Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Гоулдстей Дж. -> "Растровая электронная микроскопия и рентгеновский микроанализ. Том 1" -> 121

Растровая электронная микроскопия и рентгеновский микроанализ. Том 1 - Гоулдстей Дж.

Гоулдстей Дж., Ньюбери Д., Эчлин П., Джой Д., Фиори Ч., Лифшин Э. Растровая электронная микроскопия и рентгеновский микроанализ. Том 1 — М.: Мир, 1984. — 348 c.
Скачать (прямая ссылка): rastovayaelektronnayamicroskopiya1984.djvu
Предыдущая << 1 .. 115 116 117 118 119 120 < 121 > 122 123 124 125 126 127 .. 139 >> Следующая

возможность проведения поверхностного травления образцов означает, что с
поверхности излома может сублимировать тонкий, т. е. толщиной 0,1-- 1,0
мкм, поверхностный слой воды, выявляя морфологию образца, в то время как
образец в массе остается полностью замороженным в гидратированном
состоянии.
12.3.10. Обращение с образцом
Существуют специальные вопросы, как обращаться с замороженным
биологическим материалом, в частности, при переносе образцов из одного
прибора в другой. В работе [450] было показано, что наиболее важно
проводить лиофильную сушку срезов строго контролируемым образом. В этой
работе срезы собирались на сеточках для электронного микроскопа и
медленно высушивались при низкой температуре в течение нескольких часов.
В работе [449] замороженные срезы помещались между двумя сеточками,
покрытыми углеродом, а затем медленно высушивались в потоке сухого азота.
Если процесс лиофильной сушки происходит слишком быстро, то начнется рост
кристаллов льда с последующим перераспределением растворимых эле-
316
Глава 12
ментов. Как только сушка образца окончена, важно, чтобы они не смогли
снова поглотить воду, так как это может вызвать значительные изменения в
морфологии клетки, также вызывая перераспределение электролитов.
Если проводится исследование замороженных в гидратированном состоянии
образцов, то необходимо вносить срезы в микроанализатор в состоянии,
когда есть уверенность, что они не утеряли воду (за счет плавления или
сублимации) и не накопили ее (за счет конденсации из загрязненной
атмосферы). Был разработан целый ряд переносных устройств, и все они
служат одной и той же цели - сохранить образец холодным (~123 К) и не
загрязненным. В работе ;[473] была разработана полезная и простая
методика, в которой образцы до препарирования и переноса заключались в
формваровый контейнер.
Наконец, важно рассмотреть сложный вопрос, остается ли замороженный в
гидратированном состоянии образец в таком же состоянии во время
препарирования, исследования и анализа. В работах [465, 300, 277, 201]
был предложен целый ряд критериев, которые могли бы быть полезными в
определении того, остается ли образец замороженным в гидратированном
состоянии во время анализа. В работах [304, 474, 475] было показано, что
тонкие срезы не плавятся под электронным пучком, что является
доказательством того, что они остаются достаточно холодными. Все эти
критерии, по-видимому, не могут быть применимыми во всех условиях.
Количественный анализ замороженных в гидратированном состоянии и частично
замороженных в гидратированном состоянии срезов, вероятно, представляет
собой кульминационный пункт биологического микроанализа, так как в
настоящее время представляется, что это единственный путь, позволяющий
определить низкие концентрации растворимых элементов внутри различных
клеточных фрагментов и в межклеточных пространствах.
12.4. МИКРООЗОЛЕНИЕ
С некоторых пор известно, что можно удалять органический материал из
биологического материала, помещая его в муфельную печь при температуре
773 К или низкотемпературным озо-лением в дуге реактивной кислородной
плазмы [476]. Микро-озоление, хотя и не является идеальным методом,
находит, однако, ограниченное применение в микроанализе. В работе [477]
определены Fe и Си в бактериях, а в работе [478] этот метод использовался
как часть процедуры препарирования для анализа ткани образцов, и
установлено, что с его помощью можно было бы надежно контролировать
наличие некоторых летучих
Препарирование биологических образцов для РМА
317
веществ, таких, как сера и хлор. В работе [479] этот метод был также
применен к растительному материалу. В работе [480] описываются способы, с
помощью которых ультрамикроозоле-ние может быть использовано для тонких
срезов ткани. Хотя эта методика потенциально является полезным методом
удаления фонового материала, когда содержание минерала мало, в работе
[481] при исследовании микроозоленных срезов смол показали, что в то
время, как чувствительность рентгеновского микроанализа к сере, кальцию и
фосфору увеличилась, происходила потеря хлора из образца.
Так как имеется вероятность того, что некоторые элементы смещаются в
процессе микроозоления, применение этих методов было бы оправданным для
связанных элементов и элементов с низкой летучестью.
ЛИТЕРАТУРА
1. Smith К- С. А. (1956). Ph. D. Dissertation, Cambridge University.
2. Pease R. F. W., Nixon W. C. (1965). J. Sci. Instr., 42, 81.
3. Mulvey T. (1974). SEM/74, IIT Research Institute, Chicago, Illinois,
p. 44.
4. Joy D. C. (1974). SEM/74/I, IIT Research Institute, Chicago, Illinois,
p. 327.
5. Joy D. C., Maher D. M. (1976). SEM/1976/II, IIT Research Institute,
Chicago, Illinois, p. 361.
6. a. Broers A. N. (1974). "8th Int'l Congr. on Electron, Microscopy,
Canberra", vol. 1, p. 54. 6. Broers A. N. (1974). SEM/74 IIT Research
Institute, Chicago, Illinois, p. 9.
7. Broers A. N. (1973). Microprobe Analysis, ed C. A. Andersen, J. Wiley,
Предыдущая << 1 .. 115 116 117 118 119 120 < 121 > 122 123 124 125 126 127 .. 139 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed