Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Фридлянской И.И. -> "Новые методы культуры животных тканей" -> 18

Новые методы культуры животных тканей - Фридлянской И.И.

Фридлянской И.И., Олева Ю.В. Новые методы культуры животных тканей — М.: Мир, 1976. — 255 c.
Скачать (прямая ссылка): noviemetodikulturi1976.djvu
Предыдущая << 1 .. 12 13 14 15 16 17 < 18 > 19 20 21 22 23 24 .. 80 >> Следующая

величину, поскольку в материале глубинного фильтра имеются очень большие и очень маленькие проходы.
Тест на образование пузырьков легко выполним для любой системы фильтрования. Ниже мы опишем этот тест для системы, показанной на рис. 2.4:
1. Фильтр, держатель фильтра, бутыль, в которую фильтруют жидкость, входную и соединительные трубки автоклавируют в собранном виде.
2. Систему соединяют с сосудом высокого давления.
3. При низком давлении фильтруют в приемник небольшое количество жидкости. Это делается для того, чтобы смочить фильтр и погрузить выводную трубку держателя фильтра в жидкость. С помощью отводного клапана, который имеется на верхней стороне всех стандартных держателей фильтра, выпускаемых фирмой «Миллипор», выпускают весь воздух из держателя фильтра,
4. Выключают подачу жидкости и включают подачу регулируемого давления, которое должно быть равно давлению, при котором происходило фильтрование.
5. Постепенно увеличивают давление газа и наблюдают за появлением пузырьков у выводной трубки. Давление, при котором они появляются, и есть точка образования пузырьков. Величину этого давления записывают.
6. После завершения теста выключают подачу газа и продолжают фильтрование. Как только газ достигнет мембранного фильтра, фильтрование сразу же прекращают.
7. Процедуру определения точки образования пузырьков повторяют.
В системе, показанной на рис. 2.5, приемный сосуд не позволяет наблюдать за выводной трубкой при проведении теста на образование пузырьков. В таких случаях предлагается следующая процедура:
1. Приемный сосуд стерилизуют отдельно и затем, соблюдая правила асептики, соединяют с элементами системы, либо все стерилизуют в собранном виде.
2. Держатель фильтра соединяют с сосудом высокого давления. Фильтруют небольшое количество жидкости, чтобы смочить фильтр.
Таблица 2.4
Величина давления, вызывающая образование пузырьков для различных MF-фильтров «Мнллипор», смоченных водой
Тнп фильтра Размер пор, мкм Точка образопання
пуэырькои.
мм, рт. ст.
RA 1,2 622
АА 0,8 830
НА 0,45 1660
PH 0,30 2074
QS 0,22 2852
3. Закрывают зажим Р и открывают зажим N. Тест на образование пузырьков проводят в химическом стакане с 70%-ным этанолом.
4. После окончания теста зажин N закрывают, открывают зажим Р и продолжают фильтрование.
5. После окончания фильтрования в химическом стакане проводят еще один тест на образование пузырьков.
РАБОТА С ФИЛЬТРОВАЛЬНЫМ ЭЛЕМЕНТОМ
Процедура состоит из следующих операций: установки фильтра в держателе, автоклавировання, соединения с другими частями системы, проведения пробы на образование пузырьков, фильтрования, разборки, очистки и высушивания. Особое внимание следует уделять не только тем операциям, которые связаны с фильтрованием, но и операциям, предшествующим ей. Перед сборкой все компоненты держателя фильтра должны быть тщательно высушены: влажный фильтр при автоклавировании повреждается. Обычно мембранные фильтры помещают на нержавеющую металлическую сетку, полученную фототравлением, которую перед тем, как на нее кладут фильтр, высушивают струей чистого, не содержащего паров масла газа, подаваемого из сосуда высокого давления. Как правило, держатели мембранных фильтров
изготавливают из нержавеющей стали, которая, вопреки своему названию, в определенных условиях подвержена коррозии. Коррозия становится серьезной проблемой, когда держатель надолго оставляют грязным и мокрым, особенно если раствор содержит высокую концентрацию ионов хлора. Поверхность держателя, на которой обнаружена коррозия, обрабатывают химическим способом для удаления продуктов коррозии и восстановления поверхности. С этой целью ни в коем случае нельзя применять образивные материалы, потому что они только способствуют распространению процесса.
УСТАНОВКА ФИЛЬТРА В ДЕРЖАТЕЛЕ
Фильтр осторожно помещают на сетку держателя, подготовленного к работе. Если в системе используется также и предфильтр, то его помещают на мембранный фильтр, следя за тем, чтобы он полностью находился внутри зажимного круга. Кольцевые прокладки, которые применяются для таких держателей, обычно изготовлены из тефлона (PTFE) — вещества, не столь гибкого, как резина. Перед употреблением их необходимо тщательно проверить. В процессе очистки в кольца могут попасть мельчайшие острые кусочки, которые прорвут фильтр и его придется заменять новым. Если большая часть поверхности колец стала уплощенной, то обеспечить герметичность не удастся. Две половины держателя плотно стягиваются болтами или винтами. Для соединения держателя с другими частями системы, работающей под давлением, пригодны не всякие трубки. Трубки из медицинского латекса и черной резины использовать нельзя, поскольку в них содержатся вещества, которые могут экстрагироваться. Пригодны трубки из чистого каучука, некоторых полиэтиленов, PVC, так как эти материалы не оказывают повреждающего действия на фильтр. Приемлемы также трубки из резины, обработанной силиконом, и выстланные PTFE. Все новые трубки перед использованием нужно прокипятить в кастрюле с водой и один раз проавтоклавировать. Трубки, которые используют в системе, должны быть устойчивы к тем давлениям, которые необходимы для осуществления фильтрования.
Предыдущая << 1 .. 12 13 14 15 16 17 < 18 > 19 20 21 22 23 24 .. 80 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed