Генная инженерия растений. Лабораторное руководство - Дрейпер Дж.
ISBN 5-03-001854-9
Скачать (прямая ссылка):
2.10.2. Инициация проэмбриогенных суспензионных клеточных
культур моркови, приготовление фидерных чашек и высев на
переносные диски................................165
2.10.3. Инокуляция клеток моркови агробактериями, селекция
трансформантов и регенерация путем соматического
эмбриогенеза ............................................167
Приложение 2 [I]...................... .........................170
Обычные материалы для работы с культурой тканей . . .
170
Приложение 2 [II].....................................................17L
Среда для культуры растительных клеток и тканей . , .
171
Приложение 2 [III]....................................................175
Антибиотики, добавляемые в среды для культур растительных
клеток.......................................................175
Приложение 2 [IV] ....
................................176-
Подготовка эксплантатов для инокуляции агробактериями .
176
Приложение 2 [V]......................................................178
Растворы для выделения протопластов табака . . .
178
Приложение 2 [VI].....................................................179
Выделение протопластов из измельченных кусочков листа . .
179
Приложение 2 [VII]....................................................180
Методы флуоресцентного окрашивания для контроля развития
растительных протопластов................................ .
180
Приложение 2 [VIII]...................................................181
Примеры процедур генетической трансформации растений, основанных
на системе переноса генов агробактерий ... 181
Литература.................................................
181
Глава 3. Трансформация растительных клеток путем трансфекции ДНК.
Дж. Дрейпер, Р, Скотт, А. Кумар, Г. Дьюри....................194
3.1. Введение....................................................194
3.1.1. Ограничения системы трансформации с помощью агробактерий
.......................................................194
3.1.2. Трансформация растительных протопластов изолированной
векторной ДНК.....................................196
Оглавление
405
3.1.3. Разработка стратегий трансформации протопластов путем
трансфекции ДНК........................ • • • • •
3.1.4. Векторы для переноса генов посредством ДНК.
(DMGT-векторы)...............................
3.1.5. Трансформация интактных растительных тканей DMGT-
векторами .............................................
3.2. Трансфекция протопластов с помощью полиэтиленгликоля
3.2.1. Основные положения....................................
3.2.2. Стимулируемое ПЭГ поглощение ДНК протопластами
3.2.3. Выделение ДНК из протопластов и дот-блоттинг-гибри-
дизация ......................................... .
3.3. Трансформация протопластов с помощью электропорации
3.3.1. Основные положения....................................
3.3.2. Оптимизация методик электропорации с помощью временной
экспрессии ...........................................
3.4. Трансформация растительных клеток путем микроинъекций ,
3.4.1. Основные положения . .........................
3.4.2. Трансформация растений путем микроинъекций ,
Приложение 3 [I]......................................................
Выделение протопластов из клеток суспензионной альбинотиче-ской
культуры Petunia hybrida (сорт Blue Lace) "
Литература............................................................
Глава 4. Выделение нуклеиновых кислот из клеток растений. Дж. Дрейпер, Р.
Скотт.........................................................
4.1. Введение....................................................
4.1.1. Выделение ДНК.........................................
4.1.2. Выделение РНК.........................................
4.2. Выделение тотальной ДНК из лиофилизированных ткаией
растений.....................................................
4.2.1. Общие положения.......................' ,
4.2.2. Выделение небольших количеств ДНК с помощью
СТАВ-буфера............................................
4.2.3. Выделение ДНК с помощью протеиназы .....
4.3. Выделение ДНК из свежего растительного материала
4.3.1. Общие положения.......................................
4.3.2. Выделение больших количеств тотальной ДНК из све-
жего растительного материала с помощью СТАВ-буфера
4.3.3. Выделение ДНК из свежих тканей с помощью ДСН
4.3.4. Выделение ДНК из свежих тканей с помощью ДСН и
