Теория и практика иммуноферментного анализа - Егоров А.М.
Теория и практика иммуноферментного анализа
Автор: Егоров А.М.Другие авторы: Осипов А.П., Дзантиев Б.Б., Гаврилов Е.М.
Издательство: М.: Высшая школа
Год издания: 1991
Страницы: 288
ISBN 5-06-000644-1
Читать: 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123
Скачать:
ББК 30.16 ТЗЗ УДК 573.6
Рецензенты:
кафедра биотехнологии Московского института тонкой химической технологии им. М. В. Ломоносова (зав. кафедрой проф. В. И. Швец); акад. В. И. Покровский (НИИ эпидемиологии Минздрава СССР).
Рекомендовано к изданию Государственным комитетом СССР по народному образованию
Теория и практика иммуноферментного анализа./ Т 33 А. М. Егоров, А. П. Осипов, Б. Б. Дзантиев, Е. М. Гаврилова — М.: Высш. шк., 1991. — 288 с.: ил.
IS ВЫ 5-06-000644-1
В учебном пособии рассмотрены основные физико-химические закономерности взаимодействия антнгеи — антитело, лежащие в основе методов имму-ноферментиого анализа (ИФА). Даны классификация методов, характеристика н способы получения реагентов, используемых в ИФА. Обсуждаются возможности, достоинства и области практического использования различных вариантов ИФА.
Приведены крнкретиые примеры проведения иммуноферментного определения ряда модельных биологически активных соединений различной структуры н молекулярной массы.
ТЕОРИЯ И ПРАКТИКА ИММУНОФЕРМЕНТНОГО АНАЛИЗА
Редактор М. М. Пеикииа. Младшие редакторы Е. В. Бурова, Е. И. Попова. Художник В. Н. Хомяков. Художественный редактор Т. А. Колеикова. Технический редактор 3. В. Нуждииа. Корректор С. К. Завьялова.
Изд. № Е-585. Сдано в набор 01.10.90. Подп. в печать 24.01.91. Формат 60X 88Vus- Бум. офс. № 2. Гарнитура литературная. Печать офсетная. Объем 17,64 уел. печ. л. 17,64 уел. кр.-отт. 19,32 уч.-изд. л. Тираж 4 ) экз. Зак. № 627. Цеиа 1 р. 50 к.
Издательство «Высшая школа», 101431 Москва, ГСП-4, Неглннная ул., д. 29/14.
Московская типография № 8 Государствен?! комитета СССР по печати, 101898, Москва,
Хохлов. 9 пер., 7.
1903010000(4309000000)—175 ^
001(01)—91
ББК30.16
605
Учебное издание
Егоров Алексей Михайлович, Осипов Александр Павлович, Дзантнев Борис Борисович, Гаврилова Елизавета Михайловна.
ИБ № 8179
ISBN '5-06-000644-1
© Коллектив авторов, 1991
Предисловие
Иммуноферментный анализ (ИФА) является одним из наиболее активно развивающихся направлений химической энзимологии как в нашей стране, так и за рубежом. Это обусловлено тем, что в ИФА уникальная специфичность им-мунохимического анализа сочетается с высокой чувствительностью детекции ферментативной метки. В патентной и научной литературе появляется все больше сведений о рекордных пределах обнаружения веществ данным методом (вплоть до 10~21 молей в образце). Высокие результаты достигаются благодаря использованию неограниченных возможностей ферментЬв — биокатализаторов, которые позволяют создавать каскадные системы усиления различных химических сигналов.
Высокая стабильность реагентов, простота методов регистрации и многие другие достоинства метода ИФА способствовали его широкому внедрению в различные области медицины, сельское хозяйство, биологическую промышленность, охрану окружающей среды, а также в научные исследования. Применение ИФА в различных областях научндй и практической деятельности ставит перед исследователем задачу: освоить основные приемы, необходимые для самостоятельной разработки метода и его эффективного использования. Что же необходимо для этого знать? Теоретические основы ИФА опираются на современную иммунохимию и химическую энзимологию, знание физико-химических закономерностей реакции антиген — антитело, а также на основные принципы аналитической химии. Разнообразие объектов исследования от низкомолекулярных соединений до вирусов и бактерий, а так,же необычайно широкий круг задач, связанных с многообразием условий применения ИФА, обусловливают разработку чрезвычайно большого количества вариантов этого метода, в результате чего становится все труднее и труднее ориентироваться в потоке информации и данном методе.
Другая особенность ИФА, с которой сталкивается начинающий разработчик этого метода, является кажущаяся простота изготовления реагентов и выбора оптимальных условий его проведения. Так как метод высоко чувствителен, а измерения носят количественный характер, то исключительно высокие требования предъявляются к качеству реагентов, которые во многих случаях исследователь готовит самостоятельно. В настоящее время накоплен большой опыт в создании реагентов для ИФА, известны критерии, которым они должны удовлетворять, чтобы достичь необходимой чувствительности, изучены основные закономерности реакции антиген— антитело в растворе и на твердой фазе, что позволяет целенаправленно оптимизировать условия проведения анализа.
Высокая чувствительность ИФА достигается также благодаря использованию различных физических методов регистрации ферментативной активности: фотометрических, флуориметрических, а в последние годы био- и хемилюминесцентных. В ряде случаев, особенно связанных с решением технологических задач, успешно применяются электрохимические и микрокалориметрические датчики. Поэтому необходимо хорошо ориентироваться в тех возможностях, которые определяются особенностью тех или иных методов регистрации.
