Новые методы культуры животных тканей - Фридлянской И.И.
Скачать (прямая ссылка):
У высших животных рыхлая соединительная ткань — не единственный источник подвижных макрофагов. Часть макрофагов возникает из клеток-предшественников в костном мозге, селезенке и, возможно, в лимфатических узлах и попадает в кровяное русло, где они известны как моноциты, или большие одноядерные лейкоциты, на долю которых у человека приходится около 5% всех белых клеток крови. При многих воспалительных реакциях эти циркулирующие макрофаги миг-
рируют через стенки 'мелких сосудов в область воспаления и попадают в соединительную ткань. За этот счет увеличивается общее число макрофагов в ткани. Они активируют «местные» макрофаги, от которых не отличаются ни морфологически, ни функционально.
Макрофаги широко распространены в тканях центральной нервной системы, куда они попадают в процессе эмбриогенеза [4] и где, находясь в состоянии покоя, входят в состав микроглии. Макрофаги и их предшественники присутствуют также в соединительной ткани легких. Отсюда они постоянно мигрируют в альвеолы и выполняют там важную функцию удаления вдыхаемых с воздухом мелких частиц, в том числе и бактерий. Эти клетки фагоцитируют также различные эндогенные вещества, которые попадают в альвеолы в условиях патологии, например эритроциты при застойных явлениях в малом кругу в связи с сердечной недостаточностью. Эти клетки, известные как альвеолярные фагоциты, называются также пылевыми клетками и клетками сердечных пороков. Подобным же образом осуществляется защита других поверхностей организма, которые подвержены загрязнению, например слизистой глотки и кишечного тракта; эту функцию выполняют макрофаги рыхлой субэпителиальной соединительной ткани.
МАКРОФАГИ КРОВЕНОСНЫХ И ЛИМФАТИЧЕСКИХ
СИНУСОИДОВ
Для макрофагов, функционирующих в рассмотренных выше тканях, характерно амебоидное движение: клетки мигрируют туда, где возникает необходимость в их фагоцитарной активности. Иначе функционируют фиксированные' макрофаги: различные вещества приносятся к ним с током крови или лимфы. Как уже бегло упоминалось, эти клетки служат структурными компонентами специализированных лимфатических и кровеносных сосудов — синусоидов. Кровеносные синусоиды— это сосуды, которые выстланы не эндотелием, а фиксированными макрофагами. Они образуют густую сеть, которая непосредственно контактирует с клетками в определенных органах: в кроветворной ткани костного
мозга, в красной пульпе селезенки, паренхиме печени (макрофаги здесь называют купферовскими клетками в честь описавшего их автора [5]), в коре и мозговом веществе надпочечников, в передней доле гипофиза, па-ращитовидной железе и копчиковом тельце. Эти специализированные сосуды соответствуют кровеносным капиллярам других тканей тела. Лимфатические синусоиды представляют собой пути, по которым проходит большая часть лимфы, направляющаяся в лимфатические узлы. Они несколько больше, чем щели в ткани лимфатических узлов, где имеется крупноячеистая ретикулярная сеть, к волокнам которой прикрепляются макрофаги.
СИСТЕМА МАКРОФАГОВ И ЕЕ ФУНКЦИЯ
На основе применения главным образом прижизненных красителей принято считать, что все макрофаги, мигрирующие и фиксированные, сходны. Исследования, которые привели к этому заключению, обобщены в обзоре Ашофа [6] в 1924 г. С тех пор много было сделано для понимания взаимоотношений макрофагов с другими клетками кроветворных и лимфоидных тканей. Интерес к микроморфологии уступил место изучению функциональных особенностей макрофагов. В настоящее время интенсивно исследуется роль этой системы в инфекционном процессе, в образовании антител, метаболизме пигментов крови, в нарушениях липидного обмена, в метаболизме химиотерапевтических препаратов, биохимические и биофизические свойства, а также ги-перпластические и неопластические потенции этих клеток. Большая часть этих исследований обобщена в обзорах Капелла [7, 8], Дауни [9], Жакоби [10] и в монографии Нельсона[11].
МАКРОФАГИ В КУЛЬТУРЕ
Метод искусственного культивирования играет важную роль в исследованиях активности и функции макрофагов. Первоначально кусочки эксплантатов, содержащие макрофаги, культивировали на естественных средах главным образом © плазме. При таком способе культи-
вирования плазма быстро свертывается, и клетки оказываются в петлях сети, что несколько затрудняет их изучение. Нити фибрина сдавливают клетки точно так же, как in vivo окружающие ткани сдавливают блуждающие клетки в покое; в результате морфология таких клеток весьма изменчива. Часть клеток эксплантата через некоторое время мигрирует из сгустка на прилежащую стеклянную поверхность сосуда. Наблюдать за такими клетками значительно легче, так как они свободны от фибрина и лежат в одной плоскости. Кроме того, в таком положении их форма не зависит от воздействия нитей фибрина. Однако миграция клеток требует времени, что служит лимитирующим фактором при работе с макрофагами млекопитающих, которые, не размножаясь, имеют ограниченную продолжительность жизни в культуре. Эта трудность преодолевается применением метода однослойных культур, основанного на приготовлении суспензии такой низкой концентрации, что на дне сосуда образуется один слой клеток. Этот метод дает возможность исследовать отдельные клетки и взаимоотношения между ними в нормальных и измененных экспериментальных условиях.
