Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Эш Б.Б. -> "Трансформированная клетка" -> 24

Трансформированная клетка - Эш Б.Б.

Эш Б.Б., Билл П.Т., Камерон И.Л. Трансформированная клетка — К.: Наукова думка, 1985. — 384 c.
Скачать (прямая ссылка): transformirovannayakletka1985.djvu
Предыдущая << 1 .. 18 19 20 21 22 23 < 24 > 25 26 27 28 29 30 .. 211 >> Следующая

47
плазминогена во внеклеточную среду. Механизм этой секреции неизвестен, но может вовлекать транслокацию энзима в плазматическую мембрану экзоцитозом, а затем с помощью молекулярного сбрасывания во внеклеточную среду (Jaken, Black, 1979).
Фибринолитическая активность клеточной культуры или ткани измерялась по способности разрушать внеклеточный фибрин. Две, наиболее обычно используемые пробы заключаются в формировании путем лизиса чистой бляшки в фибриновой пленке и разрушении меченного 1251 фибрина (Astrup, Mullerty, 1952; Unkeless et al., 1973). Уровни активатора плазминогена обычно измеряются как плазмиио-ген-зависимое расщепление протеинового субстрата, такого, как фибрин, казеин или протамин (Astrup, Mullerty, 1952; Goldberg, 1974; Unkeless et al., 1974; Kessner, Troll, 1976), хотя недавно прямая флюоресцентная проба стала также доступна (Zimmerman et al., 1978). Так как клетки продуцируют ряд протеолитических энзимов, отличных от плазмина, многие из которых могут также расщеплять фибрин, различие между активаторами плазминогена и другими типами фибри-нолитической активности является важным. Активаторы плазминогена отличаются по их абсолютному требованию — присутствию плазминогена. Так как многие ткани способны одновременно продуцировать активатор плазминогена и плазминоген-независимые фибриполи-тические энзимы (Cliffton, Jrossi, 1955; Albrechtsen, 1957), важно определить, какая часть общей фибринолитической активности зависит от плазминогена, а какая — нет.
2.6.2. Корреляция с туморогенностью
Интерес к возможной связи малигнизации с увеличенной продукцией активатора плазминогена оживился в начале 70-х годов после исследований Reich и его коллег по трансформации клеточных культур потенциально онкогенными вирусами. Мышиные ЗТЗ и куриные, мышиные и хомячковые эмбриональные клетки в культуре — все, как было выявлено, секретируют очень низкие уровни энзимов, ответственных за фибринолитическую активность (ФА), в культуральную среду. Инфицирование этих клеток рядом потенциально онкогенных вирусов вызывало стимуляцию секреции энзимов ФА от 5 до 45 раз, в то время как инфицирование нетрансформирующими штаммами птичьих лейкозных вирусов или неонкогенными цитопа-тогенными РНК- или ДНК-содержащими вирусами не влияло на секрецию энзимов ФА (Ossovski et al., 1973; Unkeless et al., 1973). Из этих наблюдений возникло предположение, что стимуляция фибринолитической активности тесно коррелировала с трансформацией. Активатор плазминогена, как было последовательно показано, почти полностью ответствен за увеличенную фибринолитическую активность куриных эмбриональных клеток, инфицированных вирусом саркомы Рауса, множества туморогенных эпителиальных линий печени крыс, ряда химически и вирус-трансформированных мышиных ли-ашй, химически индуцированных крысиных глиом и мышиных кле-
48
ток ЗТ6 (Quigley et al., 1974; Unkeless et al., 1974; Montesano et alM 1977; Rifkin, Pollack, 1977; Hince, Roscoe, 1978; Jaken, Black,
1979).
Таким образом, они развили временную версию гипотезы Fischer (Fischer, 1925) о том, что нормальные клетки обладают малой способностью к фибринолизу, в то время как онкогенная трансформация сопровождалась существенным увеличением фибринолитиче-ской активности по результатам преимущественно увеличенной секреции активатора плазминогена (Reich, 1974).
Хотя ранние работы, казалось, поддерживают эту теорию, более недавние исследования внесли значительные сомнения в ее обоснованность. Наиболее серьезные возражения: отсутствие стойкой связи между туморогенностью и продукцией энзимов ФА тканевыми фрагментами и первичными культурами, приготовленными из тканей in vivo; нормальный или онкогенный статус клеточных линий, использованных в ранних экспериментах, скорее предполагался, чем устанавливался пробами in vivo; клональная вариабельность и плот-ностная зависимость игнорировались в большинстве сравнительных исследований; многие нормальные ткани обладают высокими уровнями энзимов ФА и активатора плазминогена.
Гипотеза Reich—Fischer опровергается рядом исследований по изучению продукции активатора плазминогена тканевыми фрагментами и первичными культурами, приготовленными из тканей in vivo. При исследовании более чем 200 человеческих опухолей и нормальных тканей Cliffton и Grossi (1955) наблюдали, что нормальные ткани, как правило, продуцировали высокие уровни фибринолитической активности, в то время как продукция опухолями была вариабельной. Эксплантаты опухолей молочной железы составляли группу, продуцирующую незначительное количество ген-независимого энзима ФА, но умеренные — активатора плазминогена. Большинство плоскоклеточных карцином не продуцировало ни активатор плазминогена, ни плазминоген-независимый энзим ФА (ПНФА). Аденокарциномы пищеварительного тракта были высоко вариабельны в продукции, только при больших карциномах кишечника наблюдалась тенденция к продуцированию большого количества ПНФА. Саркомы обладали обычно высоким уровнем ПНФА (Cliffton, Grossi, 1955).
Заключения Cliffton и Grossi были подтверждены несколькими лабораториями. Albrechtsen (1957) выявил, что продукция активатора плазминогена нормальными человеческими тканями варьировала широко, колеблясь от нуля (печень) до низкого (селезенка, яички, головной мозг, сердце), умеренного (мышца, почки, гипофиз, яичник, легкие) и высокого (щитовидная железа, предстательная железа, лимфоузел, надпочечник, матка) уровней. Bernick, Kwaan (1969) сообщили об идентичных данных для первичных культур, приготовленных из нормальной почки, легкого, мочевого пузыря, уретры и почечных кровяных сосудов. Таким образом, ясно, что в противоречии с гипотезой Reich — Fischer большинство нормальных тканей продуцирует умеренное или большое количество энзимов ФА или активатора плазминогена.
Предыдущая << 1 .. 18 19 20 21 22 23 < 24 > 25 26 27 28 29 30 .. 211 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed