Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Дуленко В.И. -> "бета-Карбонилы, химия и нейробиология " -> 57

бета-Карбонилы, химия и нейробиология - Дуленко В.И.

Дуленко В.И. бета-Карбонилы, химия и нейробиология — К.: Наукова думка, 1992. — 216 c.
ISBN 5-12-003118-8
Скачать (прямая ссылка): karbolinihimiyaineyrobiologiya1992.djvu
Предыдущая << 1 .. 51 52 53 54 55 56 < 57 > 58 59 60 61 62 63 .. 83 >> Следующая

дерущихся пар - дробью контроль/опыт.
Оценка влияния исследуемых соединений на аффекты 5-окситригт тофана (5-
ОТФ). Влияние на действие 5-ОТФ, и в первую очередь на фе номен
встряхивания головы, - наиболее распространенный метод оцеп ки
воздействия па центральные серотониновые структуры.
164
Мышей риссаживают поодиночке под воронки, где выдерживают до опыта 15-20
мин. Сначала вводят воду (в контрольной rpj те) или исследуемое вещество
подкожно я тотчас внутрибрюшинно - 2 % й раствор 5-ОТФ в дозе 200 мг/кг
массы тепа животного. Через каждые 7 мин на протяжении 1 ч, т.е. восемь
раз, подсчитывают в течение 1 мин число вбтряхиваний головы у каждой мыши
Среднюю величину вычисляют как среднюю арифметическую из 8-10 опытов.
Доверительный интервал находят при Р~ 0,05.
Одновременно с феноменом встряхивания головы регистрируют наличие и
степень тремора головы и туловища, который оценивают р баллах: 0 -
тремора нет, 1 - тремор слабый, 2 - ipcMop выраженный и 3 - сильный.
Антидепрессанты могут влиять не только на центральные, но и на
периферические эффекты норадреналина, серотонина и других нейро-
Медиаторных веществ. Одним из показателей действия антидепрессантов
служит их влияние на вызываемые нейромедиаторными веществами изменения
артериального давления.
Оценка влияния потенциальных антидепрессантов на эффекты ют техоламинов.
Опыты выполняются на интактных и наркотизированных уретаном (] мг/кг) и
хлорилозоп (0,05 мг/кг) крысах массой 180 220 г, а также на
наркотизированных кошках. Регистрируют уровень артериального давления в
сонной артерии. Изучают влияние соединений на прессорные эффекты
норадреналина и адреналина, вводимых в бед-рениую вену в дозах 1-2,5
мкг/кг массы тела. Степень изменения просторных эффектов катехоламинов
оценивают по изменению величины и продолжительности этих эффектов через
15; 30 и 60 мин после введения исследуемого соединения. Вещества,
обладающие свойствами потенциального антидепрессанта, усиливают
прессорные эффекты адреналина и норадреналина, а также действие
моноаминов на сокращение мигательной перепонки у кошек.
Оценка антимоноаминоксидазной активности исследуемых соединений.
Активность МАО находят колориметрическим методом в 10 %-м гомогенате
мозга крыс, приготовленном на 0,2 М фосфатном бу фере, содержащем 1,25 %
исконного детергента ОП-Ю иди тритон Х-100. Для определения активности
МАО типа А субстратом служит ссротонин-креатининсульфат, а для
определения активности МАО тина Б в качестве субстрата применяют н-
нигрофенилэтилампн или бензиламин При катализируемом МАО окислительном
дезаминировании и-нитрофенил-этиламина образуется окрашенный продукт
взаимодействия н-нитро-фенилуксусного альдегида с избытком субстрата,
который в сиЛьнощс-лочной среде экстрагируют к-бутанолом.
Коломегрированию подпер гают прозрачную бутаноловую фазу. Исследуемый
препарат вносится в пробы в конечных концентрациях 10"7 и 10-3 моль/л.
После инкубации определяют остаточную активность МАО. Зависимость между
концентрацией исследуемого вещества и активностью МАО оценивают
графически и методом интерполяции находят р/50.
Оценка влияния исследуемых соединений на нейрональный захват
165
биоаминов Д;ш изучения нейронального захвата и оценки влияния
потенциальных антидепрессантов на этот процесс наиболее часто исполь
зуются радиоактивные изотопы Удобной моделью для изучения
фармакологического воздействия на процесс нейронального захвата являются
синантосомы целого мозга или его отделов. Описан состав инкубационной
среды, в которой исследуют захват синаптосомамн радиолигандов [622].
Выделение синаптосом из инкубационной среды и регистрацию активности
осуществляют по методу [623], Радиоактивность измеряют методом
жидкостного сцинтилляционного счета.
Влияние на нейрональный захват моноаминов можно изучать также на срезах
мозга [624]. Тонкие срезы (200-250 мкм) коры больших полушарий или
полосатого тела мозга, приготовленные методом Мак Ильвейна [625],
инкубируют в среде инкубации при 37 °С и аэрации кислородом с разными
концентрациями тестируемого вещества. После 15 мин предварительной
инкубации в раствор (2 мл), содержащий срезы и исследуемое вещество,
добавляют радиоактивный изотоп (3Н-но-радреналии, 3Н-серотоиин или 3Н-
дофамин в случае срезов полосатого тела) в концентрации 10"7 моль/л.
Инкубация с меченым нсйромедиа-тором длится 10 мин, после чего срезы
быстро отмывают охлажденной средой инкубации, высушивают, взвешивают и
солюбилизируют в присутствии 5 %>го раствора тритона Х-100. Ингибирование
(/, %) захвата аминов тканью среза мозга определяют по формуле
I = 1т. к - г!" 0 ,100 /mk
где 1тк, 1т0 - количество импульсов в контроле и в опыте соответственно,
мг"1- с"1. Активность исследуемого вещества выражают через
1C so.
Оценка влияния изучаемых соединений на импульсное высвобождение меченых
нейромедиаторов в срезах мозга крыс Опыты выполняются на срезах мозга
крыс, преинкубированных 30 мин с ЭН-НА, 3Н-ОТ или 3И-ДА в концентрации 1-
Предыдущая << 1 .. 51 52 53 54 55 56 < 57 > 58 59 60 61 62 63 .. 83 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed