Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Эш Б.Б. -> "Трансформированная клетка" -> 190

Трансформированная клетка - Эш Б.Б.

Эш Б.Б., Билл П.Т., Камерон И.Л. Трансформированная клетка — К.: Наукова думка, 1985. — 384 c.
Скачать (прямая ссылка): transformirovannayakletka1985.djvu
Предыдущая << 1 .. 184 185 186 187 188 189 < 190 > 191 192 193 194 195 196 .. 211 >> Следующая

7,0 — такого эффекта не наблюдается. Использование бикарбонат-ного буфера, напротив, делает поступление Na+ чувствительным к изменению pH в диапазоне свыше 7,0, стимулирует его в 3 раза при понижении внеклеточного pH с 7,8 до 7,0. Бикарбонат слегка подкисляет внутриклеточную среду и делает внутриклеточное pH более зависимым от внеклеточного pH. Добавление активатора цГМФ-зависимой протеинкиназы (Kuo et al., 1976) не влияет на поступление ионов Na+. Ингибитор цАМФ-зависимой протеинкиназы полностью подавляет ответ. На основании этих данных был сделан вывод, что стимуляция циклическими нуклеотидами поступления Na+ опосредуется цАМФ-зависимой протеинкиназой. Активность этого фермента в большой степени зависит от изменений pH в физиологическом диапазоне (Kuo, Greengard, 1970), что может объяснять описанные выше результаты. Однако эти данные можно также объяснить тем, что поступление ионов Na+ происходит путем обмена Na+/H+, осуществляемого через электрохимический градиент Н+. Весьма интересно предположение о том, что на обмен Na+/H+ влияет циклическая нуклеотид-зависимая протеинкиназа, такая возможность нуждается в дальнейшем исследовании.
Кроме того, что pH* модулирует ответ клетки на действие циклических нуклеотидов, было обнаружено, что цАМФ, в свою очередь, изменяет внутриклеточное pH. В слизистом грибе Dictyostelium discoideum наномолярное количество цАМФ индуцирует двухкомпонентное (быстрое и медленное) повышение внутриклеточного pH (Malchow et al., 1978). цАМФ, цГМФ и аналог цАМФ — цАМФ-фос-форотиоат — индуцируют вначале быструю (10 с), затем переходящую в более медленную (6 мин) экструзию протоновых эквивалентов, происходящую по принципу «доза — эффект». Для индукции такого ответа требовалась концентрация цГМФ на несколько порядков
345
выше, чем физиологическая, что указывает на возможное его взаимо*
действие с цАМФ-зависимой протеинкиназой.
цАМФ также смягчает изменения pH* в ответ на кислотную нагрузку в мышце сердца млекопитающих. Clancy и сотрудники обнаружили, что обработка норэпинэферином (НЭ) (Riegle, Clancy, 1975), глюкагоном или дибутирил-цАМФ (Fenton et al., 1978) уменьшает изменения pHj в ответ на респираторный или метаболический ацидоз. Буферная сила среды в мышечных клетках сердца крыс, используемых в данной работе, повышалась в 3 раза в результате обработки НЭ и в 6 раз в присутствии глюка гона или дибутирил-цАМФ. Эффект гормонов на рНь по-видимому, опосредуется цАМФ. Последний может влиять на буферную способность через повышение эффективности угольной ангидразы (Thomas, 1976) или повышение активности кислото-экструзионных систем.
Boron и сотрудники (1978) исследовали описанный выше феномен в мышце усоногого рака. Как описывалось в разделе 2, ответ этой системы па кислотную нагрузку заключается в обмене внутриклеточного CI” на НСОз" среды. В присутствии 1—20 мкМ цАМФ внутриклеточное pH восстанавливается после кислотной нагрузки в 4 раза медленнее. Стимулирующий эффект цАМФ чувствителен к блокаторам анионных канальцев, что предполагает повышение активности эндогенной системы обмена С1—/НСОГ* цГМФ не влияет па регуляцию pH, изменяющегося в ответ на кислотные нагрузки. Если поддерживать наружное и внутриклеточное pH на значениях 7,3, ц^МФ стимулирует как поступление, так и выход ионов С1~~. Эти наблюдения могут быть важны при изучении опухолевых клеток, подверженных длительным кислотным нагрузкам в связи с высокой интенсивностью метаболизма (см. гл. 2). Как подчеркивалось в предыдущих параграфах, гормоны, повышающие уровни внутриклеточного цАМФ, могут влиять на внутриклеточное pH путем стимуляции обмена С1”/НСОГ или обмена Na+/H+.
Введение глюкагона в перфузируемую селезенку индуцирует глюконеогенез и вызывает гипергликемию. Первое звено в цепи процессов, ведущих к стимуляции глюконеогенеза,— повышение внутриклеточного цАМФ (Dambach, Friedman, 1974). Само по себе введение цАМФ индуцирует гипергликемию (Sengputa, Rous, 1978). Сразу же после введения глюкагона или цАМФ в перфузируемую селезенку ионы Са2+ выходят из клетки, а ионы К+ и Na+ — поступают в клетку, и внутриклеточное pH повышается (Friedman, 1972). Это согласуется с действием цАМФ на внутриклеточное pH, описанным в предыдущих разделах. Вместе с тем в печени наблюдается двухфазный ответ: через несколько минут наблюдается обратный транспорт ионов, и внутриклеточное pH понижается. Было постулировано, что пониженное внутриклеточное pH участвует в регуляции глюконео-генеза вместе с ионами Са2+ (Hastings, Longmore, 1965; Rasmussen et al., 1974). Низкое pH также сопоставимо с пониженной активностью фосфорилазы а, являющейся контролирующим звеном в гликогено-лизе (Fischer et al., 1976). Тетракаин — аминоанестетик третьего
346
порядка — повышает pHj и блокирует гипергликемическую реакцию на глюкагон (Friedman, 1972). Интересно отметить, что ацетазоли-мид — ингибитор угольной ангидразы — также индуцирует гипергликемию in vivo, и его эффект предупреждается при инъекции ли-посом, содержащих угольную ангидразу (Sengputa, Rous, 197b). Из описанных выше исследований становится очевидно, что гормоны, взаимодействующие с цАМФ, также влияют на внутриклеточное pH, а его изменения, в свою очередь, изменяют многие клеточные процессы и особенно метаболизм сахаров.
Предыдущая << 1 .. 184 185 186 187 188 189 < 190 > 191 192 193 194 195 196 .. 211 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed