Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Егоров А.М. -> "Теория и практика иммуноферментного анализа" -> 109

Теория и практика иммуноферментного анализа - Егоров А.М.

Егоров А.М., Осипов А.П., Дзантиев Б.Б., Гаврилов Е.М. Теория и практика иммуноферментного анализа — М.: Высшая школа, 1991. — 288 c.
ISBN 5-06-000644-1
Скачать (прямая ссылка): teoriyaipraktika1999.djvu
Предыдущая << 1 .. 103 104 105 106 107 108 < 109 > 110 111 112 113 114 115 .. 123 >> Следующая

§ 3. Анализ экспериментальных данных
В этом разделе рассмотрим основные критерии, характеризующие степень достоверности, полученных результатов анализа.
Если в результате N измерений некоторой величины, имеющей истинное значение ХИСт, за счет случайных ошибок получен ряд экспериментальных значений Xlt...,XN, то на их основе можно вычислить набор статистических коэффициентов, стандартным образом характеризующих измерительный процесс.
Нормальное распределение (распределение Гаусса). . При достаточно большом числе измерений N можно построить кривую частот повторений (или вероятностей появлений) отдельных значений измеряемой величины: на оси абсцисс откладываются экспериментальные значения Х^,..., на осй ординат — вероятность их
появлений. Получают кривую нормального распределения (кривая Гаусса)" (рис. 51). При N->-00 кривая описывается уравнением
1
•exp
(*-*ист>2
)•
(ЮЛ)
в У2яв * ^ 2о2
Из вида кривой следует, что отклонения от истинного значения Лист в большую и меньшую сторону равновероятны и что малые отклонения более вероятны, чем большие. Площадь под кривой между значениями Х\ и Х2 имеет смысл вероятности показания при отдельном измерении экспериментального значения в интервале от Хг до Х2, следовательно, площадь под всей кривой равна 1.
Стандартное отклонение. Коэффициент а, входящий в виде параметра в уравнение нормального распределения, носит название дисперсии, среднеквадратичной ошибкц или стандартного отклонения.
При ограниченном наборе экспериментальных значений Хи...,Хя стандартное отклонение оценивается по формуле
Рис. 51. Кривая нормального распределения с доверительными интервалами
Г 2 ист)2
-*=!-----------------
Г N— 1
где за Хяп берегся среднее значение:
А'
IV
2 х>
i=i
ср-
N
(10.2)
(10.3)
Таким образом, стандартное отклонение а имеет смысл среднего отклонения отдельного измерения от Хист.
Стандартная ошибка. Если серии по N измерений повторить достаточное количество раз, то получаемые в каждой серии средние значения Хср будут также нормально распределены вокруг истинного значения ХИст. Дисперсию этого распределения в отличие от стандартного отклонения называют стандартной ошибкой, она равна: SE—а/ VN, т. е, при увеличении количества измерений их среднее значение будет приближаться к истинному значению Хист. Стандартная ошибка SE — среднеквадратичное отклонение .среднего значения Хср от истинного значения ХИст. При наличии ограниченной выборки (Xi,Xn) SE вычисляется по формуле
ЛГ(ЛГ- 1)
Коэффициент вариации. Если стандартное отклонение или ошибку выразить в процентах от среднего значения Хср, то эта величина будет называться коэффициентом вариации или относительной средней квадратичной ошибкой:
Доверительный интервал. Если отложить на кривой Гаусса (см. рис. 51) по оси абсцисс Хист±сг, ХИСт+2а, ХИст+За, то можно увидеть, что в интервал ХИСт±а попадает примерно 67% площади кривой, т. е. в 67 случаях из ста ошибка измерений будет меньше a, a 33 — больше. В интервалы ХИст+2сг и ХИст±За попадает, соответственно, 95 и 99,7% измерений. Другими словами, если получено экспериментальное значение Хо, то с надежностью (вероятностью) 0,670 истинное значение будет лежать в интервале Хо±сг, а с надежностью 0,950 и 0,997 — в интервалах Хо±2сг и Хо±Зсг.
Интервалы Х0±а, Х0±2ст, Х0±Ъа называют доверительными интервалами для отдельного измерения с уровнями надежности 0,670; 0,950; 0,997. Для среднего значения Хср доверительные интервалы будут равны соответственно Хср±ст; Хср±2а; ЛсР±Зсг, однако, имея только ограниченную выборку из N значений, точное значение а определить нельзя. Поэтому доверительные интервалы расширяются из-за этой неопределенности. Доверительный интервал при определенном уровне надежности а и числе измерений N равен:
где коэффициенты приводятся в таблицах распределения Стыодента.
• Доверительный интервал — интервал вокруг экспериментального значения, в который истинное значение попадает с заданной уровнем надежности вероятностью.
• 100 %.
лср
(Ю.5)
Методические рекомендации
В данной главе приведены методики определения антител и некоторых антигенов наиболее широко используемыми методами ИФА. Цель раздела — дать информацию о наиболее распростраиеииых методических подходах при проведении анализа. Следует отметить, что оптимальные условия анализа (концентрация реагентов, длительность инкубаций, время детекции ферментной метки и т. д.) должны определяться для каждого соединения индивидуально, так как они зависят от количественных закономерностей взаимодействия данного антигена с антителами.
§ 1. Приготовление основных буферных растворов для проведения ИФА и растворов субстратов для измерения ферментативной активности
Предыдущая << 1 .. 103 104 105 106 107 108 < 109 > 110 111 112 113 114 115 .. 123 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed