Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Гоулдстей Дж. -> "Растровая электронная микроскопия и рентгеновский микроанализ. Том 1" -> 98

Растровая электронная микроскопия и рентгеновский микроанализ. Том 1 - Гоулдстей Дж.

Гоулдстей Дж., Ньюбери Д., Эчлин П., Джой Д., Фиори Ч., Лифшин Э. Растровая электронная микроскопия и рентгеновский микроанализ. Том 1 — М.: Мир, 1984. — 348 c.
Скачать (прямая ссылка): rastovayaelektronnayamicroskopiya1984.djvu
Предыдущая << 1 .. 92 93 94 95 96 97 < 98 > 99 100 101 102 103 104 .. 139 >> Следующая

[380], а позднее был видоизменен в [381]. Прошедший фиксацию в альдегиде
и осмии образец обрабатывается лигандсвязывающим агентом, таким, как
тиокарбазид, который связывает имеющийся в ткани осмий в одной из
конечных аминогруппах, а другие конечные аминогруппы теперь имеют
возможность связать дополнительный осмий, который добавляется после
удаления избытка тио-карбазида. Обычно этот метод называется методом ОТО
(осмий--тиокарбазид - осмий); изображение, полученное этим методом,
показано на рис. 11.24. До тех пор пока осмий остается неокисленным,
последовательность операций может повторяться несколько раз, чтобы быть
уверенным в большем осаждении. В работах [382, 383] приводится полезная
модификация этого метода для растительного материала. Пример клетки,
Таблица 11.1. Артефакты за счет ошибок препарирования образца
Пузыри и раковины на поверхности
Лопнувшие пузыри Сплющивания поверхности клетки Кристаллы на поверхности
Отслаивание клеток Образование направленных складок на поверхности
Повреждение клеток
Повреждение поверхности клетки Искажение формы клетки Мелкие частицы на
поверхности
Общая усадка
Сильное повреждение
Увеличенные размеры клетки Обособление и коагуляция внутреннего
содержимого Большие частицы Большие регулярные отверстия Большие
поверхностные трещины Микрокристаллические осадки
Завуалированные детали поверхности
Пластические деформации Регулярные щели и разрезы Прободение содержимого
клетки Разделение клеток Сморщенные отростки Сморщивание клеток
Незначительное сморщивание Маленькие дырки на поверхности Гладкие
поверхности перекрываются с участками с выраженными деталями.
Пятнистая поверхность Растянутая поверхность клетки Волокна и кусочки
материала на поверхности Трещины и следы травления
Изгибы н/или складки на поверхности
Оплавление поверхности Шелушение поверхности
Разбухание образца
- неправильное начальное промывание, гипертонический фиксатор
- гипертонический фиксатор
- начальная сушка на воздухе
- буферные электролиты, умеренные электролиты
- плохое замораживание
- артефакт резки замороженного материала
- плохая фиксация, плохое замораживание, начальная сушка на воздухе
- плохая промывка, плохая фиксация
- сушка на воздухе
- слишком толстое или неправильно нанесенное покрытие
-- гипотонические фиксаторы и промывочные среды
- неправильная обработка препарируемого материала, микробный распад
- слишком толстое покрытие
- плохая фиксация (обезвоживание)
- дезинтеграция образца, пыль, грязь
- повреждение при замораживании
- движение слоя покрытия
- неправильный буфер, фиксатор или краситель
- слишком толстое покрытие
- неправильные резка, излом
- термическое сжатие между клетками
- плохая сушка в критической точке
- неправильная фиксация
- гипотоническая фиксация
- перегрев в процессе фиксации
- плохая сушка в критической точке
- неправильно распыленное покрытие
- неправильная сушка
- загрязнения в вакуумном испарителе
- гипотоническая фиксация
- неправильная промывка
- неправильное нанесение покрытия распылением
- неправильное pH фиксатора
- перегрев в процессе нанесения покрытия
- сушка на воздухе органической жидкости, медленное применение фиксатора
- гипертонические буферы и фиксаторы, плохая лиофильная сушка
260
Глава 11
препарированной методом [384], приведен на рис. 11.25. В качестве
лигандсвязывающего агента была также использована дубильная кислота.
Другие менее специфические химические обработки образцов, повышающие их
проводимость, включают использование паров осмия, йодистого калия и
уксуснокислого ацетата и нитрата серебра. Эта и другие методики
заполнения металлами были недавно обобщены в работах [384, 281, 282].
Общий эффект всех этих химических обработок заключается в увеличении
объемной проводимости и эмиссионной способности образцов, что позволяет
наблюдать их в РЭМ без нанесения покрытия, хотя и не при максимальных
рабочих возможностях прибора.
11.3.11. Интерпретация результатов и артефакты
Несмотря на то что довольно тщательно разработано большинство методов
препарирования, случаются ошибки, и важно уметь распознать артефакты на
конечном изображении. В процессе препарирования или в процессе наблюдения
может произойти повреждение образца, и часто бывает трудно отличить одно
повреждение от другого. Именно по этой причине так важны сравнительные
исследования, так как каждый из разных методов позволит перекрестно
отображать весь процесс препарирования. Ряд наиболее часто встречающихся
артефактов, а также предполагаемая причина каждого вида повреждений
приведены в табл. 11.1 и 11.2.
В работе [385] представлены подобные результаты в виде изображений,
которые должны изучать все пользователи РЭМ.
Таблица 11.2. Вносимые при наблюдении образца артефакты, как они
проявляются на изображении
Искажение фона Яркие области Яркие области в полостях Яркие полосы Пузыри
на поверхности Кратеры на поверхности Темные области на образце Темный
квадрат растра Дисторсия изображения Сдвиг изображения Светлые и темные
Предыдущая << 1 .. 92 93 94 95 96 97 < 98 > 99 100 101 102 103 104 .. 139 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed