Руководство по капилярному электрофорезу - Энгельгард Х.
Скачать (прямая ссылка):
2. Полиэтиленовая пленка, прикрывающая приемник теплового излучения (Т), цела и не испачкана. Порванную пленку необходимо заменить только полиэтиленовой (полиэтилен проницаем для инфракрасного излучения). Пленку и линзу можно промывать спиртом.
3. Кольцевая прокладка (/7) в торце камеры чиста и хорошо смазана.
4. Камера не запотела. В случае необходимости следует протереть ее чистым полотенцем для защиты форвакуумного насоса от чрезмерного попадания в него воды.
5. Зеркальные секторы на дне ротора чисты и лишены царапин (см. ниже; нельзя двигать ротор по столу!).
6. Ротор не запотел (запотевший ротор следует протереть снаружи).
7. При опускании ротора на место две ведущие шпильки на торце вала электромотора не попали на две ведомые шпильки в гнезде ротора; во избежание этого перед установкой ротора надо заметить положение его шпилек в гнезде. Для «бакет-ро-торов» после установки их на место следует проверить правильность и свободу подвески всех бакетов; при установке бакет-ро-тора нужно держать его за головку, а не за ножку.
Осушитель воздуха в фильтре Фь Силикагель в осушителе должен быть голубым. Розовый силикагель следует заменить. Его регенерируют сушкой тонким слоем в печи при 225° в течение 2 ч.
ПУСК ЦЕНТРИФУГИ
Включение вакуумной системы. Форвакуумный насос включают (кнопкой «Vacuum») сразу после закрывания крышки камеры. О включении судят по звуку его работы. Лампочка загорается не сразу, а по достижении вакуума порядка 500 мкм
рт. ст. 'Если этого не произойдет по истечении нескольких минут, надо прервать опыт и проверить исправность насоса и чистоту прокладки камеры. Диффузионный насос включают кнопкой «Diff. pump». Лучше всего это сделать, когда форвакуум-ный насос обеспечит снижение давления до 200 мкм рт. ст.
Необходимо помнить, что диффузионный насос должен работать в условиях достаточно .высокого разрежения, иначе пары масла загораются и насос выходит из строя. Атмосферный воздух не должен попадать в горячий диффузионный насос, поэтому воздух в камеру по окончании центрифугирования можно впускать не раньше, чем через 5 мин после выключения диффузионного насоса. Впуск воздуха (открытие клапана /Ci) производится при выключении форвакуумного насоса (та же кнопка «Vacuum»). Диффузионный насос выключается автоматически, как только начнется процесс остановки ротора, «о для легких роторов и при использовании торможения он может занять менее 5 мин. Однако воздух нельзя впускать в камеру до истечения этого срока, несмотря на остановку ротора.
Выбор температуры центрифугирования. Ротор с пробирками целесообразно предварительно выдержать несколько часов при температуре центрифугирования, поэтому при выборе режима опыта целесообразно остановиться на температуре в помещении, холодной комнате или холодильнике, где можно предварительно выдержать ротор. Нельзя быстро охлаждать ротор в морозильнике. Градиент температуры вызывает напряжение в материале ротора, что может привести к аварии.
Выбранную рабочую температуру задают положением левого (синего) индикатора йа приборе — указателе температуры. Правый (красный) индикатор лучше сначала отодвинуть подальше от синего, так как в ходе установления температурного режима .возможны ‘незначительные, постепенно затухающие колебания температуры. При близком расположении красного индикатора к синему эти колебания могут вызвать необоснованное выключение центрифуги. После установления теплового режима красный индикатор можно придвинуть ближе, если необходимо воспрепятствовать даже небольшому повышению температуры ротора против заданной.
Тонкостенная камера центрифуги охлаждается примерно за
5 мин (защитная броня находится снаружи от системы терморегулирования), поэтому предварительное охлаждение камеры нецелесообразно; к тому же, оно повлечет за собой конденсацию влаги на стенке во время установки ротора.
Задание частоты («скорости») вращения. Диск задания частоты вращения следует подводить к выбранному значению всегда с одной и той же стороны (любой) — это улучшает воспроизводимость регулировки. Указатель частоты допускает ошибку на 500 об/мин. Точно частоту вращения можно определить по счетчику суммарного числа оборотов центрифуги, воспользовавшись секундомером.
Задание продолжительности центрифугирования, дЛя задания времени центрифугирования, не превышающего/ 30 мин, диск установки времени следует сначала перевести за отметку 30 мин, а затем вернуть в нужное положение. Для досрочной остановки центрифуги диск следует повернуть до нулевой отметки. Это можно делать в любом направлении вращения. диска.
Регулирование ускорения и торможения ротора. Рукоятка «Acceler. rate» регулирует одновременно и скорость разгона (максимальная скорость достигается вращением рукоятки по часовой стрелке до упора), и интенсивность торможения ротора. Последнее возможно только при включенном тормозе (кнопка «Brake»). Положение рукоятки можно менять в ходе центрифугирования. В любом случае тормоз отключается при уменьшении частоты вращения до 50 об/мин.
