Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Эш Б.Б. -> "Трансформированная клетка" -> 145

Трансформированная клетка - Эш Б.Б.

Эш Б.Б., Билл П.Т., Камерон И.Л. Трансформированная клетка — К.: Наукова думка, 1985. — 384 c.
Скачать (прямая ссылка): transformirovannayakletka1985.djvu
Предыдущая << 1 .. 139 140 141 142 143 144 < 145 > 146 147 148 149 150 151 .. 211 >> Следующая

Таблица 2. Влияние обработки МГБГ на частоту многоядерности в синхронизированных митотических клетках HeLa 1
Частота (%) Содержание поли аминов
в митотических клетках
(нмоль/6хЮ* клеток)
Обработка одно двухъ много- Пут- Спер- Спер
ядерных ядерных ядерных рес- мидин мин
клеток клеток (^3) кле цин
ток
Необработанные конт 81,0 14,33 5,6 7,152 24,792 12,488
рольные митотиче 82,5 15,0 3,5
46,3 46,3 7,3 12,968 15,536 7,968
85,5 10,0 4,5








МГБГ-митоз + спер 76,3 20,6 4,0
мин (25 мкМ)
* Sunkara и соавт. (1979),
261
добавление к митотически делящимся клеткам, выделенным из обработанных МГБГ культур, спермидина или спермина снижало частоту двухъядерных клеток до контрольного уровня. Мы также обнаружили, что уменьшение содержания полиаминов ассоциировано не только с повышением частоты двухъядерных клеток, но также с дезорганизацией микрофиламент, как это показано с помощью реакции непрямой иммунофлюоресценции с использованием антител, специфических к актину. Однако это только косвенные данные о роли полиаминов в поддержании структурной и функциональной целостности сократительного кольца, существенного для нормального цитокинеза. Тот факт, что экзогенное добавление полиаминов, в частности спермидина, может снять угнетение цитокинеза, предполагает, что спермидин может играть роль в структуре и/или функции микрофиламент во время цитокинеза и деления.
8.5.3. Полиамины и дифференциальная регуляция фаз клеточного цикла нормальных и трансформированных клеток
Связанные с клеточным циклом колебания наблюдаемого содержания полиаминов, особенно их пик в конце фазы Gv и потребность в полиаминах для оптимального темпа репликации ДНК демонстрируют важную роль этих физиологических катионов в переходе клеток из фазы Gx в фазу S. Действительно, результаты недавно проведенных исследований показывают, что угнетение с помощью МГБГ биосинтеза полиаминов в большом числе линий нормальных клеток, таких, как WI38, клетки эмбрионов крыс, ЗТЗ-клетки мышей и фибробласты кожи человека (РА2) вызывает остановку клеточного цикла вфазеОл (Boynton et al., 1976; Rupniak, Paul, 1978; Sunkara et al., 1979). Эта остановка легко снимается добавлением спермидина или спермина. Обработка трансформированных клеток (HeLa, SV-3T3 и СНО) МГБГ и ДФМО приводит к остановке цикла большинства клеток в фазе S (Rupniak, Paul, 1978; Sunkara et al., 1979), как показано в табл. 3 и 4. В данном исследовании мы обрабатывали экспоненциально растущие нормальные (фибробласты кожй человека линии РА2, клетки ЗТЗ мышей) и трансформированные (HeLa, SV-3T3) клетки МГБГ (40 мкМ) или ДФМО (2,5 мкМ) в течение 48 или 96 ч соответственно. В конце этого периода клетки собирали и гибридизировали с синхронизированными митотическими клетками HeLa с помощью вируса Сендай, инактивированного ультрафиолетовым облучением с целью индукции преждевременной конденсации хромосом (ПКХ) (Johnson, Rao, 1970). Готовили препараты хромосом, в которых определяли частоту появления различных типов ПКХ, т. е. специфических фаз (Gx, S и G2) (Rao et al., 1977). Результаты показывают, что угнетение синтеза путресцина и спермидина приводило к блоку фазы Gx в большой популяции нормальных клеток, в то время как большинство трансформированных клеток останавливались в фазе S. Эти данные предполагают, что в фазе Gx специфический процесс, необходимый для перехода клеток в фазу S, проходит с участием полиаминов. Нормальные клетки распо-
262
Таблица 3# Дифференциальное действие обработки МГВГ на прохождение клеточного цикла нормальных и трансформированных клеток1
Клеточ Обработка Частота (%) ПКХ Содержание полиаминов
ная в фаэе (нмоль/6 х 10* клеток)
S Путрес Сперми- Спер
цин дин мин
РАа Контроль 54,0 34,0 12,0 2,64 14,26 24,91
+ МГБГ (40 мкМ) 90,0 7,0 3,0 3,113 7,2 6,60
ЗТЗ Контроль 42,0 53,0 5,0 3,36 21,66 3,99
+ МГБГ (40 мкМ) 83,0 8,0 9,0 5,94 16,18 5,02
Предыдущая << 1 .. 139 140 141 142 143 144 < 145 > 146 147 148 149 150 151 .. 211 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed