Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Гоулдстей Дж. -> "Растровая электронная микроскопия и рентгеновский микроанализ. Том 1" -> 101

Растровая электронная микроскопия и рентгеновский микроанализ. Том 1 - Гоулдстей Дж.

Гоулдстей Дж., Ньюбери Д., Эчлин П., Джой Д., Фиори Ч., Лифшин Э. Растровая электронная микроскопия и рентгеновский микроанализ. Том 1 — М.: Мир, 1984. — 348 c.
Скачать (прямая ссылка): rastovayaelektronnayamicroskopiya1984.djvu
Предыдущая << 1 .. 95 96 97 98 99 100 < 101 > 102 103 104 105 106 107 .. 139 >> Следующая

компромисс за счет рабочих характеристик приборов дает малый выигрыш, и
это означает, что мы должны внимательно рассматривать способы
препарирования биологического материала. Большая часть разработанных
процедур основывается на методах, используемых в просвечивающей
электронной микроскопии. Это неоптимальное наследие, так как
просвечивающая электронная микроскопия полагается на адекватную
сохранность макромолекул, в то время как в рентгеновском микроанализаторе
определяются элементы и он, таким образом, лучше всего подходит для
анализа неорганических материалов. Тщательные исследования, проведенные в
работе [184], показывают, что на всех этапах стандартных гистологических
методов имеют место огромная потеря и перераспределение почти всех
элементов. Потеря вещества также далеко неоднородна, например, большое
количество калия удаляется, а количество удаляемого фосфора различно и
зависит от строения ткани. Концентрации элементов, которые могут быть
введены в ткань в процессе препарирования, должны быть одинаковы. Методы
препарирования при рассмотрении делятся на две группы (проводимые при
обычной температуре и проводимые при низкой температуре) и представлены в
поряде проведения процедуры препарирования от живого объекта до образца,
исследуемого внутри рентгеновского микроанализатора. Мы кратко обсудим
высокотемпературный метод препарирования - "микроозоление". Для
достижения необходимого представления о состоянии и перспективе методов
препарирования мы в первую очередь рассмотрим виды аналитических
исследований в применении к биологическим системам, типы исследуемых
образцов, а также стратегию и критерии препарирования.
12.1.2. Применения рентгеновского микроанализа
Полезно кратко рассмотреть основные виды исследований, которые
выполняются с помощью рентгеновского микроанализа. Хотя ниже приводится
разбиение исследований по категориям, необходимо согласиться с тем, что
имеет место явное и частое их перекрытие.
а. Локализация ионов и электролитов известных физиологических функций.
б. Изучение систем, которые подвергались искусственно вызванным или
естественным изменениям, например лекарствами, болезнью, гистохимическими
красителями и преципитирующими агентами.
268
Глава 12
в. Локализация энзимной активности.
г. Микрохимический анализ очень малых объемов выжатых или извлеченных
физиологических жидкостей.
д. Взаимосвязь элементного состава с конкретной морфологической
особенностью.
е. Общее распределение ионов и элементов в нормальных растительных и
животных клетках.
Во всех этих шести категориях анализируемый элемент (элементы) может
находиться в виде различных форм: в качестве аморфных или кристаллических
осадков, молекул или макромолекул с ковалентной связью, молекул или
макромолекул с ионной связью, в качестве несвязанного иона или
растворимого элемента, свободно распределенного в клеточной и тканевой
жидкости.
12.1.3. Виды рентгеновских аналитических исследований
Исследования могут производиться на двух уровнях по сложности. В
качественном анализе пытаются определить, присутствует ли данный элемент
в клетке или ткани. На рис. 12.1 показан пример качественного анализа,
выполненного на куске древесины, пропитанной защитным средством,
содержащим медь. В количественном анализе пытаются измерить, содержится
ли в одной части клетки или ткани больше или меньше данного элемента, чем
в другой. Конечная цель количественного анализа - определить настолько
точно, насколько это возможно, какое количество данного элемента
присутствует в данном объеме ткани. Большинство опубликованных работ по
рентгеновскому микроанализу относится к первой категории, и при условии,
что приняты соответствующие меры в процессе препарирования образца, эта
методика может дать ценную биологическую информацию. Вторая категория
точного количественного анализа является в какой-то мере более сложной и
требует гораздо больше, чем просто оптимального препарирования образца.
Необходимо, например, иметь точные стандарты, высокую стабильность
прибора и электронно-вычислительные средства, способные анализировать
большое количество повторяющихся данных.
12.1.4. Типы биологических образцов
Образцы для рентгеновского микроанализа удобно разбить на шесть различных
типов. Различные типы образцов имеют разное пространственное разрешение в
рентгеновском микроанализе, зависящее от объема области генерации
излучения в образце. Этот объем является как функцией диаметра пучка и
глубины проникновения электронов, так и рассеяния электронов и
рентгеновского излучения внутри образца.
Препарирование биологических образцов для РМА
269
Рнс. 12.1. Кусочек сосновой древесины, пропитанный защитным веществом,
содержащим медь.
а - изображение во вторичных электронах. Маркер соответствует 40 мкм; б -
карта распределения рентгеновского излучения для той же области, что и на
снимке а; в - осциллограмма, снятая поперек кусочка древесины, иа которой
Предыдущая << 1 .. 95 96 97 98 99 100 < 101 > 102 103 104 105 106 107 .. 139 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed