Вирусология: В 3-х т. Том 1 - Филдс Б.Н.
ISBN 5-03-000283-9
Скачать (прямая ссылка):
Со средним Т-антигеном Ру связывают протеинкиназную активность, ответственную за уникальную реакцию фосфорилиро-вания гидроксильной группы тирозиновых остатков в белках [61]. Сопутствующая среднему Т-антигену протеинкиназа —это*
1ервый случай фермента данного типа, специфичного по отно-лению к тирозину. Позже было установлено, что тирозинспеци-фичной протеинкиназной активностью обладают и некоторые белки, кодируемые онкогенами ретровирусов, а также эпидермальный фактор роста (более подробно см. в работе [13]). Например, получены убедительные данные о том, что кодируемый вирусом саркомы Рауса белок pp60src обладает протеинкиназной активностью, которая играет ключевую роль в процессе трансформации [13]. Однако доказать, что протеинкиназная активность, связанная со средним Т-антигеном, кодируется вирусом и что эта протеинкиназа принимает участие в трансформации клетки, не удалось (более подробно см. в работе [266]). В частности, обнаружилось, что клетки, трансформированные онкоген-ным ретровирусом, кодирующим протеинкиназы, характеризуются повышенным уровнем фосфотирозина, а клетки, трансформированные Ру, — нет.
В работе [259] сообщалось, что часть молекул среднего Т-антигена Ру в трансформированных клетках фосфорилирована. Большинство этих молекул локализовано во фракции плазматических мембран; у них фосфорилированы в основном остатки треонина и в меньшей степени остатки серина и тирозина. Большая же часть протеинкиназной активности (80—90%), которая приводит к специфическому фосфорилированию тирозиновых остатков среднего Т-антигена, обнаруживается в плазматической мембране. Из этих данных следует, что по тирозиновым ¦остаткам фосфорилируется только та часть среднего Т-антигена, которая локализована в плазматической мембране, или что те формы среднего Т-антигена, которые фосфорилированы по тирозиновым остаткам, мигрируют к плазматической мембране. Высказывалось также предположение, что фосфорилирование среднего Т-антигена по треониновым и сериновым остаткам осуществляется при участии клеточной протеинкиназы и это в свою очередь активирует связанную со средним Т-антигеном протеин-киназную активность.
Недавно появилось сообщение о том, что часть молекул среднего Т-антигена образует стабильный комплекс с pp60c-src— клеточным гомологом протеинкиназы pp60src вируса саркомы Рауса [44]. Комплекс был выделен с помощью иммунопреципитации антителами, специфичными к среднему Т-антигену или ррбО. Этот результат свидетельствует о том, что связанная со средним Т-антигеном протеинкиназная активность присуща pp60c_src, а не собственно среднему Т-антигену. Это также указывает на участие в процессе трансформации клетки некой функции, по-видимому, общей у онкогенных ретро- и полиомавирусов.
Судя по результатам биохимического фракционирования, им-мунофлуоресцентной микроскопии и иммуноэлектронной микроскопии [109], большой Т-антиген присутствует в определенных областях нуклеоплазмы. Некоторое количество молекул большого Т-антигена Ру обнаружено также во фракции плазматических мембран, но смысл этого результата пока неясен [259].
Сравнение с большим Т-антигеном SV40 показывает, что большой Т-антиген Ру выполняет существенно меньше функций. Он связывается с точкой начала репликации вирусной ДНК [81] и обладает АТРазной активностью [80]. Как и в случае SV40, большой Т-антиген Ру, вероятно, инициирует репликацию вирусной ДНК и регулирует транскрипцию вирусного генома. Очевидно, большой Т-антиген Ру также индуцирует цикл репликации клеточной ДНК [254].
Биохимические функции малого Т-антигена полиомавируса
Малый Т-антиген Ру нужен при одновременной трансформации первичных клеток грызунов средним и большим Т-антиге-нами и при индукции опухоли средним Т-антигеном. Никаких сведений о его биохимических свойствах пока нет.
Папилломавирусы
Папилломавирусы представляют собой интереснейшие модельные системы для изучения молекулярной биологии индуцируемого вирусами онкогенеза, поскольку и в естественных условиях для них характерна экспрессия онкогенов и наблюдается тесная взаимосвязь между экспрессией вирусного генома и состоянием дифференцировки хозяйской клетки (более подробно см. в работе [47]). Изучение молекулярно-биологических основ трансформации клетки папилломавирусами сдерживается из-за отсутствия систем культур пермиссивных клеток, в которых можно было бы осуществлять репликацию вируса и изучать экспрессию вирусных генов. Недавние работы по анализу последовательности ДНК клонированных геномов BPV-1, HPV-1 и HPV-6 предоставили в наше распоряжение уникальные сведения о молекулярной организации и экспрессии генов папилломавирусов. Кроме того, исследование процесса транскрипции позволило идентифицировать специфические вирусные РНК в опухолях, индуцированных папилломавирусами, и в трансформированных клетках, в которых происходит частичная экспрессия вирусного генома, а кроме того, на дифференцированной периферии инду-
цированных вирусом бородавок, где происходит размножение вируса и где, очевидно, экспрессируется весь вирусный геном. Ранние вирусные белки в трансформированных клетках или в опухолях пока не идентифицированы; неясна и природа продуктов вирусных генов, предположительно вовлеченных в трансформацию клетки.
