Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Финдлея Дж.Б. -> "Биологические мембраны" -> 32

Биологические мембраны - Финдлея Дж.Б.

Финдлея Дж.Б., Эванза У.Г. Биологические мембраны — М.: Мир, 1990. — 424 c.
ISBN 5-03-001317-2
Скачать (прямая ссылка): biologicheskiemembrani1990.djvu
Предыдущая << 1 .. 26 27 28 29 30 31 < 32 > 33 34 35 36 37 38 .. 191 >> Следующая

цитохимии: было показано, что этот фермент ассоциирован с морфологически
выявляемыми лизосомами. В случае аппарата Гольджи применялась обратная
стратегия. Исходно его фрагменты были идентифицированы по их характерной
морфологии (стопки цистерн - диктиосомы) [24, 25], и лишь затем была
установлена корреляция в локализации специфических гликозилтрансфераз
[26-29]. В табл. 2.2 перечислены некоторые критерии для идентификации
клеточных компонентов.
Параметром, особенно важным для идентификации поверхностных мембран
(плазматическая мембрана и тонопласт), является толщина мембраны,
измеренная с помощью электронной микроскопии (табл. 2.3, рис. 2.5).
Тонопласт, плазматическая мембрана, а также некоторые мембраны зрелого
аппарата Гольджи имеют большую толщину (7-10 нм). По способности
связывать фосфовольфрамовую кислоту (ФВК) при низких pH такие мембраны
можно разделить на два класса: это связывающие ее плазматические мембраны
и несвязывающие мембраны тонопласта. Все остальные мембраны тонкие (5-6
нм) и не связывают ФВК при низких pH. Таким образом, электронная
микроскопия негативно контрастированных препаратов при увеличении до 1
ООО ООО позволяет идентифицировать упомянутые классы мембран.
О наличии соответствующего биохимического маркера судят по одному из двух
критериев (или по обоим вместе). Во-первых, чистая фракция исследуемого
клеточного компонента должна иметь наибольшую удельную активность. Если
используется абсолютный маркер (см. ниже), то анализ выхода активности и
ее распределение по фракциям должны указывать на то, что вся маркерная
активность или большая ее часть ассоциирована с исследуемой фракцией. Во-
вторых, в последовательности фракций с увеличивающимся содержанием
маркера и данного клеточного компонента должна наблюдаться корреляция
между этими двумя величинами (рис. 2.6).
Химические компоненты, обнаруживающие корреляцию с количеством какого-то
определенного клеточного компонента, называют маркерами. Это могут быть
абсолютные маркеры (они присутствуют только в конкретных клеточных
компонентах; например компоненты электронтранспортной цепи митохондрий и
хлоропластов или хлорофилл, присущий только хлоропластам)
Мембранные фракции растительных клеток
75
Таблица 2.2. Клеточные компоненты растений и характеристики, позволяющие
идентифицировать их одновременно в изолированном состоянии и in situ
Клеточный компонент
Характеристика мембраны
Биохимическая характеристика
Ссылка
Плазматическая
мембрана
Тонопласт
Митохондрии
Хлоропласты
Амнлопласты
Аппарат Гольджи
Эндоплазматиче-ский ретикулум
Пероксисомы
Ядра
Окаймленные везикулы
Мембраны большой толщины (- 10 нм); связывают ФВК при низких pH Мембраны
большой толщины (-7-
9 им); не связывают ФВК при низких pH Тонкие (~6 нм) мембраны. Кристы с
электронтраиспорт-ной активностью
Тонкие (-6 нм) мембраны. Тилакоиды Тонкие (~6 нм) мембраны.
Взаимодействуют с КМп()4
И толстые, и тонкие мембраны; цистерны организованы в стопки
Тонкие мембраны (6 нм) с присоединенными рибосомами
Одинарная ограничивающая мембрана. Электроноплотное содержимое
Тонкие (6 нм) мембраны; две мембраны соединены порами. с внутренне5
ассоциирован хроматин
Клатрииовын покров
Связывание N-1-наф-тилфталамовой кислоты
АТРазная активность, стимулируемая анионами и ингибируемая нитратами
Сукцинатдегидроге-назная, цитохромок-сидазная и другие виды активности,
характерные для митохондрий Содержат хлорофилл
Моногалактозилди-глицеролсинтазная активность. Содержат кароти-ноиды.
Содержат дигалак-тозил- и моногалак-тозилдиглицеролы Активность латентной
ШРазы как в выде ленном препарате, так и определяемая in situ цитохимиче
ски
Активность NADPH цнтохром с - редук-тазы (NADH-цито-хром с - редукта-зы)
Активность каталазы и различных фср ментов, катализирующих образование
Н2О2 Содержится ДНК
Обнаруживается кла-трин при электрофорезе в ПААГ с ДСН (180-190 кДа)
[30]
[311
[21, 22,
32, 33]
[34, 35]
[36, 34]
[37]
[38]
[5, 24,
26, 39]
[35]
[401
[41]
[42, 43, 44, 208]
76
Глава 2
Таблица 2.3. Характерная толщина мембран, позволяющая идентифицировать их
в выделенных фракциях
Клеточный компонент Толщина мембраны, нм±стандартное отклонение

гипокотили сои [21] листья шпината [22] стебли лука*)
Pythium aphanider-maturn [33]
in situ выделенные
Плазматическая мем- 10,1±0,7 10,5±0,3 9,3 9,2±0,4 9,6±0,45
брана
Мембрана тонопласта 7,2±0,8 8,1 ±0,9 8,0 9,3±0,5 9,7±0,45
Эндоплазматический 5,7±0,7 6,3±0,8 5,3 6,0±0,1 6,0±0,1
ретнкулум
Ядерная оболочка
наружная мембрана 5.8+0.8 6,8±0,6
внутренняя мембрана 6,5±0,6 5,8±0,7
среднее для обеих 5,6 6, l±0,5 6,1+0,45
мембран
Митохондрии
наружная мембрана 5,0±0,6 6,4±0,8 5,5 6,0±0,2 6,4±0,3
внутренняя мембрана 6,2±0,7 6,0±0,9 6,0 6,2±0,2 6,2±0,4
Этиопласт
наружная мембрана 5,0±0,6
оболочки
внутренняя мембрана 6,1±0,8
оболочки
тнлакоид 8,0±1,0
Хлоропласт
наружная мембрана 5,1±0,8
Предыдущая << 1 .. 26 27 28 29 30 31 < 32 > 33 34 35 36 37 38 .. 191 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed