Новые методы культуры животных тканей - Фридлянской И.И.
Скачать (прямая ссылка):
Тиамин, -гидрохлорид 10,0
Витамин Ви 0,2
Восстановители
Аскорбиновая кислота 17,5
L-цистеин, гидрохлорид 90,0
Глутатион 15,0
Предшественники нуклеиновых
кислот
Гипоксантин 25,0
Соли
NaCl 6000,0
iKCl 150,0
СаС12-2Н20 120,0
MgCl2-6H20 240,0
MgSOr7H20 200,0
Na2HP04 300,0
KH2PO4 80,0
NaHC03 2240,0
Глюкоза 5000
Таблица 1.6
Состав среды NCTC 109 (мг/л)
(в скобках приведены эквиваленты для аминокислот, выраженные в мМ)
Аминокислоты
L-аланин 31,48 (3,5)
L-a-амино-м-масляная кисло 5,51 (0,5)
та
L-аргишш, гидрохлорид 31,00 (1,5)
L-аспарагин 8,09 (0,6)
L-аюпарашновая кислота 9,91 (0,7)
L-цистин 10,49 (0,4)
L-глкжозамин! 3,20 (0,2)
L-глутаминовая кислота 8,26 (0,5)
L-глутамин 135,73 (9,3)
Г лиции 13,51 (1,8)
L-гистидин 19,73 (1,3)
L-оксилролин 4,09 (0,3)
L-изолейции 18,04 (1,4)
L-лейции 20,44 (1,6)
L-лизин 30,75 (2,1)
L-метионии 4,44 (0,3)
L-орнитин 7,38 (0,6)
L-фенилаланин 16,53 (1,0)
L-пролин 6,13 (0,5)
L-серии 10,75 (1,0)
L-таурии 4,18 (0,3)
L-треонин 18,93 (1,6)
L-триптофан 17,50 (0,9)
L-тирозии 16,44 (0,9)
L-валин 25,00 (2,1)
Витамины
ПтАмииобензойная кислота 0,125
Биотин 0,025
Пантотеиат кальция 0,025
Холинхлорид 1,25
Фолиевая кислота 0,025
Инозитол 0,125
Ниацин 0,0625
Никотинамид 0,0625
Пиридоксаль, гидрохлорид 0,0625
Пиридоксвн, гидрохлорид 0,0625
Рибофлавин 0,025
Тиамин, гидрохлорид 0,025
Витамин А 0,025
Витамин D 0,25
Витамин Е 0,025
Витамин К 0,25
Витамин Big 10,00
Коферменты
НАД 7,0
НАДФ 1,0
Кофермеит А 2,5
Кокарбоксилаза 1,0
Фл а айн а денинд ин уклеопид 1,0
УТФ 1,0
Восстановители.
Аскорбиновая кислота 49,9
L-цистеии, гидрохлорид 259,9
Глутатион 10,1
Предшественники нуклеиновых
кислот
Дезоксиаденозин 10,0
Дезоксицитадин 10,0
Дезожсигуанозин, гидрохло 10,0
рид
Тимидин 10,0
5-метилцитозин 0,1
Источники липидов
Твин 80 22,5
Источники углеводов (кроме
глюкозы)
Глюку ронолахтон 1,8
К'а-глкжуронат • Н20 1.8
Ацетат натрия ¦ ЗН20 50,0
Солм
NaCl 6800,0
КС1 400,0
СаС12 200,0
MgS04-7H20 200,0
Na2HP04 140,0
NaHC03 2200,0
Глюкоза 1000,0
подлежащие изучению, оставались неизменными. Рост, вызывающий отрыв клеточного пласта от стекла или затрудняющий микроскопическое исследование, должен быть максимально заторможен, однако чувствительность к вирусам должна сохраняться 1[81]. Во многих случаях для этого достаточно просто уменьшить концентрацию сыворотки или вовсе изъять ее из состава среды.
Сравнение некоторых сред химически определенного состава
Сыворотка имеет тот недостаток, что способствует росту клеток или содержит ингибиторы вирусов [82]. Почти все среды определенного состава, описанные выше, не способны обеспечить рост подавляющего большинства клеток в отсутствие сыворотки; именно поэтому они служат превосходными поддерживающими средами. В качестве такой среды для первичных культур при приготовлении вирусной вакцины широко используется среда 199. Некоторые среды были созданы специально для поддержания культур тканей. Большинство из них составлено таким образом, чтобы избежать добавления сыворотки, и включает желатину [83] или снятое молоко [84]. Одной из наиболее эффективных является среда, предложенная Смитом [81], в которой содержится ультрафильтрат переваренной печеночной ткани.
