Новые методы культуры животных тканей - Фридлянской И.И.
Скачать (прямая ссылка):
7. Chanock R. М., Roizman B., Myers R., Am. J. Hyg., 66, 281 (1967).
8. Smith M. G., Proc. Soc. exp. Biol. Med., 92, 424 (1956).
9. Bickerstaff E. R.f J. Path. Bact. 66, 39'1 (1953).
10. Mogabgab W. Green /. Dierkhising О. C., Phillips I. A., Proc.
S-oc. exp. Biol. Med., 89, 654 (1955).
11. Mogabgab W. J., Simpson G. /., Green I. J., J. Immun., 76, 314 (19o6).
12. Shelekov A., Vogel J. E., Chi L., Proc. Soc. exp. Biol. Med., 97, 802
(1958).
13. Parkman P. D.t Buescher E. L., Artenstein M. S., Proc. Soc. exp. Biol. Med., Ill, 225 (1962).
14. Hoorn B., Tyrrell D. A. Arch. Virusforsch., 18, 210, (1966).
15. Morgan J. F., Morton H. J., Parker R. C., Proc. Soc. exp. Biol. Med., 73, 1 (1950).
16. Eagle H., Science, N. Y., 130, 432 (1959).
17. Smith С. E. G., Simpson D. I. HBowen E. T. W.t Zlotnik I., Lancet, ii, 1119 (1967).
18. Gey G. О., Coffman W. O., Kubicek М. Т., Cancer Res., 12, 264 (1952)
19. Fjelde A., Cancer, N. Y., 8, 845 (1955).
20. Eagle H., Proc. Soc. exp, Biol. Med., 89, 362 (1965).
'21. Sever J. L. et al., Science, N. Y., 148, 385 (1965).
22. Stewart G. LParkman P. D., Hopps H. EDouglas R. ОHamilton J. P., Meyer H. M., New Engl. J. Med., 276, 554 (1967).
23. McCarthy К et al., Lancet, ii, 593 (1963).
Основные руководства
Horsfall F. LTamm /. (Eds.), Viral and Rickettsial Infections of Man, 4th edn, Pitman Medical, London, 1966.
Andrewes С. E., Periera H. G., Viruses of Vertebrates. 2nd edn. Balliere. Tindall and Cassell, London, 1967.
Hoskins J. MVirological Procedures, Butterworths, London, 1967. Paul JCell and Tissue Culture, 4th edn. Livingstone, Edinburgh, 1970.
Глава 5
КУЛЬТИВИРОВАНИЕ МАКРОФАГОВ МЛЕКОПИТАЮЩИХ
Дж. УОСЛИ и Р. ДЖОН St. Thomas’s Hospital Medical School, London
ВВЕДЕНИЕ
В этой главе очень подробно описано несколько испытанных методов культивирования макрофагов млекопитающих, так что она может послужить методической основой для тех, кто захочет заняться исследованием этих клеток в культуре. Важно уяснить с самого начала, что в данном случае культивирование означает лишь поддержание жизнеспособности, поскольку известно, что нормальные дифференцированные макрофаги млекопитающих, как правило, in vitro не размножаются.
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МАКРОФАГОВ
Прежде чем перейти к описанию методик, связанных с культивированием макрофагов млекопитающих, дадим краткую характеристику этих весьма своеобразных клеток, широко распространенных в животных тканях. Макрофаги обладают способностью к амебоидному движению; правда, эта их функция проявляется не всегда. Они способны заглатывать и переваривать с помощью внутриклеточных ферментов различные частицы и растворенные вещества — как эндогенные, так и чужеродные. Будучи производными мезенхимы, макрофаги относятся к лимфоидному ряду, и благодаря своей способности фагоцитировать частицы, которые иногда бывают антигенными, они наряду с лимфоцитами и плазматическими клетками играют важную роль в образовании антител.
Термин «макрофаг» был введен И. Мечниковым [1], который первым оценил значение фагоцитоза для защи-
ты многоклеточных животных от патогенных микроорганизмов. Он предложил данный термин, чтобы отличать эти клетки высших животных от способных к амебоидному движению фагоцитирующих полиморфноядерных лейкоцитов крови, которые он назвал микрофагами.
Клетки, напоминающие макрофаги высших животных, встречаются у разных представителей животного царства, даже у самых примитивных многоклеточных. У низших организмов, у которых нет циркуляторной системы или у которых в циркулирующей жидкости отсутствуют клетки типа микрофагов, макрофаги находятся в соединительной ткани. Они свободно «блуждают» по межклеточным пространствам, соприкасаясь с поврежденными компонентами собственных тканей, а также с чужеродными частицами, включая паразитирующие микроорганизмы. Осуществляя свою функцию, макрофаги достигают соответствующих объектов благодаря хемотаксису и очень часто, особенно при микробном заражении, проявляют способность к быстрому размножению.
Способные к амебоидному движению фагоциты закрепились в процессе эволюции и сохранили большинство своих древних функций. Однако в результате прогрессивного развития различных органов многие макрофаги оказались «встроенными» в структуру органов и (за исключением особых случаев) осуществляют свою функцию там, где они оказались; это так называемые фиксированные макрофаги кровеносных и лимфатических синусоидов.
МАКРОФАГИ СОЕДИНИТЕЛЬНОЙ ТКАНИ
У высших животных и у человека, так же как и у низших животных, макрофаги присутствуют в рыхлой соединительной ткани. Они рассеяны по этой ткани в значительном числе без какой-либо определенной закономерности. Их особенно много в адвентиции кровеносных сосудов, где находятся также различные клетки, являющиеся их предшественниками; они встречаются в субсерозной ткани —под брюшиной и плеврой.
В нормальных условиях макрофаги соединительной ткани не активны и известны как «блуждающие клетки в покое» или адвентициальные клетки. Форма таких покоящихся клеток зависит главным образом от давления со стороны окружающей ткани. В более плотных тканях они плоские, их цитоплазма образует несколько коротких и тупых, а иногда тонких, длинных и ветвистых отростков; в более рыхлой ткани они округлые с меньшим числом цитоплазматических отростков. При стимуляции, например на некоторых стадиях воспалительного процесса, макрофаги соответствующего участка втягивают цитоплазматические отростки, приобретают амебоидную подвижность, становятся активно фагоцитирующими и могут увеличиваться количественно, по крайней мере частично, за счет размножения и диф-ференцировюи соседних клеток-предшественников. В таком активном состоянии (в этот период их обычно относят к гистиоцитам [2]) их иногда накапливается очень много, и они тесно прилежат друг к другу, напоминая эпителий; в этом случае их называют эпителио-идными клетками. При определенных воспалительных реакциях, например при туберкулезе или при попадании в ткани крупных чужеродных частиц, несколько макрофагов могут сливаться друг с другом с образованием многоядерных или гигантских клеток. Ранвье [3] заметил, что от активных макрофагов иногда отшнуровыва-ются фрагменты цитоплазмы, и поэтому он назвал их клазматоцитами — термин, который сейчас почти не используется. Этот процесс, названный клазмацитозом, можно наблюдать в камере на ухе кролика, а также в культуре макрофагов, однако значение клазмацитоза до сих пор остается не ясным.
