Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Филдс Б.Н. -> "Вирусология: В 3-х т. Том 1 " -> 79

Вирусология: В 3-х т. Том 1 - Филдс Б.Н.

Филдс Б.Н., Найп Д.М., Мэрфи Ф.А., Харрисон С. Вирусология: В 3-х т. Том 1 — М.: Мир, 1989. — 492 c.
ISBN 5-03-000283-9
Скачать (прямая ссылка): virusologiyat11989.djvu
Предыдущая << 1 .. 73 74 75 76 77 78 < 79 > 80 81 82 83 84 85 .. 224 >> Следующая

При отборе вирусных мутантов комплементация часто бывает первым генетическим тестом, который выполняется для этих мутантов. Комплементационный тест достаточно прост и позволяет быстро разделить мутанты на группы по функциям, которые можно далее исследовать другими способами. На комплементацию были проверены практически все коллекции вирусных мутантов, однако особенно полезен этот тест для тех виру-
сов, для которых невозможен рекомбинационный анализ в силу отсутствия у -них рекомбинаций, например тогавирусов [103], рабдовирусов [104, 105] и парам,иксовирусов [9]. В табл. 7.1 содержатся данные, полученные в стандартных тестах на комплемеи-
Таблица 7.1. Комплементация между /s-мутантами вируса Синдбис [103]
Групп® Уровень комплементации,11при смешанном заражении
ununneuPU. ' __
тации Мутант ts2i ts19 ts17 tS4 ts24 ts11 !s6 ts2 ts5 tsW !s23 ts20
А ts21 --- 0,2 0,1 0,1 1,5 17,6 200 43 27 24 2) и.о.
rt.0.
А ts19 --- 0,4 0,5 3,2 120 485 И.О. 16 19 43 12
А ts17 _ H.O. 4,5 30 393 25 31 17 19 23
А tS4 --- 0,4 9 127 19 H.O. 27 но. 8
А ts24 _ 4,2 364 22 29 18 16 5
А' ts11 --- 280 1,8 50 43 H.O. 12
В ts6 --- 62 93 64 68 21
С ts2 --- И 36 27 5,2
С ts5 --- 345 61 8
D ts10 --- V 16,7
D ts 23 8,5
Е ts20 ---
*) Уровень комплементации представляет собой отношение тнтра вируса, полученного при •смешанном заражении двумя fs-мутантами прн непермиссивной температуре, к сумме титров, полученных при раздельном заражении.
*) н. о. — не определяли.
тацию у вируса Синдбис [103]. На основе этих данных, которые также иллюстрируют некоторые осложнения, часто встречающиеся при комплементационном анализе, использованные мутанты разделены на шесть групп комплементации. Например, мутант tsll попадает в комплементационную группу, обозначенную к'. Это овязано с получаемыми для него вариациями в результатах. Вначале он был помещен в самостоятельную группу, затем включен в группу А и затем снова помещен отдельно. Поэтому статус мутанта tsll и комплементационной группы А' следует рассматривать как неустоявшиеся. Мутант ts6 из группы В комплементирует со всеми остальными мутантами намного сильнее, чем это наблюдается для других пар. Среди мутантов группы А степень комплементации сильно варьирует. Эти два последних факта показывают, что существует проблема определения уровня, с которого комплементация может считаться значимой, и различения этого уровня от отсутствия комплементации.
Комплементация наблюдается в ряде природных ситуаций в системах с вирусами животных. При пассировании ряда вирусов при высокой множественности заражения спонтанно возникают делеционные мутанты [160]. Такие мутанты характерны для препаратов вирусов, которые интерферируют с диким типом и другими мутантами [65]. Делеционные мутанты не способны расти самостоятельно, но поддерживаются в популяции благодаря комплементации, которую обеспечивает небольшое 'количество виру-
са с полноценным геномом, присутствующее в популяции (вирус-помощник). Комплементация была обнаружена также у РНК-со-держащих трансформирующих опухолеродных вирусов, большая часть которых дефектна по репликации из-за делеции генов, кодирующих репликативные функции [87]. Препараты этих вирусов наряду с дефектными по репликации трансформирующими вирусами содержат родственный вирус, способный к репликации, но дефектный по трансформации. Этот второй вирус спасае.т дефектный по репликации вирус путём комплементации, поддерживая его существование в популяции ©ируса. В некоторых случаях к комплементации способны и неродственные вирусы. Например, некоторые аденовирусы человека не могут закончить цикл своей репликации в клетках почек обезьян. Однако в клетках, зараженных SV40 и аденовирусом, синтезируются как SV40, так и аденовирус [98]. Это указывает на то, что два неродственные вируса могут комплементировать, исправляя свои дефекты, связанные с ограничением спектра хозяев.
Рекомбинация
Рекомбинация — это физическое взаимодействие между вирусными геномами в смешанно-зараженной клетке. В результате рекомбинации возникают дочерние геномы, которые содержат генетическую информацию в сочетании, отсутствующем у родителей. У вирусов животных это взаимодействие может происходить двумя различными способами в зависимости от физической организации вирусного генома. У вирусов, имеющих одну геномную молекулу, включая все ДНК-содержащие вирусы и часть РНК-содержащих вирусов, рекомбинация включает разрыв и воссоединение ковалентной связи в нуклеиновой кислоте с образованием дочерних геномов неродительского типа (внутримолекулярная рекомбинация). У вирусов с сегментированным геномом, включая вирусы гриппа, реовирусы, буньявирусы и арена-вирусы, в ходе рекомбинационного процесса ковалентные связи не.разрываются. Вместо этого сегменты генома перемешиваются случайным образом при помощи механизма, называемого перетасовыванием, или реассортацией (reassortment). Два упомянутых рекомбинационных механизма имеют важное значение для рекомбинационного поведения, наблюдаемого у мутантов. В системах, где рекомбинация происходит по механизму разрыв — воссоединение вероятность того, что рекомбинационное событие произойдет между двумя мутациями, пропорциональна физическому расстоянию между этими мутациями на хромосоме. Пары мутантов обнаруживают непрерывный ряд частот рекомбинаций вплоть до теоретического максимума 50%. Этот ряд позволяет выстроить мутанты на линейной карте, где каждая мутация точ-
Предыдущая << 1 .. 73 74 75 76 77 78 < 79 > 80 81 82 83 84 85 .. 224 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed