Трансформированная клетка - Эш Б.Б.
Скачать (прямая ссылка):
45
Bruyneel, 4973; Gordon, Marquardt, 1974; Hwang et al., 1974; Maca, Hoak, 1974; Kaneko et al., 1975; Rutishauser, Sachs, 1975; Vlodavsky, Sachs, 1975; Davis et al., 1976; Marciam et al., 1976), или кинетика определялась так, что уровень плато нельзя было установить (Burger, Goldberg, 1967; Furmanski et al., 1972; Rittenhouse, Fox, 1974; Rutishauser, Sachs, 1975; Davis et al., 1976), или кинетика не могла достичь стабильного плато (Burger, Goldberg, 1967; Furmanski et al., 1972; Oppenheimer, Odencrantz, 1972; Deman, Bruyneel, 1973; Hwang et al., 1974; Rittenhouse, Fox, 1974; Kaneko et al., 1975; Rutishauser, Sachs, 1975; Vlodavsky, Sachs, 1975; Davis et al., 1976; Marcia-ni et al., 1976). Определенные (Linnemans el al., 1976) агглютииацион-ные кривые удовлетворяют необходимым требованиям. В дальнейшем метод соотношения агрегатов уместен для сравнительных исследований агглютинабельиости лектииом, если он оптимизирован для каждой клеточной линии при условии, что сравниваемые клетки не различаются значительно по форме, плотности, размеру или пространственному распределению в сосуде для перемешивания (Skehan, Friedman, 1975; Wright et al., 1977). Третий метод, несомненно наиболее достоверный для сравнительных исследований, включает измерения либо начальной скорости, либо уровня плато связывания клеточной суспензии с предсуществующим монослоем. Несколько вариантов клеточно-монослойной техники было опубликовано, хотя ни один из них еще не использовался, чтобы исследовать начальную скорость или уровень плато связывания (Furmanski et al., 1972; Rittenhouse, Fox, 1974; Rottman et al., 1974; Rutishauser, Sachs, 1975; Marciani et al., 1976).
В общем эти методики не использовались, чтобы исследовать взаимосвязь агглютинабельиости Кон А с туморогенностью. Вместо этого большинство таких исследований проведено с использованием метода Burger — Goldberg, при котором клеточная суспензия определялась и оценивалась значениями 0, +, -f + , + + + , или + + + + соответственно ее субъективно ощущаемой степени агглютинации (Burger, Goldberg, 1967). Метод — чисто субъективный, игнорирует неслучайное распределение клеток в реакционном сосуде. Он проводился в избыточно высоких клеточных концентрациях и при условиях, в которых измерение вторичных эффектов почти исключительно ведет к различным и несовместимым ошибкам у независимых исследователей, рассматривавших идентичный образец, не улавливает различий между числом и размером агрегатов, которые являются крайне различными отражениями агглютинационного процесса, не определяет либо начальную скорость, либо значения плато. Сомнительно, чтобы этот метод имел какую-либо ценность в сравнительных исследованиях с вовлечением множественных клеточных типов.
2.5.4. Резюме
Если доступные данные принимаются в истинном их значении, то корреляция агглютинабельиости Кон А с туморогенностью не существует. Так, отдельные группы нормальных и неопластических кле-
46
ток широко варьируют по агглютинабельности Кон А, и каких-либо стойких различий между ними в этом аспекте показать не удалось. В ранних работах исходили из того, что предполагаемая трансформация первично индуцируется инфицированием клеток потенциально онкогенными вирусами. Инфицирование нормальных или неопластических клеток онкогенными и неонкогенными вирусами обычно увеличивало агглютинабельность Кон А. Этот эффект, следовательно, является результатом вирусной инфекции скорее, чем онкогенной трансформации, и подчеркивает несоответствие инфицирования клеток онкогенными вирусами как общей модели для онкогенной трансформации. Однако методы, которые использовались в изучении корреляции между агглютинабельностью и туморогенностью, являются источником серьезных артефактов в определении скорее вторичных эффектов, чем истинной агглютинабельности. Возможность интерпретации таких данных вызывает сомнение. Таким образом, на основании имеющихся сведений было бы неразумно делать какие-либо заключения о связи клеточной туморогенности со способностью к агглютинации Кон А.
2.6. АКТИВАТОР ПЛАЗМИНОГЕНА
2.6,1. Предпосылка
Известно уже более полувека, что определенные типы злокачественных опухолей обладают повышенной способностью к энзиматическому лизированию внеклеточных фибриновых сгустков (Fischer, 1925). По крайней мере, два различных класса энзимов ответственны за этот фибринолиз (Cliffton, Grossi, 1955; Albrechtsen, 1057; Christman, Acs, 1974; Quigley et al., 1974). Первый представлен активаторами плазминогена, в то время как другой включает протеолити-ческие энзимы, которые действуют независимо от плазминогена.
Активаторы плазминогена — гетерогенный класс энзимов, который включает урокиназу, сыворотку и тканевые формы in vivo и ряд форм, продуцируемых клеточными культурами in vitro (Ast-rup, Permin, 1947; William, 1951; Christman, Acs, 1974; Strickland et al., 1976). Активатор плазминогена вызывает лизис фибрина в два этапа. Вначале активатор плазминогена обращает неактивный проэнзим плазминоген в активный энзим — плазмии (Robbins et al., 1967; Unkeles et al., 1974). Затем активированный плазмин расщепляет белковый субстрат, такой, как фибрин. Активатор плазминогена, продуцируемый куриными эмбриональными фибробластами, инфицированными вирусом саркомы Рауса, гидролизует единственную аргининвалиновую связь в молекуле плазминогена. При этом образуется активный плазмин, состоящий из двух полппептидиых цепей с различной молекулярной массой (Robbins et al., 1967; Quigley et al., 1974; Unkeless et al., 1974). Внутриклеточный активатор плазминогена седиментируется вместе с ядрами и, вероятно, является интегральным мембранным белком (Unkeless et al., 1974; Jaken, Black, 1979). Некоторые клетки способны секретировать активатор
