Биологические мембраны - Финдлея Дж.Б.
ISBN 5-03-001317-2
Скачать (прямая ссылка):
Гольджи.
4. Везикулы, выделенные быстро и в изоосмотических условиях (в градиенте
перколла), можно использовать для последующих исследований транспорта
ионов и молекул через плазматические мембраны. Эти исследования
значительно облегчаются тем, что из плазматической мембраны образуются
везикулы преимущественно правильной ориентации, что обусловлено ее в
высшей степени асимметричной организацией.
5. При выделении плазматических мембран из тканей, для которых характерны
функциональное и ферментативное разнообразие (например, базолатеральные и
апикальные участки эпителиальных клеток [4, 5]), крайне желательно
установить доменное происхождение выделенных фракций (табл. 1.13).
6. Помимо регистрации активности ферментов-маркеров (Приложение II) для
контроля за выделением плазматических мембран из клеток весьма полезно
использовать радиоактивные метки, ковалентно пришитые к целым клеткам.
Такими метками служат реагенты, которые связываются с поверхностными
клеточными белками [155, 156] или углеводами [157]. Чтобы контролировать
процесс и ограничить проникновение свободной и модифицированной метки
внутрь клеток, обработку проводят при 4°С, поскольку это уменьшает
вероятность эндоцитоза компонентов плазматической мембраны. Ковалентное
мечение мембранных белков и гликопротеинов описано в гл. 6.
5.8.1. Контакты ппазматической мембраны
Для выделения комплексов межклеточных контактов из различных тканей
вначале получают фракцию плазматической мембраны, содержащую мембранные
фрагменты латеральных доменов, а затем обрабатывают ее детергентами,
чтобы избира-
Органеллы и мембраны животной клетки
53
Таблица 1.13. Работы, в которых описаны методики выделения субклеточных
органелл и мембран
Источник (орган, вид и т. д.)
Ссылка
А. Плазматические мембраны
Адипозная ткань Жировые подушки, бурый жир [71, 160]
Хромаффинная ткань Бык [161]
Мозг Аксолемма (крыса) Кора головного мозга (крыса) Хвостатое ядро (бык)
[162] [163] [164]
Колоноциты Крыса [172]
Желтое тело Бык, крыса [165 166]
Яйцеклетки Морской еж [1671
Эмбриональные ткани Мезенхима (мышь) [168]
Эпидермис Мальпигиевы клетки (свинья) [169]
Эпитетиальные клетки LLC-PK-клетки почек (свинья) [1701
Эритроциты Человек [171]
Клетки экзорбптальной железы Базолат. область, щеточная каемка (крыса)
[46]
Фибробласты (Мышь); легкие (хомячок) [173, 174]
Клетки миокарда HeLa Крыса, псовые [175, 176] [177]
Кишечник Щеточная каемка (крыса) [178, 180]
базолатеральная область [179, 121]
Почка Щеточная каемка (мышь) [181]
базолатеральная область (крыса) [182, 197]
Хрусталик Клетки Леттре Различные виды [183] [184]
Печень Синусоиды (крыса) [185]
Клетки канальцев, базола- [32, 33, 94,
теральная область 185, 186]
Легкое Крыса [187, 188]
Лимфоциты (Мышь); тимус (теленок) [189, 190]
Тучные клетки Крыса [31]
Нейробластома Мышь [191]
Нейтрофилы Человек, псовые, свинья [192-194]
Околоушная железа Крыса [195, 196]
Плацента Тромбоциты Синцитиотрофобласт (человек) [198, [200] [201 99]
Скелетные мышцы Кролик [202
Гладкие мышцы Разные источники [203
Желудок Свинья [204
Сперма Мышь [205
Опухолевые клетки HSV, хомячок, асцитные опухоли [206, 207]
54
Глава 1
Продолжение
Источник (орган, вид и т. д.) Ссылка
Б. Межклеточные соедине-
ния
Дес.моеомы Слизистая носа (корова) [157, 158, 208]
Щелевые контакты Печень, сердце, матка (кры- [29, 159, 209]
са)
Плотные контакты Печень (мышь) [210]
Постсннаптические уплотне- Собака, мышь, другие виды [96, 211, 212]
ния
Триадная структура скелет- Кролик [213]
ных мышц
В. Лизоеомы и аутофагиче-
ские вакуоли
Фибробласты Человек [109]
Щитовидная железа Свинья [214]
Печень Крыса [75, 108]
Печень Аутофагические вакуоли [131, 132,*215]
(крыса)
Почка Крыса [51]
Легкое Кролик [226]
Г. Пероксисомы
Печень Мышь, различные виды, [44, 136, 139]
карп
Сердце Крыса [136]
Д. Митохондрии
Печень Крыса [127, 216]
Сердце Корова [217]
Мнометрий Человек [218]
Е. Ядерные мембраны
Печень Крыса [122, 123]
Ж- Аппарат Гольджи
Печень Крыса [55, 111. 140, 141]
Мозг Крыса 1227] [219]
Лейкозные клетки
3. Вакуоли, гранулы, тельца
и т. д.
Клетки островков поджелу - Секреторные зимогеновые [220]
дочной железы гранулы (крыса)
Околоушная железа Крыса [221]*
Хромаффиниая ткань Секреторные гранулы [47. 222]
Гипофиз Секреторные везикулы [76]
Vas deferens Норадреналиновые гранулы [224]
Конусы роста аксонов Передний мозг (крыса) [225]
Ламеллярные тельца Легкое кролика [226]
Дальнейшие подробности и ссылки приведены в табл. 1.4 и разд. 5.
Органеллы и мембраны животной клетки
55
тельно солюбилизировать не содержащие контактов мембраны. При этом
мембраны, содержащие контакты, остаются в осадке. Существуют и
альтернативные методы без применения детергентов. Например, десмосомы
выделяют из нозального эпидермиса коровы путем экстракции цитратным
буфером при pH 2,6 [158], а щелевые контакты получают из плазматических
