Генная инженерия растений. Лабораторное руководство - Дрейпер Дж.
ISBN 5-03-001854-9
Скачать (прямая ссылка):
ного
вектора, 2) нормальные по
беги с
Т-ДНК только бинарного
вектора.
Регенерация была значительно луч
ше,
чем на неинокулированных
контрольных эксплантатах лис
та,
возможно благодаря транс-
зеатипу, секретируемому штам
мами,
несущими pTiC5§,
Medicago variau> Срезы стебля (P) pTiBo542/pGA4?l
Medicago sativa,s> Срезы стебля (T) pAL4404/pAPC8
0)
Medicago sativale> Срезы стебля (Т) pRiA4/pARC4
(1)
Km Ктг-каллусы, развивающиеся на
концах всех эксплантатов.
Растения, регенерировавшие с низ
кой частотой' путем соматическо
го эмбриогенеза после несколь
ких субкулынвирований.
Используемый ш'г-помощник оикогеи-
ный, но регенерировать будут
только цеонкогенно трансформи
рованные клетки, содержащие
Т-ДНК лишь бинарного вектора.
Km Ктг-каллусы развивались иа 20%
эксплантатов.
Растения развивались путем эмбрио
генеза приблизительно нз 80%
каллусов.
Все растения были фенотипически
нормальны и фертильны.
KK На большинстве эксплантатов разви
вались косматые корни через
2---3 нед.
Растения регенерировали путем эм
бриогенеза из каллуса, получен
ного из косматого корня, через
Lotus cornicula- Проростки (С) pRi 15834
tus'b.m
d)
Trifolium repens19) Сегменты междоузлий столо pAL4404/pBinl9
(1) на (Т) и другие векторы
Cucutnis sativusso> Гипокотили (С) pRIA4/pARC8
(1)
кк Растения развивались из культур
косматого корня как путем ор
ганогенеза, так н путем сомати
ческого эмбриогенеза.
У всех растений наблюдаются ано
малии, типичные для Ri-регене-
раитов9>.
Km Трансформированные каллусы отби
рали через 3 нед на 30---40%
эксплантатов. Регенерация побе
гов происходила через 4---5 мес
после селекции Ктг-каллусов и
последующего переноса иа среду
для регенерации.
Km Зародыши развивались непосредст
венно на поверхности приблизи
тельно 20% Ктг-корней.
У 20% растений обнаружена только
Т-ДНК бинарного вектора и не
обнаружена онкогеиная Т-ДНК
Ri-плазмиды.
Некоторые проблемы фертильности,
связанные с культивированием
in vitro и техникой регенерации.
Brassica napus!,) Стебли иитактных проростков pRI 1855 кк Из каллуса,
полученного на основе
(1) (С) одной линии
косматого корня,
развилось
только два побега ---
у обонх
растений наблюдались
аномалии,
типичные для транс
формированных
Ri-плазмидой
растений5",
оба стерильны.
Brassica napusn> Стебель (Т) pRiA4 кк У 50%
эксплантатов возникали кос
(1) матые корни.
За формированием
почек на всех
корнях через 3 иед
инкубации в
жидкой среде сле
довал перенос
на твердую среду
для
регенерации в течение еще
2---4 иед.
Трансформированные
растения
