимости от их размеров,
заряда и поляризуемости. Она зависит от молярной проводимости Л,
определяемой как проводимость раствора одного грамм-эквивалента вещества,
помещенного между электродами, находящимися на расстоянии 1 см. Переводя
единицы в одну систему измерения, получаем
Л= 1000 к/с Объединим выражения для G и А:
G = константа ячейки-Лс/1000
140 Глава 3
Таким образом, для получения количественных результатов При проведении
разделения методом ВЭЖХ с использованием кондуктометрических детекторов
молярная проводимость должна быть постоянной. Это справедливо только для
очень разбавленных растворов. Только в этом случае подвижность ионов
Предыдущая << 1 .. 49 50 51 52 53 54 < 55 > 56 57 58 59 60 61 .. 296 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed