Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Эш Б.Б. -> "Трансформированная клетка" -> 82

Трансформированная клетка - Эш Б.Б.

Эш Б.Б., Билл П.Т., Камерон И.Л. Трансформированная клетка — К.: Наукова думка, 1985. — 384 c.
Скачать (прямая ссылка): transformirovannayakletka1985.djvu
Предыдущая << 1 .. 76 77 78 79 80 81 < 82 > 83 84 85 86 87 88 .. 211 >> Следующая

Ю 5-1329
145
и других факторов в контроле роста. Когда фибробласты человека продолжительно выращивали в присутствии 4 нг/мл ЭФР, клетки утрачивали высокую потребность к сыворотке и не ограничивались плотностнозависимым ингибированием, достигая плотности популяции в 4—6 раз выше, чем в контроле (Carpenter, Cohen, 1976а). Исследования, направленные на выяснение молекулярных механизмов действия ЭФР, определили, что связывание Ш1-ЭФР с поверхностью культивируемых клеток насыщенно и специфично (Carpenter et al., 1975; Carpenter, Cohen, 1976; Cohen et al., 1975).
В 1976 г. Todaro и De Larco сообщили, что клетки ЗТЗ, трансформированные саркоматозными вирусами мышей и кошек (РНК-содержащими опухолеродными вирусами), утрачивали рецепторы к ЭФР в результате вирусной трансформации, В клетках, трансформированных ДНК-содержащими опухолеродными вирусами, такими, как SV 40 и пол и омы, или клетках, инфицированных нетрансформирующими РНК-содержащими опухолеродными вирусами, изменения не обнаружены. В дальнейшем, исследуя это явление, Todaro и соавт. (1977) показали, что индуцированная саркомным вирусом утрата связывания ЭФР не являлась главным вкладом в общее снижение связывания ростового фактора. Связывание множественно стимулирующей активности (MCA) потенциальным митогеном для культивируемых клеток (Dulak, Temin, 1973) было неудачным при вирусной трансформации. Todaro и соавт. (1977) обнаружили, что две линии фибросаркомы человека связывали незначительное количество MCA по сравнению с нормальными фибробластами, в то время как их способность связывать ЭФР уменьшалась.
De Larco и Todaro (1978) сообщили, что трансформированные саркомными вирусами мышей и кошек клетки продуцировали в культуральную среду вещества (их масса выражалась в нанограммах), обратимо индуцирующие нормальные клетки к росту в мягком агаре и вызывали в этих клетках, лишенных сыворотки, индукцию синтеза ДНК. Эти вещества, названные авторами саркомными ростовыми факторами,— пептиды с молекулярной массой от 7000 до 25 ООО Д. Все три класса идентифицированных саркомных ростовых факторов были способны конкурировать с 12б1-ЭФР за связывающие с помощью ЭФР места на клетках. Авторы заключили, что эти факторы проявляют на фибробластах свойства трансформации, наблюдаемые после трансформации саркомными вирусами. Клеточные линии, выделенные из фибросарком человека, которые имели сниженное количество рецепторов для MCA, секретируют в культуральную среду полипеп-тидные факторы, конкурирующие за рецепторы для MCA (Todaro, De Larco, 1978). Todaro и De Larco (1978) предложили гипотезу, что один из путей, благодаря которому клетки становятся злокачественными,— эндогенная продукция факторов, для которых они имеют рецепторы. Следовательно, клетки продолжительно отвечают на стимул и освобождаются от зависимости от экзогенных сывороточных факторов. По-видимому, малое количество доступных рецепторов ростовых факторов на трансформированных клетках могут наблюдаться в результате оккупации рецепторов эндогенно секретируемыми
146
факторами ели снижения регуляции рецепторов, индуцированных постоянной продукцией ростовых факторов.
Мы осуществили исследование, подобно описанному Todaro, с целью установить связь изменений в контроле роста клеток Rati (wt/RSV) с продукцией саркомных ростовых факторов. Используя анализ 1261-ЭФР-связывания клетками Rati и Rati wt/RSV), мы обнаружили, что трансформированные клетки имели 10 % числа рецепторов ЭФР нетрансформированных клеток (Martisian Magun,
1979). В отличие от их нетрансформированных двойников лишенные сыворотки клетки Rati (wt/RSV) не синтезировали ДНК в ответ на ЭФР. Культуральная среда, в которой выращивали клетки Rati wt/RSV), содержала вещества, способные конкурировать с 1251-ЭФР за связывание клеток Rati, Оказалось, что в клетках, трансформированных птичьими саркоматозными вирусами, индуцируется трансформация подобно трансформации, вызванной саркоматозными вирусами мышей и кошек.
Мы выдвинули гипотезу, что изменения контроля роста, наблюдаемые в трансформированных RSV клетках Rati (см. раздел 3.2),— результат продукции саркомных ростовых факторов. Больший ответ нетрансформированных клеток Rati на сыворотку по сравнению с клетками Rati (RSV) может наблюдаться как результат большего числа рецепторов для ЭФР на клетках Rati. Таким образом, ЭФР или ЭФР-подобные ростовые факторы в сыворотке могли бы быть ответственны за большую вероятность продвижения клеток Rati по фазам клеточного цикла вслед за стимуляцией сывороткой по сравнению с таковой клеток Rati (RSV). Эндогенная продукция саркомных ростовых факторов клетками Ratl(RSV) ответственна за большую вероятность продвижения клеток в условиях выращивания в безсывороточной среде. Все результаты исследования клеток Rati, проведенные в нашей лаборатории, указывают на то, что нетрансформированные и трансформированные RSV клетки входят в постмито-тическое покоящееся состояние идентично, но способность трансформированных клеток продуцировать свой собственный ростовой фактор может быть ответственной за их свойство ускользать из активной части клеточного цикла при условии истощения сыворотки.
Предыдущая << 1 .. 76 77 78 79 80 81 < 82 > 83 84 85 86 87 88 .. 211 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed