Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Эш Б.Б. -> "Трансформированная клетка" -> 94

Трансформированная клетка - Эш Б.Б.

Эш Б.Б., Билл П.Т., Камерон И.Л. Трансформированная клетка — К.: Наукова думка, 1985. — 384 c.
Скачать (прямая ссылка): transformirovannayakletka1985.djvu
Предыдущая << 1 .. 88 89 90 91 92 93 < 94 > 95 96 97 98 99 100 .. 211 >> Следующая

Bailey (1967) сообщил результаты исследования поглощения сывороточных липидов L-клетками: несмотря на то что экзогенные триглицериды легко инкорпорируются в клетки, жирные кислоты сывороточного происхождения представляют собой в клетке небольшую фракцию по сравнению с общей. Маловероятно, что в отсутствие альбумина значительное количество СЖК становится доступным для клеток. При жировой конверсии определенную роль может играть поглощение из среды триглицеридов разрушенных клеток. Поскольку в культуру не вводились экзогенные липиды, можно предположить, что аккумулируемые триглицериды — продукт синтеза do novo.
В биологическом плане это явление представляет собой несколько высокоорганизованных и сложных клеточных обменных процессов, эффективно нарушающих функцию сохранения жиров клеткой. Хотя жиросодержащие клетки остаются жизнеспособными после пассажа культуры в течение 7 и более дней, эти клетки не способны к последующему делению вне зависимости от присутствия сыворотки, что свидетельствует об окончательной дифференцировке. Заманчиво предположить, что это является в конечном счете последствием нарушения процессов, связанных с клеточной поверхностью. Вероятно, что взаимодействие клеток и адгезивного субстрата на уровне плазматической мембраны облегчается при отсутствии экзогенного белка, адсорбированного на поверхности. Значительная модифика-
167
ция адгезивных процессов была связана с адсорбированными клеточными белками или кристаллинальбумином (Grinnell, 1974), и вполне вероятно, что подобный механизм функционирует здесь также. Модуляция клеточноповерхностных взаимодействий рассматривается, таким образом, как первичный фактор в регуляции генной экспрессии (сравни Robbins, Nicholson, 1975; Singer, 1975), в данном случае — дифференцировки адипоцитов. Taylor и Jones (1979) недавно сообщили, что в параллельных опытах нетрансформированные клетки СЗН-10Т 1/2 могут быть индуцированы к формированию адипоцитов, а также миоцитов и хондроцитов после обработки 5-аза-цитидином. 5-Азацитидин также индуцировал формирование мышечных клеток из злокачественно трансформированных клеток СЗН-10Т 1/2 CL8, хотя и не в такой степени, как из нормальных клеток ЮТ 1/2. Это подтверждает предположение, что трансформированные дериваты могут все еще сохранять генетическую информацию, необходимую для дифференцировки.
С другой стороны, в адипоцитарной конверсии отсутствовал одтш аспект фенотипической реверсии. Некоторые исследователи (Green, Meutb, 1974; Taylor, Jones, 1979) сообщали, чю адипоцитная конверсия клеток проходит с формированием фокусов (см. рис. 5 и 6). Конверсия клеток Т-1 ОТ 1/2 к гистологически идентичному адн-поциту проходит случайно, без развития фокусов. Поскольку развитие фокусов явно не клонального происхождения, логично объяснить это свойство как отражение клеточно — клеточных взаимодействий, По отношению к адгезионной зависимости и контактному торможению роста наличие жировой конверсии сегласуется с невозможностью восстановления нормальных клеточно — клеточных взаимодействий.
5.3.2.2. Изменения энергетического обмена в среде определенного химического состава
Tomei и Bertram (1978) установили, что фенотип трансформированных метилхолаптреном клеток C3II-10T 1/2 CL8 конвертирован к правильной эпителиоидной морфологии без перекрывания клеток и развитию способности формировать сплошной монослой непролиферирующих клеток с плотностью насыщения 5 X 104 клеток /см2 при росте в среде FCRC-20. Далее они обнаружили, что, когда клетки, растущие в сбалансированной среде, переносятся в основную среду Игла (ОСИ) с добавлением телячьей эмбриональной сыворотки, инактивированной нагреванием, они вновь приобретают трансформированный фенотип с сохранением их туморогепности. Эти исследования показывают, что экспрессия трансформированного фенотипа может зависеть от условий окружающей среды, и таким образом можно изучить, вовлекает ли реверсия усиленный аэробный гликолиз и обратимы ли сами процессы реверсии, как это наблюдали Carroll и др. (1978) при использовании ингибиторов белкового синтеза.
168
рис. 9. Скорость образования (14С)-лактата в клетках СЗН-10Т 1/2, трансформированных метилхолант-реном в присутствии и отсутствие оубаина. Клетки МХА-СЗН-10Т 1/2 (3,7 X 105 клеток/пластинку) инкубировались в буферном солевом растворе Хенкса, при 37 °С в течение обозначенного времени. О — контроль; Д — обработка оубаином. К клеткам добавлялось 1 мкКп (14С)-глюкозы, затем определялась радиоактивность (14С)-лактата после разделения с помощью тонкослойной хроматографии по методу, описанному Tercyak и соавт. (1978).
200
< | 100 Зз ч
II
to ^
у
S
/X
л/
у/
/
о*
/
/
20
40 60 60 100 120 Время, мин
Первоначально уровень формирования (14С)-лактата из (U — 14С)-глюкозы исследовался в клетках СЗН-10Т1/2, трансформированных метилхолантрепом. Использование тонкослойной хроматографии для определения радиоактивности (14С)-лактата значительно повысило чувствительность измерения гликолиза (Tercyak et al., 1978). Этот быстрый, легко воспроизводимый метод представляет особую ценность, так как в монослойных культурах лишь ограниченное число клеток непостоянно продуцирует небольшое количество лактата. Как видно из результатов опыта, представленных на рис. 9, уровень гликолиза в клетках СЗН-10Т 1/2, трансформированных метилхолантреном (МХА), повышался линейно в течение первых 2 ч инкубации при 37 °С. Затем мы исследовали скорость формирования (14С)-лактата в различные периоды роста клеток и чувствительность гликолиза к ингибитору Na+,K+-ATOa3 — оубаину. Как видно из результатов опыта (табл. 2), уровень гликолиза в нормальных клетках СЗН-10Т1/2 относительно высок в логарифмической фазе клеточного роста и уменьшается в фазе сплошного монослоя. Также необходимо отметить, что когда клетки достигают состояния сплошного монослоя, уменьшается их чувствительность к оубаину.
Предыдущая << 1 .. 88 89 90 91 92 93 < 94 > 95 96 97 98 99 100 .. 211 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed