Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Фрайфелдер Д. -> "Физическая биохимия " -> 37

Физическая биохимия - Фрайфелдер Д.

Фрайфелдер Д. Физическая биохимия — М.: Мир, 1980. — 580 c.
Скачать (прямая ссылка): fizicheskayabiohimiya1980.djvu
Предыдущая << 1 .. 31 32 33 34 35 36 < 37 > 38 39 40 41 42 43 .. 218 >> Следующая

Тушение соответствует понижению эффективности переноса энергии от р-частиц на фотоумножитель (любым способом). Тушение приводит к уменьшению (возможно, до нуля) числа фототонов на р-частицу и вследствие этого к импульсу с пониженным напряжением. Различают тушение химическое, цветовое и за счет разбавления.
Химическое тушение
При введении образца в сцинтилляционный раствор следует иметь в виду, что образец сам может содержать вещества, способные либо поглощать часть энергии р-частиц без выделения фотона, либо поглощать фотоны, испускаемые возбужденными молекулами, без флуоресценции. Наиболее распространенными агентами, вызывающими химическое тушение, являются вода, кислоты, соли и растворенный кислород.
Цветовое тушение
Окрашенные образцы могут поглощать часть фотонов, испускаемых вторичным флуоресцентом. Существенно то, что отсутствие видимой окраски образца еще не является критерием отсутствия цветового тушения, поскольку глаз человека не в состоянии определить, может ли данное вещество поглощать в ближней ультрафиолетовой области. При этом в силе остается вероятность некоторого цветового тушения при наличии желтой, красной или коричневой окраски образца.
Тушение за счет разбавления
Разбавление растворителя и флуоресцента образцом уменьшает вероятность сцинтилляции. Если образец представляет собой жидкость, этого избежать нельзя, однако при анализе может быть введена поправка. Этот прием будет описан ниже.
Пропорциональный счет и анализ амплитуды импульсов
Самым большим преимуществом сцинтилляционных счетчиков является возможность определить соотношение двух радиоизотопов, находящихся в смеси. Это следует из того, что импульс напряжения, получаемый в результате распада, пропорционален энергии излучаемых частиц. Различить два радиоизотопа можно с применением анализатора амплитуды импульсов, оснащенного дискриминаторами. Анализатор амплитуды импульсов представляет собой электронное устройство, способное различать флуктуации (импульсы) тока или напряжения. При регистрации импульса измеряется и его амплитуда. Такой прибор включается в цепь, рассчитанную на счет импульсов в различных интервалах напряжения. Например, она может быть настроена таким образом, что будут фиксироваться импульсы от нуля или от какой-то другой величины, но меньше некоторого значения, или между какими-либо двумя значениями. Устройство, позволяющее определять уровни напряжения, между которыми должно осуществляться измерение, называется дискриминатором. Обычно для определения интервала напряжения используют два дискриминатора, что исключает шум от фотоумножителя с низкой энергией и внешний шум с высокой энергией. Применение более двух дискриминаторов позволяет одновременно считать в двух интервалах. Счет в двух диапазонах одновременно требует двух цепей счета. Каждая такая цепь осуществляет счет в канале, определяемом конкретными значениями напряжения, часто обозначаемыми LI, L2, L3 и т. д. Можно построить график зависимости скорости распада от энергии или амплитуды импульса с помощью подсчета импульсов в различных диапазонах напряжения. На
РИС. 5-5.
Одновременный счет 3Н и 14С.
Спектры 3Н и 14С изображены в единой шкале: L1 служит самым низким пределом для большинства счетчиков, ниже которого становится заметным тепловой шум; L2 и L3— уровни напряжения, использованные в примере 5-А. Ось у имеет произвольную шкалу, дающую скорость счета в небольшом интервале, находящемся в пределах определенного напряжения.
рис. 5-5 показана такая зависимость для 3Н и 14С. Поскольку таким образом можно определить скорость распада в данном интервале амплитуд импульсов, становится доступным и установление соотношения двух изотопов. Принцип такого определения иллюстрирует следующий пример.
Пример 5-А. Соотношение радиоактивностей 3Н и 14С в одном образце. Рассмотрим радиоактивный образец, содержащий метки 3Н и 14С, счет которых ведется в двух диапазонах напряжения, определяемых LI, L2 и L3, как показано на рис. 5-5. Полученные при этом данные представлены в табл. 5-3. При счете стандартных образцов, содержащих 3Н и 14С, с использованием того же счетчика рассчитываются количества 3Н и 14С в каждом канале (табл. 5-3).
ТАБЛИЦА 5-3
Вычисление соотношения 3Н/*4С в образце, содержащем двойную метку, в двух каналах сцинтилляционного счетчика
Образец Ll---L2 L2-L3 Б/А А/Б
(канал А)» (канал Б),
имп/мин имп/мин
Экспе р и ме нта л ьны й 500 800
8Н-Стандарт 16 840 25 0,0015 ---
^-Стандарт 4 250 10 200 --- 0,416
Расчеши для образца
1. 3Н (имп/мин) в канале Б = 0,0015-500 = 0,75.
2. 14С (имп/мин) в канале Б = 800—0,75 ^800.
3. 14С (имп/мин) в канале А — 0,416-800 = 333.
4. 3Н (имп/мин) в канале А = 500—333 = 167.
5. Всего 3Н (имп/мин) = 167.
6. Всего иС (имп/мин) =333-1-800 = 1133.
7. зн/14С = 167/1133 = 0,147.
Распределение радиоактивности стандартных 3Н- и ^-образцов в каналах А и Б позволяет определить, как распределены радиоактивности 3Н и 14С в экспериментальном образце. Строка 1 показывает, что только 0,0015 всей радиоактивности 3Н попадает в канал Б, т. е. радиоактивность 3Н в этом канале практически равна нулю. Следовательно, вся радиоактивность в канале Б отвечает 14С, что видно из строки 2. Данные по стандартному образцу 14С свидетельствуют о том, что радиоактивность в канале А составляет 0,416 от радиоактивности этого стандарта в канале Б. Поскольку строка 2 указывает, что канал Б содержит радиоактивность только 14С, можно провести расчет в строке 3. Отсюда следует, что из 500 имп/мин в канале А 333 при-
Предыдущая << 1 .. 31 32 33 34 35 36 < 37 > 38 39 40 41 42 43 .. 218 >> Следующая
Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed