Высокоэффективная жидкостная хроматография в биохимии - Хеншен А.
ISBN 5-03-001337-7
Скачать (прямая ссылка):
17-Фосфат эсградиола-17р 16,8 8,4 7,3 7,6 5,8 10,4 0,56 3,3
4,7 3,5 4,4 14,4 16,2
3-Фосфат 17р-эстрадиола 12,5 10,2 9,9 13,0 31,8 9,1 0,48 4,6
12,7 6,0 21,3 20,3 17,1
3-Фосфат эстрона 13,3 10,2 11,3 13,6 33,6 10,0 0,54 4,7
12,7 5,8 21,7 19,6 15,6
Таблица 11.8. Коэффициенты емкости глюкуроиидов эстрогенов при разделении
на поверхностно-пористых и полистнрольных аииоиообменииках [37]
Колонка: 250X3 мм (внутр. диаметр); неподвижная фаза: зипакс SAX (Л-Г),
пеллнонекс WAX (Д-3) и амииекс А-28 (Я-О); элюент: А - 3,0 М ацетпт (pH
4,0), 20 °С, 5 - 2,0 М ацетпт (pH 4,0), 20 "С, В - 2,0 М ацетат (pH 4,0),
40 °С, Г -2,0 М пцетат (pH 4,0), 60 °С, Д- 0,005 М перхло-рат+0,0002 М
фосфпт (pH 4,0), 20 °С, ? - 0,01 М перхлорат+0,0002М фосфат (pH 4,0), 20
дС, Ж - 0,01 М. перхлорат+0,0002 М фосфат (pH 4,0), 40 °С, 3 - 0,01 М
перхлорпт+0,0002 М фосфат (pH 4,0), 60 вС, Я -0,1 М ацетат (pH 4,0), 20
°С, /С - 6,0 М пцетпт (pH 4,0), 70 °С, ./7 - 8,3 М ацетпт (pH 4,0), 70'С,
/И-8,3 М пцетат (pH 4,0), 90 °С, // - 8,3 М пцетпт (pH 5,1), 90 °С, 0-
10,1 М ацетат (pH 4.0), 90 °С
Соединение А Б в Г Д Е Ж 3
и К .7 м н о
fi-D-Глюкуронид тестостерона 0,00 1,09 0,94 0,60 1,37 0,78 0,77 0,76
0,86 4,8 1,61 1,51 1,75 0,65
З-р-О-Глюкуронид эстриола 0,00 0,17 0,17 0,13 2,3 1,26 1,14 0,92
1,99 6,4 2,5 2,3 2,5 1,11
17-[5-0-Глюкуронид эстриола 0,26 1,57 1,15 0,76 3,5 --- 1,72 1,47
--- --- 7,0 5,9 6,2 2,8
16-р-О-Глюкуроиид эстриола 0,26 1,67 1,20 0,80 3,9 2,0 1,81 1,56
4,2 --- 7,5 6,1 6,6 2,9
fJ-D-Глюкуронид эстрона 0,29 2,4 1,45 1,02 6,4 3,6 2,6 1,95
2,2 --- 4,9 4,1 4,9 2,0
З-^-О-Глюкуронид эстрадиола-17Р 0,42 2,7 1,79 1,20 5,5 2,9 2,6 1,84
4,1 --- 7,2 6,1 7,3 2,9
17-{1-0-Глюкуроиид эстрадиола-17р 1,00 6,3 3,7 2,2 6,0 3,6 2,8 2,4
9,1 --- 14,3 11,0 14,1 5,3
1
Рис. 11.13. Хроматограмма глюкуро-нидов эстрогенов ("37].
Колонка: 250X3 мм (внутр. диаметр); неподвижная фаза: аминекс А-28 (8-12
мкм); элюеит: 10,1 М ацетат, pH 4,0; обнаружение: при 275 нм;
температура: 90 °С; давление: 90 бар.
1 - цитозин; 2 - p-D-глюкуронид тестостерона; 3 - З-Р-О-глюкуронид
эстриола; 4 - fS-D-глюкуроиид эстрона; 5 - З^-И-глюку-роиид эстрадиола-
173; 6-17-Р-О-глюкуро-нид эстрадиола-17Р.
t.NWH
Таблица 11.9. Зависимость коэффициентов^ емкости конъюгатов эстрогенов
от состава метанольной буферной подвижной фазы [37]
Колонка: 250X 3 мм (внутр. днаметр); неподвижная фаза: лихросорб RP8 (5
мкм); обнаружение: по поглощению при 220 илн 275 им; температура: 25 С,
элюеит. А 40/0 метанола 1-60% 0 08 М фосфата (pH 4,5), В -40%
метаиола+60% ВД5 М фосфата (pH 7,7), В- 40"Гметаиола+60% (0,05 М фосфата
(pH 7,7)+0,5 М NaCIOJ. Г - 40% ме(tm)иола + +601% (0,07 М фосфата (pH
4,5)+0,1 М триметиламнна), Д - 40% метаиола+60% (0,07 М фосфата (pH 4
5)+0 1 М триметиламина+0,05 М пеитансульфоновой кислоты) Е 40 h метанол
а+60% (0,07 М фосфата (pH 4,5)+0,05 М пеитансульфоновой кислоты)
Соединения
д
З-р-Э-Глюкуронид эстриола 17-Р-О-Глюкуронид эстриола
16-Р-О-Глюкуронид эстриола Р-О-ГлюкурсЯшд эстрона З-р-Э-Глюкуронид
эстрадиола-17fi
17-р-0-Глюкуронид эстрадиола-17fi p-D-Глюкуронид тестостерона 3-
Сульфат эстриола 17-Сульфат эстриола 3-Сульфат эквиленина 3-Сульфат 17а-
дигидроэквиленина 3-Сульфат эквиленина 3-Сульфат эстрона
3-Сульфат 17а-дигидроэквилина 3-Сульфат эстрадиола-17]} 17-Сульфат
эстрадиола-17Р 0-Сульфат эстрадиола-17а Сульфат тестостерона
0,75
4.5
4.6
6.4 8,2
11,8
16.5 1,8 6,2
9.5
10.5
11.5
13.1
13.1
15.1
16.6
17.2 22,8
0,45
2,6
2,8
3.8
4.6 6,2 8,2 1,2
3.9 "5,5 6,2 6,8
7.7
7.7 9,1 10,0 10,2 13,3
0,45
2,8
2.9 3,7 4,6 6,5 7,4 1,2
3.9
5.2 6,1
6.3 7,2
7.9
8.9 10,5 10,0 12,0
0,55
3.4
3.7
5.1
6.1 8,6
11,2
1.7
5.2
7.5 8,4
9.3
10.3
10.5
12.3
13.6 13,8 18,0
0,25
1.9
1.9 2,8
3.5
4.6 6,2 0,7
2.6 3,8
4.4
4.7
5.4
5.7
6.5 7,3 7,2
9.5
Таблица 11.10. Зависимость коэффициентов емкости конъюгатов эстрогенов
от органических модификаторов подвижной фазы н температуры колонки [37]
1рН во), 70'С, К - 2% хлороформ а+35% метанола+63% 0,05" М ф'осфата'(рН
8,0),"70 °сГ Л-'гО^Г'ме^^олГ+М^'адетонитрнла 0,05 ^фос-
ф2т& (pH 5,0)
Соединение А Е в г Д Е ж 3
и к 25 СС л 75 °С
50 °С
3-[5-0-Глюкуронид эстриола 0,8 0,7 0,7 1,0 0,6 0,6 0,4 0,55
0,5 0,1 0,17 0,14 0,13
17-р-0-Глюкуронид эстриола 3,0 3,5 3,4 4,3 2,7 2,7 1,8 2,4