Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Хеншен А. -> "Высокоэффективная жидкостная хроматография в биохимии" -> 105

Высокоэффективная жидкостная хроматография в биохимии - Хеншен А.

Хеншен А. Высокоэффективная жидкостная хроматография в биохимии — М.: Мир, 1988. — 688 c.
ISBN 5-03-001337-7
Скачать (прямая ссылка): visokoeffektivnayajidkostnayahromatograf1988.djvu
Предыдущая << 1 .. 99 100 101 102 103 104 < 105 > 106 107 108 109 110 111 .. 296 >> Следующая

Practical Aspects of Modern HPLC, p, 123, Walter de Gruyter, Berlin - New
York, 1982.
408. Kehl М., Lottspeich F., Henschen A., in I. Molnar (ed.): Practical
Aspects of Modern HPLC, p. 137, Walter de Gruyter, Berlin - New York,
1982.
409. Ritschmann М., Kuehn L., Dahlmann B., Reinsuer H. Anal. Biochem.,
124, 134 (1982).
410. Hara S., Ohsawa S., Dobashi A. J. Liqu. Chromatogr., 4, 409 (1981).
411. Buchholz K., Borchert A., Kasche S. V., in: I. Molnar (ed.):
Practical Aspects of Modern HPLC, p. 187, Walter de Gruyter, Berlin-New
York, 1982.
412. Griffin M., Wilson J., Lorand L. Anal. Biochem., 124, 406 (1982).
413. Mahoney W. C. Biochim. Biophys. Acta, 704, 284 (1982).
414. Kosow D. P., Morris S., Orther C. L., Rhee M.-J. Anal. Biochem.,
126, 425 (1982).
415. Kato Y., Komiya K., Hishimoto T. J. Chromatogr., 246, 13 (1982).
416. Lewis R. V., DeWald D. J. Liqu. Chromatogr., 5, 1367 (1982).
417. Fulton J. A., Schlabach T. D., Kerl J. E., Toren E. C. J.
Chromatogr., 175, 283 (1979).
418. Alpert A. J., Regnier F. E. J. Chromatogr., 185, 375 (1979).
5
Пептидные гормоны
В. Вёльтер (W. Voelter)
5.1. Введение
Высокоэффективная жидкостная хроматография - это современная методика,
позволяющая химику, исследующему пептидные гормоны, проводить их быстрое
разделение, очистку и структурный анализ.
5.2. Принципы разделения
5.2.1. Обращенно-фазовая высокоэффективная жидкостная хроматография (ОФ-
ВЭЖХ)
ОФ-ВЭЖХ представляет особый интерес для исследователей пептидных
гормонов, что объясняется наличием большого числа доступных колонок,
отличающихся высокой эффективностью, прекрасной селективностью и
устойчивостью к действию давления, быстро переуравновешиваемых и редко
дающих протечки; неподвижные фазы, используемые в таких колонках,
устойчивы к действию органических растворителей и слабых кислот.
Обращенные неподвижные фазы, пригодные для разделения пептидных гормонов,
выпускаются многими фирмами. К числу таких фаз относятся: биорад ODS
(наиболее пригоден для разделения гидрофильных пептидов), |л-бондапак
алкил-фенил, (л-бондапак Cis, |л-бондапак дианопропил (наиболее пригоден
для разделения гидрофильных пептидов), С^-корасил, Cis-LP-1, гиперсил
ODS, лихросорб Сг, лихросорб диол, лихро-сорб Се, лихросорб Ci8 (пригоден
для разделения гидрофильных пептидов), нуклеосил Се, нуклеосил Cie,
нуклеосил 5CN и пар-тисил ODS-1 (пригодны для разделения гидрофобных
пептидов), партисил ODS-2 (пригоден для разделения гидрофильных
пептидов), партисил-Ю-(валин-аланин-пролин), партисил-10-(валин-
фенилаланин-пролин), фенил-Sil-X-l, порагель PN, по-рагель PS,
силикагель-СТ-(валин-аланин-серин), силикагель-диамин, сферисорб ODS,
зорбакс С-8 или зорбакс ODS (пригодны для разделения гидрофильных
пептидов).
При разделении пептидов или пептидных гормонов методом ОФ-ВЭЖХ в
качестве подвижной фазы используются водные
262 Глава 5
Таблица 5.1. Время удерживания 25 пептидов и пептидных гормонов при
разделении методом ВЭЖХа [15]
Соединение Время удер Соединение Время удер
живания, мин живания, мин
pH pH pH pH
7.4 2.1 7.4 2, 1
1. Триглицин 2,0 3,0 14. Церулеин 34,2 42,2
2. Пентааланян 4,6 8,1 15. Окситоцин 36,4 37,9
3. Дивалин 6,9 14,5 16. Гастрии-(12-15) 36,5 42,4
4. Диметионин 10,5 21,0 17. Нейротеизии 39,0 48,0
5. Рилизинг-фактор 11,5 11,2 18. Физалаемин 41,0 4*,0
тиреотропина ill9. Трифенилаланин 41,6 49,5
6. Тафцин 11,7 12,0 20. Рилизииг-фактор 42,8 49,5
7. Тритирозин 19,5 29,7 лютеинизирующего
8. (Ме1)-Энкефалии 27,5 38,0 гормона
9. Трилейцин 28,0 36,8 21. а-Меланотропин 46,2 46,2
10. (Ьеи)-Энкефалнн 29,3 42,0 22. Брадикинин 48,0 45,0
11. Дитриптофан 31,6 44,3 23. Эледонзин 53,0 44,0
12. Ангиотензин II 32,2 47,5 24. Глюкагон 53,6 60,0
13. а-Эндорфин 32,3 47,7 25. Соматостатин 57,5 55,0
* Условия разделения. Неподвижная фаза: биорад ODS; элюент: А-0,1 М
NaCIO" (pH 7,4 и 2,1), Б - ацетонитрил, градиентное элюирование от 0 до
60% Б в течение 80 мин. 0,75%/мин; температура: комнатная. При pH 7,4 в
исходный буферный раствор вводят 5 мМ фосфатный буфер, при pH 2,1 -0,1%
фосфорной кислоты.
эастворы, например Н3РО4 [1], фосфатные буферные растворы 2, 3], раствор
фосфата триэтиламмония [4, 5], НСЮ4 [6], НС1 7], СН3СООН [7], CF3COOH
[8], NH4OOCCH3 [9-11] или NH4HCO3 [12], которые обычно смешиваются с
растворимыми в воде органическими растворителями, увеличивающими
элюирующую силу подвижной фазы, например метанолом, уксусной кислотой,
этанолом, ацетонитрилом, 2-пропанолом, диметил-формамидом, ацетоном, н-
пропанолом и диоксаном. Как правило, добавление 10% органического
Предыдущая << 1 .. 99 100 101 102 103 104 < 105 > 106 107 108 109 110 111 .. 296 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed