Высокоэффективная жидкостная хроматография в биохимии - Хеншен А.
ISBN 5-03-001337-7
Скачать (прямая ссылка):
д. При разделении на силикагелевых колонках наблюдается большее
различие в последовательности удерживания при использовании различных
систем растворителей.
Рассчитанные или измеренные параметры удерживания для соединений с
различными функциональными группами приведены в табл. 11.14 и 11.15.
Анализ этих данных показывает следующее:
а. Гидроксильные группы в положениях 6(}, 14а и 16а дают большие
абсолютные значения параметров для обеих неподвижных фаз.
б. Ацилирование спиртовых гидроксильных групп также дает соединения
с большими абсолютными значениями параметров для обеих неподвижных фаз.
в. Алкилирование и ацилирование гидроксильных групп при
ароматическом кольце дает производные с экстремально большими
положительными значениями параметров в обращенно-фазовых системах.
г. Введение алкильной группы в 17а-положение стероида, имеющего [5-
гидроксильную группу, дает производные с положительными значениями
параметров, возрастающими от метила к этилу в обращенно-фазовых системах.
д. Восстановление карбонилов С-11 и С-17 с образованием p-
гидроксильных групп дает соединения, имеющие малые абсолютные значения
параметров в обращенно-фазовых и большие в полярно-фазовых системах.
е. Введение хлора в положение 4 З-окси-4-еновых стероидов дает
соединения с положительными и отрицательными значениями параметров в
обращенно-фазовой и полярно-фазовой системах соответственно.
ж. Введение метальной группы в положение 6[5 и Юр дает соединения с
положительными и отрицательными значениями параметров в обращенно-фазовой
и полярно-фазовой системах соответственно.
Таблица 11.15. Параметры удерживания стероидов с ^модифицированными
Колонка: 600X2,3 мм (внутр. диаметр); неподвижная фаза: бондапак
Cie/корасил; объем чсское
Функциональная группа
Стероид
немоднф.
модиф.
иемодиф.
модиф.
60-Н ОН
14а-Н ОН
16а-Н ОН
17р-ОН ОСОСНз
17Р-ОН ОСОС2Н5
17Р-ОН ОСО(СН2)зСН3
17Р-ОН ОСО(СН2)2С6Н8
17Р-ОН | 0С0(СН2)2С4Н40
21-ОН ОСОСНз
21-ОН ОСОСНз
17?-ОН СОСНз
3-ОН ОСНз
ЗОН ОСОС6Н5
17а-Н СНз'
17а-Н СНз
17а-Н С2Н5
17а-Н Этинил
17а-Н Этнннл
17^-Г идроксиандрост-4-ен-З-он (тестостерон) 17[5Тидроксиандрост-4-ен-
З-он (тестостерон) Эстра-1,3,5 (10) -триен-3,17[5-диол (эстради-ол)
17[5-Гидроксиандрост-4-ен-З-он (тестостерон) 17Р-Г идрокснандрост-4-ен-
З-он Эстра-1,3,5 (10) -триен-3,17[$-диол (эстрадиол; 17[$-Гидроксиэстр-4-
ен-
3-он (19-нортестосте-рон)
17Р-Г идроксиэстр-4-ен-
3-он (19-нортестосте-рон)
17а,21 -Днгидроксипрегн-
4-ен-3,11,20-трион (кортизон)
11|3,17а,21-Тригидроксн-прегн-4-ен-3,20-дион (гидрокортизон)
17[$-Г идрокснандрост-4-ен-З-он (тестостерон)
17а-Этинилэстра-1,3,5 (10) триен-3,17[$-диол
Эстра-1,3,5 (10)-триен-3,17[5-диол (эстрадиол) 17[$-Г идроксиандрост-
4-ен-З-он (тестостерон) 17[5Т идроксиэстр-4-ен-
3-он (19-нортестосте-рон)
17[3-Гндроксиэстр-4-ен-
3-он (19-нортестосте-рон
Эстр а-1,3,5 (10) -триен-3,17[$-диол (эстрадиол)
17[ЗТидрокснандрост-
4-ен-З-он (тестостерон)
бр,17р-Дигидроксианд-рост-4-ен-З-он 14а,17[5-Дигидроксианд-рост-4-ен-З-
ои Эстра-1,3,5 (10) -триен-3,16а,17^-триол (эстри-ол)
17[5-Ацетоксиандрост-
4-ен-З-он 17[5-Пропионилоксианд-рост-4-ен-З-он 1/[5-Валерилоксиэстра-
1.3.5 (10) -трнен-3-ол 17р-[р- (Фенилпропионил-
оксн) ]-эстр-4-ен-3-он
17ti-[p- (Фу рнлпропионил-окси)]-эстр-4-ен-3-он
17а-Г идрокси-21 -ацеток-сипрегн-4-ен-3,11,20-трион (ацетат кортизона)
11 р, 17а-Дигидрокси-21 -ацетоксипрегн-4-ен-
3,20-дион (ацетат гидрокортизона) Прегн-4-ен-3,20-дион (прогестерон)
3-Метоксн-17а-этинил-эстра-1,3,5(10) -триен-17Р-ол
З-Бензоилоксиэстра-
1.3.5 (10) -триен- 17р-ол 17рТидроксн-17а-метнл-
андрост-4-ен-З-он 17[$Тидрокси-17а-ме-тилэстр-4-ен-З-он
17[$-Гидрокси-17а-этил-
эстр-4-ен-З-он
17а-Этнннлэстра-
1,3,5 (10) -триен-3,17р-диол
17[$-Гндрокси-17а-этн-
ниландрост-4-ен-З-он
и модифицированными функциональными группами [65]
ная скорость: 1,5 мл/мин; обнаружение: по поглощению при 254 нм или
рефрактометри-
Метанол/вода (по объему) Ацетоннтрил/вода (по объему)
(указано в скобках) (указано в скобках)
Alog VR v* мл Alog VR vg мл
иемоднф. модиф. немодиф. моднф.
---0,83 7,40 1,10 --- 1,08 1,70(2:3) 2,90(1:4)
(1 : 1) 7,40(1:1) 3,10(2:3) (расч.) 1,70(2:3) 3,50(1:4)
---0,91 4,40(1: 1) 1,40(2:3) ---0,99 18,60 1,65
(расч.) (расч.)
--- 1,03 --- 1,05
(расч.) (1:4)
0,66 7,40(1:1) 1,40(4:1) 0,69 (2:3) 1,70 8,40
