Физическая биохимия - Фрайфелдер Д.
Скачать (прямая ссылка):
ЧАСТЬ II. Общие лабораторные методы 88
ГЛАВА 4. '/ Измерение pH 88
Осложнения при измерении pH 91
Зависимость pH от концентрации ионов 91 Загрязнение и нарушение показаний электродов 92 Натриевая ошибка 92 Проблема трис-буфера 93 Типы электродов 93 Использование индикаторной бумаги 94 Избранная литература 94
ГЛАВА 5. Введение радиоактивных меток
и измерение радиоактивности 95
Типы ядерных распадов, используемые в биохимии 95 Бета-распад 96
Распад с испусканием у*лучей 97 Свойства радиоактивного распада химических соединений 97 Измерение p-радиоактивности методами, основанными на ионизации газов 100 Измерение радиоактивности жидкостными сцинтилляционны-ми счетчиками 103
Процесс сцинтилляции 105 Фоновый шум 106 Тушение 108
Пропорциональный счет и анализ амплитуды импульсов 109 Приготовление образцов 112
Выбор растворителя, смешиваемого с водой 114 Растворение образца 115 Сорбция на мембранных фильтрах 115 Определение эффективности счета с помощью анализа амплитуды импульсов 116 Регистрация у-лучей 120
Примеры использования радиоактивных препаратов 122 Список литературы 128 Задачи 128
ГЛАВА 6.
ГЛАВА 7.
ГЛАВА 8.
Авторадиография 130
Ядерные эмульсии, используемые в биологических исследованиях 130
Изотопы, обычно используемые в биологических и биохимических исследованиях 133 Длина трека различных излучаемых частиц 133 а-Частицы 134 Р-Частицы 135
Взаимное расположение источника излучения и эмульсии 137 Факторы, влияющие на выбор изотопа и соотношение эмиттер-эмульсия 138 Разрешение 138 Эффективность 139 Фон 140
Методики осуществления контакта между эмульсией и образцом 141
Метод временного контакта 141 Метод постоянного контакта 142 Молекулярная авторадиография 148 Авторадиография и электронная микроскопия 151 Список литературы 152 Задачи 152
Мембранная фильтрация и диализ 154
Фильтры из нитроцеллюлозы и мембранная фильтрация 155 Фильтры из стекловолокна 158
Фильтрация с использованием фильтров из нитроцеллюлозы и стекловолокна 158
Осветление растворов 158
Отделение осадков для измерения радиоактивности 159 Замена среды для растущих бактерий 159 Нитроцеллюлозные фильтры и анализ связывания 160 Различные приложения мембранных фильтров 164 Диализ и молекулярная фильтрация 165 Диализ через полые стеклянные волокна 169 Список литературы 170 Задачи 171
ЧАСТЬ III. Разделение и идентификация веществ 172
Хроматография 172
Распределительная хроматография 173
Теоретические основы распределительной хроматографии 173
Примеры распределительной хроматографии 175 Адсорбционная хроматография 176
Теоретические основы адсорбционной хроматографии 17G Виды адсорбционной хроматографии 177 Работа колонки 178 Хроматография на бумаге 181
Экспериментальная методика хроматографии на бумаге 182
Обнаружение и идентификация пятен 184 Пептидные карты: специальное использование бумажной хроматографии при изучении белков 184 Тонкослойная хроматография 187 Газожидкостная хроматография 190 Обнаружение веществ в элюате 191 Идентификация компонентов по сигналам детектора 193 Достоинства газожидкостной хроматографии 195 Применение газожидкостной хроматографии 195 Гель-проникающая хроматография 196
Теоретические основы гель-проникающей хроматографии 196
Материалы для гель-проникающей хроматографии 197 Достоинства гель-проникающей хроматографии 200 Приложения гель-проникающей хроматографии 202 Тонкослойная гель-проникающая хроматография 205 Приложения тонкослойной гель-проникающей хроматографии 206 Ионообменная хроматография 207 Свойства ионообменников 207 Выбор ионообмеиника 209 Выбор пористости и ситового размера 210 Выбор pH, буферов и ионных условий 211 Методика ионообменной хроматографии 211 Приложения ионообменной хроматографии 213 Специальные методики в хроматографии нуклеиновых кислот и белков, связывающихся с нуклеиновыми кислотами 214 Хроматография на ДНК-целлюлозе 214 Колонки с метилированным альбумином на кизельгуре-(МАК) 215 Колонки с гистонами на кизельгуре 216 Хроматография на гидроксиапатите 216 Аффинная хроматография 217 Приложение 219
Очистка фермента: пример использования многих хроматографических методик 219 Список литературы 220 Задачи 221
ГЛАВА 9.
ГЛАВА 10.
ГЛАВА 11.
Электрофорез 223
Теория электрофореза 223 Виды электрофореза 224
Зональный электрофорез 225 Непрерывный (поточный) элщшюфорез 238 Изоэлектрическая фокусировка (239)
Препаративный электрофорез в больших масштабах 243 Блок-электрофорез 243
Электрофорез на колонках с полиакриламидом 243 Иммуноэлектрофорез 243 Список литературы 245 Задачи 246
Иммунологические методы 247
Иммунологическая система 247 Получение антител 2-18 Реакция антигена с антителом 249
Иммунные реакции, используемые в биологическом анализе 250
Реакция преципитации 250
Гель-диффузионные реакции преципитации и иммунодиффузия 251 Фиксация комплемента 253 Торможение фиксации комплемента и пассивная агглютинация 256
