Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Эш Б.Б. -> "Трансформированная клетка" -> 60

Трансформированная клетка - Эш Б.Б.

Эш Б.Б., Билл П.Т., Камерон И.Л. Трансформированная клетка — К.: Наукова думка, 1985. — 384 c.
Скачать (прямая ссылка): transformirovannayakletka1985.djvu
Предыдущая << 1 .. 54 55 56 57 58 59 < 60 > 61 62 63 64 65 66 .. 211 >> Следующая

Туникамицин. Он блокирует образование долихол-РР-1Ч-ацетил-D-глюкозамин — первый этап в долихолзависимом пути гликозилирования (см. рис. 1) (Tkacz, Lampen, 1975; Struck, Lennarz, 1977). Несколько лабораторий сообщили, что туникамицин ингибирует жизнеспособность клеток, инфицированных онкогенными вирусами. Концентрация ингибирования соответствует концентрации, при которой ингибируется рост, но она не является летальной как для нормальных эмбриональных клеток цыпленка, так и для некоторых стабильных клеточных линий (Takasuki et al., 1976; Duksin, Born-stein, 1977; Olden et al., 1979). Это привело к предположению, что туникамицин избирательно токсичен по отношению к онкогенно трансформированным клеткам (Olden et al., 1979). Хотя известно, что не существует линии, которая могла бы быть использована для
110
прямого определения способности к опухолеобразованию in vivo, в каждом цитируемом исследовании служили в качестве «нормального контроля» одна или более стабильных линий, проверенных на опухолеобразование при помощи анализа Буна (Boone et al., 1976). Поэтому в настоящее время идея эффективности туникамицина в избирательной противоопухолевой химиотерапии остается в основном спекулятивной. Действие туникамицина на жизнеспособность клеток определялось в экспериментах с эмбриональными клетками цыпленка, нормальными крысиными клетками почки (NRK), ЗТЗ клетками мышей линии BALB/c, WI-38 человеческих фибробластов и их производных, полученных обработкой химическими агентами, вирусами, облучением (Olden et al., 1979). Показателями жизнеспособности клеток служили: отсутствие окрашивания трипановым синим, возобновление роста после удаления препарата из клеточной культуры и способность трипсиноразделенных плавающих клеток к образованию колоний на пластиковых чашках для тканевых культур. Влияние туникамицина на клеточный метаболизм изучалось на основании анализа включения меченных тритием маннозы и лейцина в кислый осадок клеточных макромолекул, поглощения клетками
2-дезоксиглюкозы, превращения 14С-глюкозы в иС02. Рост клеток в мягком агаре служил в качестве грубого теста онкогенной трансформации. Следует отметить, что имеются определенные причины для сомнения обоснованности теста — роста клеток в мягком агаре —¦ как показателя онкогенной трансформации (гл. 2).
В большинстве экспериментов с туникамицином клеточная выживаемость определялась исключительно по окрашиванию трипановым синим. Хотя этот тест определяет способность клеток к окрашиванию, он в общем характеризует их переживаемость как показатель жизнеспособности (Bhugan et al., 1976; Roper, Drewinko, 1976). С помощью теста с трипановым синим было обнаружено, что три линии из И, которые, вероятно, трансформировались, были проницаемыми к красителю после 36-часовой экспозиции в туникамицине (0,05 мг/мл), LD50 для линий, чувствительных к препаратам, оценивалось по результатам выращивания колоний в чашках для тканевых культур в присутствии (0,02—0,03) мг/мл туникамицина. Три стабильные линии оказались относительно неустойчивыми к метаболическому действию препаратов. Клетки, трансформированные температурочувствительными мутантами вирусов саркомы Рауса (Kawai, Hanafusa, 1971; Martin, 1971), были сравнительно устойчивы к туникамицину, если росли при непермиссивных температурах, но погибали при пермиссивной температуре культивирования. Рост различных типов эмбриональных клеток цыпленка и стабильных клеточных линий, которые не подвергались трансформирующему действию, обратимо ингибировался туникамицином, концентрация которого токсична для клеток, инфицированных вирусами.
Хотя клетки всех линий после 9-часовой обработки туникамицином (концентрация 0,05 мг/мл среды) не окрашивались трипановым синим, отмечалось торможение включения в клеточные макромолекулы 3Н-маннозы и 3Н-лейцина. Скорость включения маннозы
111
была снижена на 93—99 %, а лейцина на 3—26 %. Спустя 24 ч, когда клетки инфицированных вирусами линий (а не нормальные эмбриональные клетки) окрашивались трипановым синим, в них Йаблюдалось относительное ингибирование поглощения 2-девокси-глюкозы и метаболизма глюкозы.
На основании этих результатов Olden и соавт. (1979) предположили, что преимущественная токсичность туникамицина для трансформированных клеток обусловлена ингибированием гликозилиро-вания, а наблюдаемая селективность препаратов может являться результатом различной чувствительности нормальных и трансформированных клеток к снижению метаболизма глюкозы и транспорту питательных веществ. Однако отсутствие теста на опухолеобразование используемых линий и возможная ошибка при классификации линии ЗТЗ как нормальной позволяют сомневаться в справедливости этих выводов.
Хотя еще не определена противоопухолевая активность туникамицина in vivo, маловероятно, что он будет обладать избирательным' токсическим действием на опухоли, учитывая его ингибирующий эффект на гликозилирование и секрецию в нормальных тканях.
Глюкозамин. Противоопухолевая активность D-глюкозамина — естественного аминосахара — была впервые продемонстрирована в 1953 г. исследованиями Quastel и Cantero (1953) на мышах, инфицированных с саркомой 37. С тех пор показано, что глюкозамин избирательно лизирует несколько типов перевивных опухолей животных (Ball et al., 1957; Lindlar et al., 1960; Bekesi et al., 1969a; Bekesi, Winzler, 1970; Monlar, Bekesi, 1972) и опухолей человека, пересаженных на бестимусных безволосых мышей nude (L. Iielson, личное сообщение), незначительно влияя или не оказывая токсического влияния на нормальные ткани организма-хозяина. Хорошо установлено цитотоксическое действие глюкозамина на злокачественные клетки в культуре ткани (Rubin et al., 1954; Fjelde et al., 1956; Bekesi et al., 1969a; Bosmann, 1971; Monlar, Bekesi, 1972; Friedman, Skehan, 1980). В нескольких работах, проведенных на нормальных эмбриональных клетках (Ely et al., 1953; Scholtissek, 1972), было показано, что концентрации глюкозамина, которые вызывают необратимые повреждения опухолевых клеток, не влияют на жизнеспособность нормальных.
Предыдущая << 1 .. 54 55 56 57 58 59 < 60 > 61 62 63 64 65 66 .. 211 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed