Трансформированная клетка - Эш Б.Б.
Скачать (прямая ссылка):
20 до более чем 100 % значения повторных тканевых образцов и первичных культур, приготовленных из тканевых образцов (Albrecht-sen, 1957; Bernick, Kwaan, 1969; Barrett et al., 1979). Клональная вариация даже больше. В серии клонов человеческой линии ТЕ85 различия между клонами с наивысшей и наинизшей фибринолитической активностью составляли 925 % (Jones et al., 1975). Подобная степень клональной вариабельности указывалась для куриных эмбриональных фибробластов и их трансформантов вирусом саркомы Рауса (Wolf, Goldberg, 1976).
2.6.4. Резюме
Корреляция между туморогенностью и фибринолитической активностью или продукцией активатора плазминогена отсутствует. Эта утрата корреляции документирована для тканей in vivo на основе интенсивных исследований. Ранние литературные сообщения, свидетельствующие об увеличении активатора плазминогена при онкогенной трансформации, были необоснованными и явились результатом того, что должным образом не проявлялся нормальный статус или туморогенность использованных клеточных линий и убежденность в онкогениых вирусах как возможных трансформирующих агентах. Стимуляция активатора плазминогена не имеет причинной связи с трансформацией, а, вероятно, отражает отдельный механиэм вирусного действия.
53
2.7. ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Образование опухолей in vivo инокуляцией клеток требует, чтобы клетки были трансплантабельны и способны к прогрессивному росту. Выход трансплантатов широко варьирует и зависит от типа трансплантируемой ткани и природы хозяина-реципиента. Хотя выход может случайно достичь 100 %, наиболее типичны колебания от 25 до 50 %. Процент опухолей, которые затем прогрессивно растут вслед за успешной трансплантацией, также вариабелен, однако редко превыша-от 50 % и часто существенно меньше. Выход индивидуальной опухоли чрезвычайно чувствителен к методу трансплантации, может варьировать на порядки в зависимости от степени гистосовместимости с хозяшном-реципиентом, размера инокулята, места трансплантации, зависимости клеток от субстрата, типа диссоциирующей процедуры для приготовления клеток. Кроме того, образование опухолей зависит не только от этих параметров, но и от длительности периода наблюдения по сравнению с латентным периодом новообразования и скоростью прогрессивного роста. В отсутствие обширной методологической оптимизации неопластические ткани обычно не формируют опухоли in vivo и неправильно классифицируются как нормальные. Хотя и намного реже, нормальные ткани могут случайно приводить к прогрессивному росту и могут быть неправильно классифицированы как опухоли в отсутствие тщательного гистологического анализа. Таким образом, чрезвычайно трудной задачей является тщательное и точное установление нормального статуса или туморогеи-ности клеточной популяции.
В настоящей главе мы задались вопросом, могут ли изменения в клеточной морфологии, организации цитоскелета, зависимости от субстрата, агглютинабельности Кон А, продукции активатора плазминогена, сопровождающие онкогенную трансформацию достаточно часто, служить надежными индикаторами клеточной туморогенности. В главе 3 взаимосвязь между туморогенностью и изменениями мембранных антигенов, сиалированием и гликозилированием глико-протеина также рассматривается.
Пи одно из этих изменений не может рассматриваться как доказуемая связь с онкогенной трансформацией и не может обоснованно признаваться как индикатор клеточной туморогенности широкого спектра. Однако использование множественных цитологических критериев, как доказано, может быть надежным индикатором туморогенности для двух специфических крысиных систем, и было бы крайне интересно определить, может ли данный метод иметь более широкое применение.
Исследования in vitro онкогенной трансформации являются предметом ряда артефактов, которые осложняют интерпретацию экспериментальных данных и ведут к ошибочным заключениям о возможной связи между туморогенностью и изменениями клеточного фенотипа. Самый важный источник ошибки в подобных исследованиях — неправильная классификация нормального статуса и туморогенности использованных клеточных линий. Клетки в культуре кариотипиче-
54
ски и генетически нестабильны. Эта нестабильность ведет к быстрому видообразованию, когда клетки той же наследственной популяции размножались отдельно. Природа этого видообразования чрезвычайно чувствительна к точным условиям культивирования, и клетки того же номинального вида, размножаемые в различных лабораториях, часто становятся различными типами клеток. Из-за этого видообразования данные литературы о нормальном статусе или туморогенности индивидуальной клеточной линии не могут быть обоснованными для клеток той же номинальной линии, растущей отдельно в различных лабораториях.
Так как нормальные клетки в культуре подвергаются онкогенной трансформации (тогда как истинно неопластические клетки иногда утрачивают туморогенность) статус клеток в отдельной лаборатории не может оставаться постоянным в течение любого значительного периода времени. Нельзя делать предположение о природе клеток на основании их тканевого происхождения. Опухоли содержат нормальные клетки, которые могут хорошо расти преимущественно в культуре, а нормальные клетки в культуре часто подвергаются спонтанной трансформации. Подобным же образом нельзя предположить, что клетка туморогенна просто потому, что подвергалась действию агента, способного индуцировать онкогенную трансформацию. Эффективность трансформации онкогенных вирусов и химических канцерогенов часто чрезвычайно низка. Таким образом, нормальный статус или туморогенность клеточной линии никогда не может предполагаться. Они могут быть установлены только прямой пробой in vivo. В корреляционных исследованиях пробы на туморогенность, если они уместны, должны осуществляться на тех же клетках, того же уровня пассажа из тех же культур, как и клетки, используемые для изучения фенотипического свойства.
