Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Эш Б.Б. -> "Трансформированная клетка" -> 109

Трансформированная клетка - Эш Б.Б.

Эш Б.Б., Билл П.Т., Камерон И.Л. Трансформированная клетка — К.: Наукова думка, 1985. — 384 c.
Скачать (прямая ссылка): transformirovannayakletka1985.djvu
Предыдущая << 1 .. 103 104 105 106 107 108 < 109 > 110 111 112 113 114 115 .. 211 >> Следующая

196
1976) и продуцируют низкие уровни инфекционного вируса (Fogel,
1975). Репликация вируса в этих клетках может быть увеличена обработкой клеток агентами, такими, как митомицин С (Zouzias et al., 1977).
Клетки пермиссивные (обезьяны) или полупермиссивные (человека или хомячка) для репликации SV40 и трансформированные недефектным SV40 могут продуцировать низкие уровни инфекционного вируса или легко индуцироваться физическими или химическими агентами для освобождения вируса (см. Zavialle et al., 1978# и ссылки там же; см. также Moyer et al., 1977, 1978). В некоторых случаях химические индукторы могут продуцировать инфекционный SV40 только при слиянии с пермиссивными клетками (см. Watkins, 1975, и ссылки здесь же), но некоторые трансформированные клетки мышей непермиссивные являются индуцибельными (Zavialle et al., 1978).
SV40 более легко может быть спасен из трансформированных по-лупермиссивных клеток (например, клеток человека или хомячка), которые содержат неиитегрированпую (так же, как и интегрированную) вирусную ДНК (Moyer et al., 1980).
В большинстве случаев слияние — наиболее эффективное средство спасения, но в некоторых клеточных линиях, как доказано*, эффективнее трансфекция ДНК из трансформированных клеток в пермиссивные (Boyd, Butel, 1972). Эффективное спасение вируса продемонстрировано в пермиссивных клетках, трансформированных различными методами трансфекции (Zhanclov, 1977), включая трансфекцию клеточной ДНК из клеток, содержащих полные геномы (Boyd, Butel, 1972), контрансфекцию клеточной ДНК из клеток* содержащих частичные геномы с определенными комплементарными фрагментами ДНК (Lipotich et al., 1980), целые хромосомные наборы. Для некоторых клеточных линий, содержащих полные вирусные геномы, однако, спасение является более трудным так как, для него необходимо субкультивирование гетерокарионов после слияния или реципиентных клеток после трансфекции (Moyer, Moyer, 1979). Это предполагает необходимость синтеза ДНК или серии случайных рекомбинационных событий вырезания, которые в конечном счете будут сопровождаться продукцией инфекционного вируса. Геном может существовать в качестве субгеномных фрагментов или быть неконтагиозным в некоторых клеточных линиях, хотя это не предотвращает спасение, если есть полный геном-эквивалент (Moyer et al., 1978; Moyer, Moyer, 1979).
Механизм(ы) спасения вируса, посредством которого(ых) интегрированные вирусные геномы становятся свободно реплицирующимися, не известен, но многие результаты наблюдения показывают, что в спасение включены как вирусные, так и клеточные факторы хозяина. Обработка трансформированных клеток индуцирующими агентами, такими, как основной аналог, перед слиянием увеличивает продукцию инфекционных частиц (Watkins et al., 1975). Различные системы вирус — клетка оптимально индуцируются различными агентами (Kaplan et al., 1975; WatkmsA Dulbecco^ 1967). Ви-
197
русная индукция может зависеть от стадии клеточного цикла (Kaplan et al.t 1975), а вирусные Т-антигены могут быть необходимыми для спасения (Basilico et al., 1979; Bothan etal., 1979; Moyer, Moyer, 1979; Sleigh et al., 1978).
Работа, осуществленная с энуклеированными клетками или цитоплазматическими экстрактами некоторыми исследователями, продемонстрировала, что цитоплазма пермиссивной клетки может обеспечить необходимый(е) фактор(ы) для спасения вируса (Grose, Карго wski, 1974; Pringle, 1977; Righthand, 1974). Результаты исследования синхронизации клеток показали, что кроме присутствия Т-антигена репликация ДНК SV40, по-видимому, зависит от события или фактора, происходящего в поздней Gx- и ранней S-фазе клеточного цикла (Gershey, 1979). В результате экспериментов по изучению клеточной гибридизации установили, что контролирующие синтез ДНК в клеточном цикле факторы обычно бывают цитоплазматического происхождения. Icekson, Ganiv (1979) сообщили, что транскрипция in vitro ядер, изолированных из клеток почек обезьян, инфицированных SV40, стимулировалась цитозольной фракцией клеток обезьян. Дискуссии о предполагаемой роли ядра без рассмотрения цитоплазматических факторов (Botchan et al., 1979) были преждевременны в связи с первыми предположениями (Watkins, Dulbecco* 1967), что способность гетерокарионов продуцировать вирус зависела от числа ядер в клетках обезьян при слиянии. Необходимо отметить,; что эти клетки могли также иметь более пермиссивную клеточную цитоплазму.
Итак, результаты различных исследований индукции паповави-русов показали, что те трансформированные линии, которые спонтанно освобождают вирус или продуцируют неинтегрированную вирусную ДНК, химически индуцибельны гораздо больше, чем трансформированные линии, в которых спонтанная продукция не наблюдается. В некоторых клеточных линиях для спасения вируса требуется слияние клеток или трансфекция ДНК (часго во взаимодействии с химической индукцией). Это может быть отражением различий пермиссивности индуцибельиых линий, в особенности вирусного генома, поддерживаемого в клеточных линиях, или техники, используемой для спасения.
Предыдущая << 1 .. 103 104 105 106 107 108 < 109 > 110 111 112 113 114 115 .. 211 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed