Клонирование ДНК. Методы - Гловер Д.
ISBN 5-03-001159-5
Скачать (прямая ссылка):
1. Введение.......................................................107
2. Синтез кДНК....................................................108
3. Упаковка in vitro и рассев гибридных фагов...............115
4. Заключительные замечания.......................................115
Литература....................................................117
Глава 4. Иммунологический метод выявления химерных |3-галактозидаз, экспрессируемых плазмидными векторами (Михель Кёнен, Ганс-Вернер Гриссер и Бенно Мюллер-Хилл).....................118
1. Введение.......................................................118
2. Клонирование в 5'-концевой области гена lac Z...............119
3. Клонирование в З'-концевой области гена lac Z...............122
4. Практические методики..........................................124
5. Общие замечания................................................130
Литература....................................................131
Глава 5. Семейство одноцепочечных векторов pEMBL (Лючиана Денте, Маурицио Соллаццо, Козима Бальдари, Джанни Чезарени и Рикардо Кортесе)........................................................132
1. Введение.......................................................132
2. Семейство pEMBL................................................132
3. Одноцепочечные плазмидные векторы для специальных целей 134
4. Методика получения одноцепочечной ДНК pEMBL .... 136
Литература....................................................139
Глава 6. Методы трансформации Е. coli (Дуглас Ханаан) .... 140
1. Введение.......................................................140
2. Выбор штамма...................................................140
3. Хранение штаммов Е. coli.......................................142
4. Методики трансформации.........................................144
5. Реактивы.......................................................161
6. Оценка результатов трансформации...............................164
7. Практические замечания.........................................167
8. Специальные случаи.............................................168
Литература....................................................173
Глава 7. Применение генетических маркеров для селекции и аллельного обмена индуцированных in vitro мутаций, не имеющих фенотипического проявления у Е. coli (Джанни Чезарени, Чинца Тработ, Дженнаро Чилиберто, Лючиана Денте и Рикардо Кортесе) .................................................................175
1. Общий метод индукции и выявления замен оснований . . . 175
2. Общий метод обмена аллельными последовательностями между
двумя репликонами..............................................183
Литература....................................................189
Глава 8. Направляемый олигонуклеотидами мутагенез в рекомбинантных нитевидных фагах (Ханс-Иоахим Фриц)..........................191
1. Введение и теоретическое обоснование метода...................191
2. Экспериментальные методики....................................195
Литература....................................................205
Оглавление
537
Глава 9. Векторы для грамотрицательных бактерий с широким спектром
хозяев (Ф. Кристофер X. Франклин).........................206
1. Введение ...................................................206
2. Плазмиды с широким спектром хозяев..........................207
3. Практическое применение векторов с широким спектром хозяев 214
4. Векторы с широким спектром хозяев для специальных цепей 219
Литература................................................228
КНИГА II
Глава 1. Методы клонирования в бациллах (Кимбер Г. Харди) . . 230
1. Введение.........................................................230
2. Штаммы и плазмиды................................................231
-3. Выделение плазмидной ДНК........................................238
-4. Приготовление и хранение компетентных клеток...................240
5. Методы изучения экспрессии генов в клетках бацилл . . . 245
Литература . ...........................................249
Глава 2. Клонирование генов в стрептомицетах (Айан С. Хантер) . 251
1. Введение.........................................................251
2. Стратегия клонирования ДНК в стрептомицетах......................252
3. Культивирование штаммов..........................................264
4. Практическое руководство по клонированию ДНК .... 265
5. Среды........................•...................................282
Литература.....................................................284
