Трансформированная клетка - Эш Б.Б.
Скачать (прямая ссылка):
7.5.4. Другие опухоли
Введение цАМФ в опухоль вызывает 50 %-ное угнетение роста лимфомы NKLy у белых мышей (Gerieke, Chandra, 1969). Стимуляторы цАМФ подавляют рост клеток плазмоцитомы (Naseem, Hollander, 1973), мышиной мастоцитомы (Keller, Keist, 1973), рабдомио-саркомы человека (Sandor, 1973), асцита Эрлиха (Kaminskas et alM 1976) и лейкозных клеток (Yang, Vas, 1971) в культуре.
7.5.5. Нормальные фибробласты
Циклический аденозинмонофосфат также обратимо ингибирует рост диплоидных фибробластов человека (Froehlich, Rachmeler* 1972) и нетрансформированных фибробластов мыши (Taylor-Papadi-mitrious et al., 1975).
7.6. АДЕНИЛАТЦИКЛАЗА В ТРАНСФОРМИРОВАННЫХ КЛЕТКАХ
Внутриклеточный уровень циклических нуклеотидов регулируется активностью циклаз, фосфодиэстераз, а также уровнем цикло-нуклеотид-связывающих белков. Некоторые типы трансформированных клеток характеризуются низким уровнем цАМФ по сравнению с нормальными клетками. Поэтому представляется важным знать, в каких случаях низкий уровень цАМФ в трансформированных клетках вызван нарушением активности аденилатциклазы. Для исследования этой проблемы использовано два подхода. Первый заключается в исследовании изменений аденилатциклазной активности в клетках, трансформированных вирусами или химическими канцерогенами, по сравнению с нормальным контролем. Второй — в ио следовании изменений аденилатциклазной активности в процессе
229
цАМФ-индуцированной дифференцировки клеток в культуре; этот подход предполагает возможность противоположных изменений при злокачественной трансформации.
7.6.1. Куриные эмбриональные фибробласты
Трансформация куриных эмбриональных фибробластов вирусом С саркомы Рауса штаммов Bryan (RSV-BH) и Schmidt-Ruppin (RSV-SR) приводит к снижению аденилатциклазной активности (Anderson et al., 1973b). Аналогичные наблюдения отмечались в куриных эмбриональных фибробластах, трансформированных вирусом саркомы птиц (ASV) В77, а также RSV, в частности штаммами Prague и Schmidt-Ruppin (Yoshida et al., 1975). Однако механизм снижения циклазной активности различается в зависимости от типа вируса, использованного для трансформации. В клетках, трансформированных RSV-BH, изменены значения (АТФ) и концентрационная зависимость аденилатциклазы от Mg2+, тогда как в клетках, трансформированных RSV-SR, снижена максимальная скорость ферментативной реакции, но отсутствуют изменения Км (АТФ) (Anderson et al., 1973 а, b). Циклазная система трансформированных клеток сохраняет способность активироваться проста-гландином Ех (Anderson, Jaworsky, 1977).
В куриных эмбриональных фибробластах, трансформированных ts-мутантами RSV, —RSV-BH-Ta и RSV-SR-T5,—нарушение аденилатциклазной активности относится к числу наиболее ранних событий, регистрируемых после их переноса из условий пепермис-сивной температуры в пермиссивную (Anderson et al., 1973 a, b). Быстрое снижение циклазной активности в RSV-BH-Ta-инфициро-ванных фибробластах вслед за переносом культуры в условия пермиссивной температуры не блокируется ингибиторами синтеза РНК и белка. Это было интерпретировано таким образом, что быстрое изменение аденилатциклазной активности является атрибутивным свойством продукта ts-гена — фактора трансформации (Anderson, Pastan, 1975) 1. В другой работе (Gidwitz et al., 1976) аденилатциклаз-ная активность мембран фибробластов, трансформированных RSV, оказалась в 2—4 раза ниже, чем в мембранах нормальных фибробластов. Однако специфическая активность солюбилизированного фермента из нормальных и трансформированных клеток была по существу одинакова. Эти данные позволяют полагать, что за снижение аденилатциклазной активности полностью или частично ответственно микроокружение фермента в мембране трансформированной клетки.
1 Такое заключение представляется крайне странным. Действительно, если снижение циклазной активности не отменяется ингибиторами синтеза РНК и белка, то оно в принципе не може? быть функцией какого-либо белкового продукта (примеч. переводчика).
230
7.6.2. Клетки почки крысы
Аденилатциклазная активность существенно снижалась при трансформации нормальных клеток ночек крысы (NRK) вирусами саркомы Кирстена или Молони (KiSV, MSV). Фермент из трансформированных клеток не обнаруживает изменений аффинитета к АТФ, однако Mg2+-зависимая активация его нарушена (Anderson et al., 1974). Фермент из трансформированных клеток не чувствителен к PGEX как в присутствии, так и в отсутствие ГТФ (Anderson et al., 1974), а также к L-эпинефрину (Anderson, Taworsky, 1977).
7.6.3. Мышиные эмбриональные фибробласты
Стабилизированная линия трансформированных клеток, производных от ЗТЗ, характеризуется сниженным уровнем цАМФ по сравнению с родительской линией (Pastan, Johnson, 1974; Ryan, Heidrick, 1974; Pastan et al., 1975; Chalapowcki et al., 1975). Однако спонтанно трансформированные мышиные эмбриональные фибробласты ЗТ6 (Makman, 1974; Sheppard, Bannai, 1974), а также клетки ЗТЗ, трансформированные полиомавирусом (Makman,
