Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Егоров А.М. -> "Теория и практика имуноферментного анализа" -> 10

Теория и практика имуноферментного анализа - Егоров А.М.

Егоров А.М., Осипов А.П., Дзантиев Б.Б. Теория и практика имуноферментного анализа — М.: Высшая школа, 1991. — 288 c.
ISBN 5-06-000644-1
Скачать (прямая ссылка): teoriyaimuntoferniy1991.djvu
Предыдущая << 1 .. 4 5 6 7 8 9 < 10 > 11 12 13 14 15 16 .. 115 >> Следующая

Константная область тяжелой цепи приблизительно в три раза (или в четыре, в случае IgM и IgA) длиннее вариабельной.
24
§ 6. Трехмерная структура иммуноглобулинов
В каждой из легких цепей молекул антител существуют две внутрицепочечные дисульфидные связи, число таких связей в тяжелых цепях различно (4—6). Каждый из внутри-цепочечных дисульфидных мостиков образует петлю из 55—70 а. о.
Рис. 4. Схема расположения внутрицепочечных дисульфидных связей в легких и тяжелых цепях молекулы IgG человека
На рис. 4 приведено схематическое изображение расположения дисульфидных связей вдоль тяжелых и легких цепей IgG человека с указанием среднего числа аминокислотных остатков в составе каждой из петель. По данным рентгеноструктурного анализа, участки пептидных цепей вблизи петли образуют глобулу, в которую включается примерно 110 а. о. Такие глобулы получили наз’вание доменов. ЫНг-концевые домены тяжелых и легких цепей относятся к вариабельным частям, а СООН-концевые домены — к константным частям. Было установлено, что аминокислотные последовательности константных доменов из тяжелых цепей в пределах одного класса являются весьма сходными между собой.
ЫН2-концевой домен тяжелой цепи обозначают как Ун, а трн последующих в константной области тяжелой цепи — как Сн1, Сц2 и СнЗ. а и ^-Тяжелые цепи содержат по 3 константных домена, обозначаемых как СЛ, Са2, Са3 для IgA и Ст 1, Су2, Ст3 для IgG, а более длинные ц- и е-цепи — по четыре (C„l, С„2, Сц3 и Сц4 для IgM и Се 1, С82, Се3 и Се4 для IgE).
Рентгеноструктурный анализ, выполненный для нескольких белков — димера Я-цепей, двух димеров К-областей Х'Цепей. Fab-фрагментов IgG и IgA, а также Fc-фрагмента IgG, позволил
25
установить пространственное расположение отдельных участков полипептидных цепей и доменов. Домены L- и Н-цепей представляют собой полусферы, соединенные вдоль одной цепи линейными полипептидными отрезками, доступными растворителю и действию протеолитических ферментов (рис. 5). Их основным структурным элементом являются два почти параллельных р-слоя, один из которых состоит из четырех линейных антипараллельных отрезков цепи, второй — из трех. В состав этих p-слоев входит около 60%
Покорность X
Рис. 5. Схематическое изображение укладки полипептидных цепей V-домена (а) и С-домена (б) (Edmudson et al., 1975):
антнпараллельные сегменты fxI—fx4 (не заштрихованы) и fy 1—fy3 (заштрихованы) образуют два практически параллельных слоя Р-складчатой структуры. Между ними лежат сегменты (el—вб), образующие изгибы цепн, спирали и т. п.; V- и С*домены отличаются частью сегментов в\—вб (зачерненные лннни); V-домен имеет добавочную петлю Е; черный прямоугольник соответствует внутрнцепочечной дисульфидной связи
26
всех аминокислотных остатков области. Боковые заместители гидрофобных аминокислот образуют плотно упакованное ядро между p-слоями. Дисульфидная связь между p-слоями, являющаяся существенным элементом жесткости структуры доменов, находится в самом гидрофобном ядре и поэтому в водных растворах недоступна для восстанавливающих агентов.
Участков с а-спиральной конформацией в структуре доменов практически не содержится. По сравнению с С-доменами У-обла-сти несколько длиннее и содержат дополнительную петлю Е. В У-областях образующие ядро аминокислотные остатки с гидрофобными боковыми заместителями, а также остатки в изгибах полипептидной цепи, обеспечивающие ее необходимый поворот, являются консервативными или полуинвариантными. Гипервариа-бельные остатки располагаются на изгибах цепи таким образом, что оказываются пространственно сближенными.
Взаимодействие между Н-цепями в Fab-фрэгменте обеспечивается множественными контактами между парами доменов Уь и Ун, Cl и Сн1. При ассоциации Cl и Сн1 домены обращены друг к другу четырехцепочечными p-слоями и взаимодействуют вдоль обширной зоны,свободной от растворителя. В контактах, имеющих в основном гидрофобный характер, участвует около 30 а. о. Наоборот, yL и Ун-домены ориентированы друг к другу трехцепочечными p-слоями. Основную роль в стабилизации образующейся структуры играют взаимодействия между консервативными и полуинвариантными аминокислотами с гидрофобными боковыми заместителями. Гипервариабельные участки yL и Ун-областей сближены и образуют доступную растворителю относительно плоскую область связывания антигена.
В Fc-фрагменте lgG Сн2-домены тяжелых цепей ориентированы друг к другу трехцепочечными p-слоями, но непосредственно друг с другом не контактируют из-за ограничений, накладываемых наличием межцепочечных дисульфидных связей в ЫН2-конце Ст2-доменов; между ними находятся углеводные фрагменты, ковалентно связанные с остатками Asn-297 каждой Н-цепи. Они состоят главным образом из остатков глюкозы, глюкозамина, фруктозы и сиаловой кислоты. Содержание углеводов и состав существенно отличаются у разных классов. Их присоединение является постсинтетическим процессом и происходит упорядоченно во время внутриклеточного транспорта молекулы иммуноглобулина. До сих пор биологическая роль углеводного компонента не ясна.
Предыдущая << 1 .. 4 5 6 7 8 9 < 10 > 11 12 13 14 15 16 .. 115 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed