Вирусология: В 3-х т. Том 1 - Филдс Б.Н.
ISBN 5-03-000283-9
Скачать (прямая ссылка):
Недавно на примере v-ras было показано, что мутации в онкогене могут быть важны для его трансформирующей активности. Продукт v-rasH отличается от своего клеточного аналога всего двумя из 189 аминокислот (в положениях 12 и 59) [101]. Каждая из этих аминокислотных замен существенно повышает трансформирующую активность гена rasH in vitro. К тому же мутанты Ha-MuSV, содержащие лишь одну из этих замен, оказались почти столь же онкогенны, как и исходный вирус (Р. Е. Tambourin, С. К. Chattopadhyay, D. R. Lowy), неопубликованные данные). Онкоген v-myb кодирует укороченный по сравнению с клеточным белком продукт, что, вероятно, служит причиной его онкогенности [95].
Возвращаясь к возможности участия ^ацчкодируемых последовательностей в онкогенности слитных белков gag-one, отметим, что мутанты вируса лейкоза мышей Абельсона (из его названия— A-MuLV — создается неверное впечатление, что это компе-
Тенгный по репликаций Лейкозный ретровирус), утратившие участки гена gag, теряют способность трансформировать in vitro лимфоидные клетки, хотя и продолжают трансформировать фибробласты [140]. Если :из состава слитного онкогена gag-fps вируса саркомы Фуджйвами удалить последовательности гена gag, то его онкогенность при этом не утрачивается [54].
Существует несколько классов онкогенов, подразделяемых по сходству их последовательностей, внутриклеточной локализации кодируемых ими белков и функциональной активности этих белков. Одну из групп составляют онкогены семейства ras, включающего по крайней мере трех представителей — rasH, rasK и rasN [19, 101, 116, 175]. Структура и последовательности этих онкогенов весьма близки. Тем не менее в составе геномов трансформирующих вирусов найдены лишь rasH и rasK. ras-Кодируемые белки расположены преимущественно на внутренней поверхности плазматической мембраны [203]. Эти белки объединяет способность к нековалентному связыванию гуаниловых нуклеотидов и отсутствие у них тирозинкиназной активности.
Другой класс (который мы назовем src-класс) включает гены, имеющие гомологии с онкогеном src. Эта гомология в отлитие от онкогенов ras ограничена небольшим участком последовательности, кодирующей белок. Кроме src, сюда входят онкогены fes-fps (fes — наименование этого онкогена у млекопитающих, а fps — у птиц), abl, yes, ros, fgr, fms, erb В и mos [8, 9, 101, 207]. Белки, кодируемые большинством из этих онкогенов, относятся к протеинкиназам, осуществляющим избирательное фосфорили-рование остатков тирозина in vivo и in vitro. Такая активность не обнаружена пока у продукта онкогена mos. Внутриклеточная локализация этих белков также несколько различается. Продукт erb В — гликопротеин, расположенный на наружной поверхности мембраны [66], продукт fms — цитоплазматический гликопротеин, белки src и аЫ находятся на вутренней поверхности мембраны [202, 204], а продукты fps и mos локализованы в цитоплазме [52, 132]. По-видимому, функция этих белков связана с их внутриклеточной локализацией. Например, онкогенность RSV, мутантных по v-src, коррелирует с локализацией продукта онкогена на плазматической мембране [97].
Сначала казалось, что открытие тирозинкиназной активности src-белка [89] быстро приведет к идентификации (клеточных мишеней его ферментативной активности. Однако этот вопрос еще до сих пор не решен. Было найдено много белков, которые фосфорилируются протеинкиназами src-группы, однако тщательный анализ не позволил выявить явных корреляций между конкретными фосфобелками и трансформированным фенотипом [30]. Часть мутантов, температурочувствительных по трансформации, являются температурочувствительными и по тирозинкиназной
активности, и все мутанты, дефектные по этой активности, дефектны и по трансформации [9]. Однако у других src-мутантов не было выявлено корреляций между трансформирующей и ти-розинюиназной активностями [81,197]. Отметим также, что один из генов src-класса — ген mos — является высокоонкогенным, хотя его продукт и не обладает тирозинкиназной активностью.
Белки — продукты онкогенов mycxfos— локализованы в ядре и составляют один, а может быть и два разных класса онкобел-ков [1, 71, 101]. Гомологии между этими онкогенами не выявлено, и не исключено, что они трансформируют клетки разными способами. Ген v-sis, которой, как оказалось, кодирует измененную форму фактора роста тромбоцитов (PDGF) [143, 196], возможно, относится еще к одному классу трансформирующих генов.
Клеточные трансформирующие гены
Хотя детальное описание клеточных онкогенов и не является целью настоящей главы, их тесная связь с вирусными онкогенами заставляет, кратко остановиться на их свойствах. Анализ клеточных онкогенов помог в понимании функции онкогенов. Клеточные трансформирующие гены идентифицированы во многих опухолях человека и животных. Эти измененные варианты нормальных генов выявляют с помощью двух разных подходов: либо используя способность ДНК из опухолевых клеток трансформировать клетки NIH ЗТЗ (или другие линии), либо по гомо-лоти необычных генов с вирусными онкогенами или их продуктами.
