Высокоэффективная жидкостная хроматография в биохимии - Хеншен А.
ISBN 5-03-001337-7
Скачать (прямая ссылка):
гликофлавонов неподвижную фазу на основе силикагеля с химически привитыми
аминогруппами лихросорб NH2. Ацилированные флавон-С-гликозиды семян Zi-
zyphus jujuba были разделены на фазе Ci8, элюентом служила смесь ТГФ/вода
(4:53) [29].
Изофлавоновые гликозиды можно разделить на фазах Cis при элюировании
смесями метанол/вода [30] или ацетонитрил/вода [31]. В работе [23]
продемонстрирована возможность эффективного разделения антоцианинов,
содержащихся во фруктах и получаемых из них продуктах, на неподвижной
фазе |я-бон-дапак С]8- 3- и 3,5-Диглюкозиды антоцианидинов разделяются
при элюировании водными растворами уксусной кислоты, а n-кумарил-З- и
3,5-дигликозиды - метанольными растворами уксусной кислоты. Для
разделения чрезвычайно сложных смесей антоцианинов, содержащих пигменты
всех четырех упомянутых выше групп, использовалось программируемое
нелинейное градиентное элюирование: от водного раствора уксусной кислоты
(стартовый элюент) до водно-метанольных растворов. Следует отметить, что
на время удерживания пигментов (в рам-
Таблица 14.1. Типичные условия разделения флавоноидных агликонов
и глнкозидов при помощи ВЭЖХ
Разделяемые соеди Неподвижная фаза Элюент Лите
нения ратура
Полнметоксилиро- Лнхросорб Si 60 "-Гептан/изопропанол 9, 10
ванные флавоновые (60 : 40), я-гептан/
аглнконы этанол (75 :25)
Флавоновые аглико- ц-Бондапак Си Н20/уксусная кислота/ 19
ны ацетонитрил (68 : 2:
: 30)
Флавоноидные аце Лихросорб Si 60 Бензол/ацетонитрнл 12
таты (40 : 60)
Бензол/ацетон (90:15).
нзооктан/этанол/ацето-
ннтрнл (70 : 16 : 5,5)
ТзофлаВоновые аглн ц-Пораснл Днхлор метан/этанол/ 11
коны Партисил-10 ODS уксусная кислота 13
(97 : 3 : 0,2)/гексан
(12:88)
Н20/ацетонитрил (4:1)
Антоцианидины ц-Бондапак С]8 Н20/уксусная кислота/ 15-17
метанол (71 : 10 : 19). 17
Н20/уксусная кислота/
метанол/ацетоннтрил
(75: 10:7:8)
Флавон-4-олы ц-Боидапак Cis Метанол/Н20 (1:1) 18
Н20/уксусная кислота/
метанол (33 : 65 : 2)
Флавоновые и флаво- Зорбакс ODS 45--->-100 % -ный метанот, 20
ноловые гликозиды содержащий 0,1% ук
сусной кислоты
ц-Бондапак Qg 40% -ный метанол в фос 24
фатном буфере
Флавон-С-глнкознды Лнхросорб NH2 Аиетонитрил/Н20 28
(1 : 9-Н): 1)
Ацетилированные COPELL ODS ТГФ/Н20 (4:53) 29
флавонглнкозиды
Изофлавонгликозиды ц-Бондапак С|Я 32->-90%-ный метанол 30
Нуклеоснл ODS Ацетонитрил/НгО 31
(18:32)
Антоцианидинглико- ц-Бопдапак С)8 Уксусная кнслота/Н20 23
знды ^15:85), метанол/ук
сусная кислота/Н20
(20 : 15 : 65)
€50 Глава 14
ках индивидуальных групп) сильное влияние оказывает природа заместителя в
В-кольце. Увеличение степени гидроксилиро-вания В-кольца приводит к
уменьшению времени удерживания. Поскольку антоцианины можно селективно
обнаруживать по поглощению вблизи 520 нм, где лишь немногие соединения
характеризуются сколько-нибудь заметным поглощением, этим методом можно
хроматографировать исходные экстракты растительных материалов, не проводя
какую-либо их обработку с целью получения производных пигментов. Авторы
работы [32] предложили ВЭЖХ-метод разделения смесей, содержащих
гликозилированные антоцианины и 3-дезоксиантоцианины.
Разделение перацетилированных флавоноловых гликозидов рекомендуется
проводить на лихросорбе Si 60 путем изократи-ческого элюирования смесью
