Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Дрейпер Дж. -> "Генная инженерия растений. Лабораторное руководство" -> 42

Генная инженерия растений. Лабораторное руководство - Дрейпер Дж.

Дрейпер Дж., Скотт Р., Армитидж Ф., Дьюри Г. Генная инженерия растений. Лабораторное руководство — М.: Мир, 1991. — 408 c.
ISBN 5-03-001854-9
Скачать (прямая ссылка): gennayainjeneriyarasteniy1991.djvu
Предыдущая << 1 .. 36 37 38 39 40 41 < 42 > 43 44 45 46 47 48 .. 184 >> Следующая

и tms2) и цитокини-,.на (imr), которые вызывают и поддерживают опухолевый
рост ¦.(рис. 2.2, Б). Продолжающаяся продукция ауксинов и цито-:кининов в
корончатых галлах приводит к подавлению регенерации побегов из опухолевых
клеток; кроме того, секреция этих гормонов часто ингибирует регенерацию
из соседних нетранс-формированных клеток, часто присутствующих в
опухолях. Инактивация как ims 1, tms2, так и imr (one-генов) приводит к
ослаблению онкогенности мутантной Ti-плазмиды. Штаммы агробактерий,
несущие такие мутантные Ti-плазмиды, индуцируют корончатые галлы с
измененным балансом гормонов. В результате у некоторых видов растений
формируются мутантные опухоли "побегового" ("shooty") типа (рис. 2.2, А),
если инактивированы ims 1 или ims2. Аналогично, если инактивирован imr,
корончатые галлы могут формировать множество -адвентивных корней
[мутантные корончатые галлы "корневого" ("rooty") типа, рис. 2.2, Л]. Эти
свойства были использова-
90
Глава 2
one область
"Побеговый "Корневой локус" локус"
Транскрипты мРНК ¦*----HI-----------*1---

tms 2 ms 1 tmr
Возможный путь биосинтеза индолил-3-уксусной кислоты (ИУК)
Т риптофан-
монооксигеназа Амнногидролаза
L-триптофан-------------->¦ 1-ацетамнд------- - ------=>-ИУК
Г ен 1 Ген 2
Itms 1) (tms 2/
[44, 821
Биосинтез цнтокинина в ткани корончатого галла
Диметилаллилпирофосфат трансфераза изопентиладенозин-
(ДМА) + АМР Ген 4 5'-моНофосфат
(tmr I
Рис. 2.2. Синтез фитогормонов в опухолях корончатых галлов.
Л. Морфология культивируемых in vitro опухолей табака, возникающих в
результате заражения Agrobacterium tumefaciens дикого типа и мутантами
по-onc-генам. а. Опухоль дикого типа. б. Побеговый мутант, индуцированный
штаммом A. tumefaciens, несущим мутацию в локусах Т-ДНК, кодирующих
транскрипты 1 и/нли 2 (tms 1 и tms2). в. Опухоль корня, индуцированная
штаммом A. tumefaciens, имеющим мутацию в локусе транскрипта 4 (tmr)
т-ДНК.
Б. Локализация огес-генов Т-ДНК A. tumefaciens и их участие в
биосинтезе' фитогормонов в опухолях корончатых галлов. Флажками (LB и RB)
обозначены последовательности границ Т-ДНК. (Воспроизведено из работы
[2]).
Трансформация клеток двудольных растений
91
ны в некоторых лабораториях для регенерации побегов из по-луонкогенных
тканей "побеговых мутантов" [23]. Большинство таких побегов не
трансформированы, поскольку многие из них возникают из
нетрансформированных клеток, "перекрестно питаемых" цитокининами,
секретируемыми соседними опухолевыми клетками. Tr Т-ДНК Ri-плазмид
содержит два гена, гомологичные tms-локусу Ti-плазмид, которые, по-
видимому, обусловливают синтез ауксина в трансформированных клетках и
индукцию косматого корня: Функции остальных ло-кусов Ri-плазмиды,
участвующих в метаболизме фитогормонов, и факторов, позволяющих проводить
регенерацию растений из опухолей косматого корня у многих видов, менее
изучены и более подробно обсуждаться не будут.
2.1.1.2. Взаимодействие агробактерий с клетками растения в участке
поранения
Предполагаемое действие ш'г-генов Ti-плазмиды- обеспечение вырезания и
переноса Т-ДНК из агробактерии в растительную клетку - обсуждалось в гл.
1 (разд. 1.1.4 и рис. 1.2). Взаимодействие A. tumefaciens с растительными
клетками в участке поранения или культивируемыми клетками - процесс
сложный, и детали механизма переноса и интеграции Т-ДНК, подобного
конъюгации, еще не установлены [75J. Полагают, что начальный этап
заключается в привлечении агробактерий к участкам поранения растений под
влиянием градиента фенольных соединений [9]. Наиболее активен в этом
отношении, ацетосирингон, который интенсивно секретируется пораженными
клетками [73]. Фенольные соединения ответственны за активацию yir-генов,
и было показано, что очищенный ацетосирингон может индуцировать как
экспрессию vir-гена, так и вырезание последовательности Т-ДНК в
отсутствие растительных клеток [74]. Второй этап, как предполагают,
заключается в прикреплении агробактерий к специфичным участкам узнавания
на поверхности растительных клеток. Химическая природа рецепторной
молекулы окончательно не установлена, однако последние данные позволяют
предположить, что она - либо белок [51, 34], либо пектин [54].
Специфическое узнавание компонентов клеточной поверхности сопровождается
интенсивным образованием агробактериями целлюлозных нитей (фибрилл).
Показано, что образование фибрилл in vitro стимулируется любым материалом
целлюлозной природы, присутствующим в среде. В результате этой
Предыдущая << 1 .. 36 37 38 39 40 41 < 42 > 43 44 45 46 47 48 .. 184 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed