Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Эш Б.Б. -> "Трансформированная клетка" -> 184

Трансформированная клетка - Эш Б.Б.

Эш Б.Б., Билл П.Т., Камерон И.Л. Трансформированная клетка — К.: Наукова думка, 1985. — 384 c.
Скачать (прямая ссылка): transformirovannayakletka1985.djvu
Предыдущая << 1 .. 178 179 180 181 182 183 < 184 > 185 186 187 188 189 190 .. 211 >> Следующая

Рис. 4. Интенсивность гликолиза как функция внутриклеточного pH в трех системах: (?) — клетки асцитною рака Эрлиха, внутриклеточное pH варьировалось путем титрования внеклеточного pH и определялось с помощью реакции флюоресценции с 6-карбоксифлюоресцеином, накопление молочной кислоты определялось впутриклеточно и пересчитывалось на 0,5 г белка (Belt et al.t 1979); (О) — Е. coli, внутриклеточное pH определялось по методу с использованием ЯМР, а накопление лактата в среде определялось одновременно при анаэробных условиях. Собраны данные шести опытов при различных внешних условиях и температуре 20 °С, а продукция лактата рассчитана на один образец, примерно на 0,5—1,0 г белка (Ugurbil et aL, 1978, 1979); (Д) — эритроциты человека, внутриклеточное pH варьировалось путем титрования внеклеточного pH в присутствии или в отсутствие гиперосмотпче-ских концентраций сахарозы, при любом условии данные оказались сходными, поэтому суммированы здесь, продукция лактата пересчитана на 1 I? гемоглобина, a pHs определялось й использованием ДМО (Minakami et al., 1975; Tomoda et al., 1977).
333
известны как один из наиболее классических видов опухолевых клеток в том отношении, что в них отмечается высокая интенсивность аэробного гликолиза (Aisenberg, 1961). Racker (1972), постулируя, что туморогенез развивается в результате «повторяющихся изменений внутриклеточного pH», предсказал, что гликолиз в асцитных клетках имеет нормальную зависимость от pH*.
11.6.4. Внутриклеточное pH и контроль гликолиза
Описанные выше исследования показали, что pH может влиять на интенсивность гликолиза в клетках опухолей in situ. Непосредственная точка приложения действия pH еще не установлена. Многие исследователи полагают, что pH-зависимость обусловлена ферментом фосфофруктокиназой (ФФК) (YVenner, 1975; Racker, 1972; 1976; Fod-ge, Rubin, 1973; Tomoda et al., 1977). Эта гипотеза подкрепляется анализом интермедиатов гликолиза при различных условиях роста. Кроме того, это подкрепляется наблюдениями, что изоферменты ФФК обычно ограничивают интенсивность гликолиза in vitro, и их профили оптимума pH обычно идентичны общему профилю pH для гликолиза (Atzpodien, Bode, 1970; Ramaiah, 1974; Banuelos et al., 1977; Meldolesi, Lacetti, 1979). К этому следует добавить предположение, что в клетках сердечной мышцы млекопитающих pH-зависимым фактором, ограничивающим интенсивность гликолиза, является фермент глицеральдегид-3-фосфат дегидрогеназа (ГЗФДГ) (Rovetto et al., 1975). По всей вероятности, гликолиз контролируется более чем одним фактором, выбор которого зависит от системы и условий. Активность ГЗФДГ и ФФК существенно зависит от pH, что может опосредоваться через специфический аллостерический эффект.
Одно из наиболее значительных новых наблюдений в области энзимной регуляции — взаимодействие многих гликолитических ферментов со специфическими рецепторами плазматической мембраны. Steck и сотрудники установили, что в эритроцитах СЗФДГ (Kant, Steck, 1973; Yu, Steck, 1975) и альдолаза (Strapazon, Steck, 1976, 1977) специфически связываются с интегрированными мембранными белками. Связывание — прочное, обратимое и существенно зависит от
pH в рамках его физиологического диапазона. Подобные результа-| ты получены при использовании |
Рис. 5. Интенсивность гликолиза и свя-4О % зывание фосфофруктохшназы с мембра-ь нами эритроцитов как функция pH: (?) — продукция лактата в эритроци--20% чах человека как функция внутриклеточного pH, условия идентичны условиям, описанным для эритроцитов на рис, 4; (Д> — связывание ФФК с гемо-лизированными эритроцитами как функция pH in vitro (из Higashi et al., 1979).
334
фосфоглицераткиназы эритроцитов (DeJ Kiitly, 1977) и ФФК (Ка-radsheh, Uyeda, 1977; Higashi et al., 1979). Этот феномен был также описан в других системах, таких, как ферменты цикла Кребса в мозге крыс (Waksman et al., 1977) и глюкозо-6-фосфат дегидрогеназа яиц морских ежей (Aune, Epel, 1978). Для иллюстрации рН-зависимо-сти связывания и активности ферментов на рис. 5 показаны профили pH для фосфофруктокиназы эритроцитов. Видно, что при pH 6,75 фермент полностью связан и неактивен, а при pH 7,5 — растворим и активен. По крайней мере, в эритроцитах влияние pH на активность ФФК и гликолиз, по-видимому, опосредуется через модификацию связанного с мембраной аллостерического эффектора. Суше ствование этого феномена в других системах и его взаимосвязь с ф: -зиологическими условиями in vivo остаются важными вопросами.
11.7. АКТИВАЦИЯ ЯИЦ МОРСКИХ ЕЖЕЙ
Известно, что в некоторых системах изменения внутриклеточного pH могут повышать интенсивность гликолиза, что необходимо для перехода клеток из вегетативного в пролиферативное состояние. Неясно, однако, достаточно ли изменение внутриклеточного pH само по себе для стимуляции роста. Внеклеточное ощелачивание может индуцировать пролиферацию покоящихся фибробластов (Rubin, 1971; Ceccarini, Eagle, 1971; Fodge, Rubin, 1973; Eagle, 1974). Как описано в предыдущих разделах, в щелочной среде клетки утрачивают способность регулировать их внутриклеточное pH. Таким образом, возможно, что влияние ощелачивания окружающей среды на индукцию пролиферации опосредовано через pHi. В работах данные эффекты хорошо описаны, однако исследователи не проводили измерения внутриклеточного pH. В настоящее время единственной системой, где показана роль внутриклеточного pH в стимуляции клеточного роста, является активация яиц морских ежей.
Предыдущая << 1 .. 178 179 180 181 182 183 < 184 > 185 186 187 188 189 190 .. 211 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed