Биологические мембраны - Финдлея Дж.Б.
ISBN 5-03-001317-2
Скачать (прямая ссылка):
гексагональной фазы [128], а эти переходы несложно регистрировать методом
ЯМР (разд. 3.2.1).
Биофизические подходы
385
5.3.5. Асимметрия липидов
Индуцируемое или стабилизируемое белками асимметричное распределение
липидов между двумя монослоями в биологической или реконструированной
мембране, как и соответствующую асимметрию в искусственных липидных
везикулах, изучают в основном биохимическими методами [129]. Из
физических методов применяют 31Р- и 13С-ЯМР, описанные в разд. 4.5.2 и
работах [97, 98], но только к реконструированным системам (ие к целым
клеткам). Изучать трансбислойное распределение стероидов можно методом
тушения флуоресценции соответствующих производных [100, 130] либо
спектрофотометрически по кинетике связывания полиенового антибиотика
филипина с мембранными стероидами [131]. Впрочем, в последнем случае
могут возникать определенные трудности при интерпретации результатов
[100], и при регистрации асимметрии распределения липидов полученные
этими методами данные необходимо дополнить другими измерениями (включая
биохимические) (см. работы [132, 133]).
6. Перспективы
Вероятно, в ближайшем будущем для исследования биологических мембран
будет использоваться гораздо больше физических методов, причем более
чувствительных. Возможно, определенных успехов удастся достичь в
получении количественных оценок (это касается, например, ЭПР с переносом
насыщения), что существенно повысит ценность методов. Но основной
прогресс должен быть достигнут в области препаративной биохимии, например
в получении трехмерных кристаллов мембранных белков, пригодных для
рентгеноструктурного анализа, специфически дейтерированных белков и
липидов для исследования их методом рассеяния нейтронов и ЯМР, а также
более гомогенных в структурном отношении реконструированных систем
мембранного транспорта. Все это, вероятно, еще более повысило бы
информативность биофизических подходов и их ценность для дальнейшего
исследования биомембран.
7. Благодарности
Я иекренне благодарен д-рам J. В. С. Findlay, Н. Passow,
Н. Ruf, P. Wood за многочисленные плодотворные обсуждения этой главы,
а также моей жене за помощь в подготовке рукописи.
386
Глава 8
Литература
1. Tanford С., Reynolds J. А. (1976). Biochim. Biophys. Acta, 457, 133.
2. Homes B. D. (1981). In: Gel Electrophoresis of Proteins - A Practical
Approach. Hames B. D. (ed.), IRL Press, Oxford and Washington, p. 1.
3. Peters K., Richards F. M. (1977). Annu. Rev. Biochem., 46, 523.
4. Dorst H.-J., Schubert D. (1979). Hoppe-Seyler's Z. Physiol. Chem.,
360, 1605.
5. Ji Т. II., Middaugh C. R. (1980). Biochim. Biophys. Acta, 603, 371.
6. Eason R. (1984). In: Centrifugation - A Practical Approach. Rickwood
D. (ed.), IRL Press, Oxford and Washington, p. 251.
7. Fujita II. (1975). Foundations of Ultracentrifugal Analysis. Wiley,
New York.
8. Schubert D" Boss K-, Dorst H.-J., Flossdor} J., Pappert G. (1983).
FEBS Lett., 163, 81.
9. Cantor C. R., Schimmel P. R. (1980). Biophysical Chemistry. Part II,
Freeman and Company, San Francisco.
10. Kuhn II., Bennett N.. Michel-Villaz М., Chabre M. (1981). Proc. Natl.
Acad. Sci. USA, 78, 6873.
11. Kempner E. S., Schlegel W. (1979). Anal. Biochem., 92, 2.
12. Verkman A. S., Skorecki K., Ausiello D. A. (1984). Proc. Natl. Acad.
Sci. USA, 81, 150.
13. Pilz I. (1973). In: Physical Principles and Techniques of Protein
Chemistry. Part C, Leach S. J. (ed.). Academic Press, New York and
London, p. 141.
14. Franks N. P., Levine Y. K. (1981). In: Membrane Spectroscopy. Grell
E. (ed.), Springer-Verlag, Berlin, Heidelberg and New York, p. 437.
15. Blasie I. K, Herbette L., Pachence J. (1985). J. Membr. Biol., 86, 1.
16. Blasie J. K, Herbette L., Pascolini D" Skita V., Pierce D. H., Scarpa
A. (1985). Biophys. J., 48, 9.
17. Slayter E. M. (1969). In: Physical Principles and Techniques of
Protein Chemistry. Part A, Leach S. J. (ed.), Academic Press, New York
and London, p. 1.
18. Branton D., Cohen С. М., Tyler J. (1981). Cell, 24, 24.
19. Tanford C. (1961). Physical Chemistry of Macromolecules. Wiley, New
York.
20. Makowski L" Li J. (1984). In: Biomembrane Structure and Function.
Chapman D. (ed.), Verlag Chemie, Weinheim, p. 43.
21. Michel H. (1983). Trends Biochem. Sci., 8, 56.
22. Garavito R. М., Jenkins J" Jansonius J. N.. Karlsson R., Rosenbusch
J. P.
(1983). J. Mol. Biol., 164, 313.
23. Deisenhofer J., Epp O., Miki K., Huber R., Michel H. (1985). Nature,
318, 618.
24. Kossiakoff A. A. (1985). Annu. Rev. Biochem., 54, 1195.
25. Engel A., Massalski A., Schindler H., Dorset D. L" Rosenbusch J. P.
(1985). Nature, 317, 643.
26. Glaeser R. M. (1982). In: Methods of Experimental Physics, Vol. 20
(Biophysics). Ehrenstein G., Lecar H. (eds.), Academic Press, New York
and London, p. 391.
27. Henderson R., Unwin P. N. T. (1975). Nature, 257, 28.
28. Sears D. W" Beychok S. (1973). In: Physical Principles and Techniques
of Protein Chemistry. Part C, Leach S. J. (ed.), Academic Press, New York
