Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Гоулдстей Дж. -> "Растровая электронная микроскопия и рентгеновский микроанализ. Том 1" -> 24

Растровая электронная микроскопия и рентгеновский микроанализ. Том 1 - Гоулдстей Дж.

Гоулдстей Дж., Ньюбери Д., Эчлин П., Джой Д., Фиори Ч., Лифшин Э. Растровая электронная микроскопия и рентгеновский микроанализ. Том 1 — М.: Мир, 1984. — 348 c.
Скачать (прямая ссылка): rastovayaelektronnayamicroskopiya1984.djvu
Предыдущая << 1 .. 18 19 20 21 22 23 < 24 > 25 26 27 28 29 30 .. 139 >> Следующая

величиной, составляющей +10 отн. % истинного значения. Такая
неопределенность обусловлена тем, что биологические материалы являются
далеко не идеальными образцами, имеют различную геометрию и шероховатость
поверхности, часто для их приготовления используются сомнительные методы,
и они могут явиться эффективным источником загрязнений чистой в других
отношениях окружающей среды. Другая проблема, специфическая для
количественного анализа биологических систем, заключается в том, что
большинство элементов в образце, например углерод, кислород, азот и
водород, трудно точно измерять. В отличие от анализа в материаловедении в
большинстве случаев использования рентгеновского микроанализа в биологии
требуется измерить концентрацию элементов (Z>10), содержащихся в малом
количестве в плохо известной органической матрице. Следует также
напомнить, что рентгеновские спектрометры регистрируют только вышедшее
рентгеновское излучение, а оно не всегда полностью соответствует
рентгеновскому излучению, генерируемому в образце. Эта проблема
усугубляется тем, что в биологических материалах электроны проникают
более глубоко, вследствие чего возрастает поглощение генерируемого
рентгеновского излучения. Попытки впоследствии скорректировать поглощение
затрудняются отсутствием полной характеристики органической матрицы и
точных значений массовых коэффициентов поглощения для элементов с низкими
атомными номерами. Поэтому центром обсуждения этого раздела являются
поправки, которые можно ввести, чтобы сузить разрыв между численными
значениями интенсивностей рентгеновского излучения, генерируемого в
образце, и регистрируемого и измеряемого. Рассмотрение вопроса, что
меряет рентгеновский микроанализатор в биологических системах [179],
показывает, что
70
Глава 7
термин "концентрация" лучше всего трактовать как локальную массовую долю.
Локальная массовая доля определяется как масса элемента в анализируемом
микрообъеме, деленная на общую массу образца в том же микрообъеме.
Удобнее выразить эту локальную массовую долю либо в виде вес/вес, т. е.
количество миллиграммов элемента на килограмм локальной сухой массы, либо
как количество миллимолей элемента на ки-логоамм образца. Последнее
выражение чаще используется Физиологами, хотя следует понимать, что
результаты относятся к образцу в момент анализа. Таким образом, локальная
массовая доля, выраженная в единицах мМ/кг, является мерой общего
количества элемента в анализируемом микрообъеме без различия между
связанной и несвязанной формами. В то время как результаты рентгеновского
микроанализа можно представить в единицах мМ/кг, часто возникает
необходимость комбинировать данные рентгеновского микроанализа с
результатами прямых (микроэлектроды с селективностью по ионам) и непрямых
(экстракция микропипеткой с последующим атомно-абсорбционным анализом)
измерений жидкой фазы для того, чтобы выразить результаты измерения в
единицах мМ/л. Хотя в водных внеклеточных средах, где доля сухой массы
равна нулю, сравнительно просто точно измерить"концентрацию несвязанных
элементов, провести такие измерения во внутриклеточных ячейках
значительно труднее.
При обсуждении методов количественного анализа удобно рассмотреть по
отдельности различные типы образцов. Массивными образцами являются такие,
толщина которых значительно превышает глубину проникновения падающих
электронов; толстые среды на массивных подложках - это такие образцы,
толщина которых немного меньше глубины проникновения электронов, а тонкие
образцы на очень тонких подложках - это образцы, толщина которых много
меньше глубины проникновения падающих электронов. К этим трем категориям
можно добавить еще два рода образцов, требующих краткого рассмотрения:
толстые образцы на очень тонких подложках и микрокапечьки. Следует,
однако, напомнить, что в основном рентгеновский микроанализ биологических
материалов производится на срезах, монтируемых на тонких подложках.
7.7.2. Потери массы и артефакты, возникающие в процессе анализа
Прежде чем приступить к обсуждению различных методов количественного
анализа, уместно вначале рассмотреть основные ошибки и артефакты, которые
могут возникнуть в процессе накопления рентгеновского спектра.
Проблемы,'связанные с на-
Количественный рентгеновский микроанализ
71
ложением спектров, с появлением фиктивных сигналов рентгеновского
излучения от окружающей держатель образца среды и прибора и с поглощением
рентгеновского излучения самим образцом, уже обсуждались. В этом разделе
мы рассмотрим способы устранения этих посторонних сигналов и введения
несложных процедур коррекции для оценки рентгеновского сигнала от образца
с разумной точностью.
В настоящее время установлено, что пучки высокоэнергетических электронов,
используемые в электронной микроскопии и микроанализе, могут разрушающе
действовать на образец. Такое повреждение пучком обычно более значительно
в органических и биологических образцах [180], и важно знать о таких
Предыдущая << 1 .. 18 19 20 21 22 23 < 24 > 25 26 27 28 29 30 .. 139 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed