Трансформированная клетка - Эш Б.Б.
Скачать (прямая ссылка):
2.1.3. Состав опухоли
Опухоли обычно содержат множество различных клеток, одни из которых являются нормальными, другие — неопластическими. Тран сформированные клетки не обязательно представлены в большинстве. Нормальные клетки включают фибробласты, хондроциты, макро фаги, лимфоциты, перициты и васкулярные эндотелиальные клетки. Злокачественные клетки обладают двумя или более фенотипами. В некоторых случаях эта феноаипическая мозаика опухолевых клеток отражает независимую трансформацию двух или более различных родительских клеток (Siracky, 1979), в то время как в других случаях она отражает способность генотипически однородной клеточной популяции принимать две или более переменные, но взаимозаменяемые формы (Yang et al., 1977). Как у человека, так и у крыс карци-
15
номы часто содержат саркоматозные участки (Montesano, 1975; Knowles, Franks, 1978; Schaeffer, Heintz, 1978), которые формируются при трансформации нормальных мезенхимальных тканей, индуцированной соседними раковыми клетками (Goldberg, Pavia, 1979; Huebner ¦et al., 1979). Саркомы и меланомы также способны индуцировать злокачественную саркоматозную трансформацию окружающих нормальных мезенхимальных клеток (Huebner et al., 1979).
Когда эксплантаты готовятся из опухолевой ткани, клеточные линии могут быть выделены как из нормальных, так и опухолевых клеток первичной опухоли и могут содержать один или несколько типов клеток. Таким образом, когда клеточная линия получена из опухоли, нельзя сделать предположение о ее туморогенности, особенно для клеток, растущих в культуре, которые могут быть как нор-мальными, так и опухолевыми. Подобным образом факт, что опухоль является карциномой, не означает, что злокачественная клеточная линия, выделенная из нее, будет карциноматозной. Нормальный или опухолевый статус таких линий может быть определен только прямым тестом на онкогенность in vivo, а карциноматозная или саркоматозная природа может быть установлена только при гистологическом исследовании как клеток в культуре, так и опухолей, которые они формируют при трансплантации in vivo.
2.1.4. Эффективность трансформации
Простая обработка клеток трансформирующими агентами не обязательно приводит к их трансформации. Частота трансформации онко-тенными вирусами и химическими канцерогенами для многих пере-тшваемых культур редко превышает 50 %, а нередко бывает на один и более порядков меньше. Некоторые онкогенные вирусы обычно обладают очень низкой эффективностью трансформации (Rabson, Kirsch-stein, 1962; Sheinet al., 1963). К ним относятся SV 40, полиомавиру-сы (Kurimura, Hirano, 1972; Sioker, MacPherson, 1961; Medina, Sachs, 1961; Sanford, 1965) и аденовирусы (Kurimura, Hirano, 1972; Harwood, Gallimore, 1975; Chen, 1976; Gallimore, 1977). Множество химических канцерогенов обладает сравнительно низкой эффективностью трансформации (см. обзор Sanford, 1965). Таким образом, в поисках корреляции некоторых клеточных характеристик с туморо-генностью нормальное или неопластическое состояние клеток должно быть установлено прямой пробой in vivo и не может считаться достоверным только на основании воздействия потенциально трансформирующим агентом.
2.2. ПРОБЫ НА ОНКОГЕННОСТЬ IN VIVO
Первые этапы исследований, связанные с тестированием онко-тенности in vivo, состояли во введении животному ткани, выделенной от другого животного того же вида (Little, Tyzzer, 1916; Schrek, 1936). Частота успешной трансплантации была обычно сравнитель-
16
но низкой, а прогрессивный рост опухоли в результате трансплантации скорее был отражением метода, чем свидетельством истинной онкогенности. Большинство источников артефактов и вариабельности результатов включает способ приготовления ткани, путь инокуляции, объем инокулята, период наблюдения, число инокулированных животных и, что наиболее важно, иммуногенность опухоли.
2.2.1. Изогенные трансплантаты
Хотя неудача при росте in vivo может означать, что трансплантат ткани является незлокачественным, она может также означать, что ткань слишком иммуногенна для реципиента. Таким образом, истинный тест на онкогенность может быть осуществлен у животных, которые совершенно не способны отторгать трансплантат по иммунологическим причинам (Handler et al., 1956; Jones et al., 1975). В принципе, иммунное отторжение можно избежать при трансплантации ткани изогенным хозяевам с тем же локусом гистосовместимости, что у животного, от которого исследуемая ткань была выделена. Практически этот тест зачастую неудачен. Действительно, спонтанные опухоли, трансплантированные сразу же после их первичного выделения, обычно обладают высоким выходом при трансплантации изогенным хозяевам (Hewitt, 1978). Однако большинство используемых экспериментальных опухолей — вирус- или химически индуцированные. Они обычно тестировались в колониях животных, отличающихся от первоначального происхождения, и поддерживались в культуре или с помощью трансплантации in vivo в течение длительного промежутка времени.
