Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Диксон М. -> "Ферменты 2" -> 63

Ферменты 2 - Диксон М.

Диксон М., Уэбб Э. Ферменты 2 — М.: Мир, 1982. — 515 c.
Скачать (прямая ссылка): fermentit21982.djvu
Предыдущая << 1 .. 57 58 59 60 61 62 < 63 > 64 65 66 67 68 69 .. 158 >> Следующая

Следует отметить, что величина Км.каж для субстрата при фиксированной
концентрации активатора идентична Ка, каж для активатора при таких же
фиксированных концентрациях субстрата.
Эта система кинетически отличается от системы, представленной схемой
(8.144) и уравнением (8.145), в том отношении, что в данном случае
графики зависимости обратной скорости от обратной концентрации либо
субстрата, либо активатора при ряде фиксированных концентраций другого
реактанта образуют семейство прямых, которые пересекаются в точке,
лежащей на •оси 1/и. Кроме того, вторичные графики зависимости наклонов
от обратной концентрации фиксированного компонента являются прямыми,
которые проходят через начало координат в обоих случаях.
Ингибирование и активация ферментов
551
Скорость реакции можно выразить через полные концентрации субстрата и
активатора (st и at соответственно), подстав-ляя в уравнение (8.153)
следующие выражения для s и а:
~ s=st-as, (8.158)
а=at-as. (8.159)
Отсюда получаем (поскольку as не может быть больше at или St, какая бы из
этих величин ни была меньшей) уравнение
v=---------------------^--------------------. (8.160)
1 +
^K%^S
(Ка + at + st) - V [(Ка + at + Sf)2 - 4atst]
Отсюда для данных значений констант и полных концентраций можно легко
рассчитать и; однако это уравнение нельзя преобразовать к обычному виду,
с тем чтобы получить простые алгебраические выражения, определяющие
эффективные значения: констант Михаэлиса для субстрата и активатора.
Ясно, что в этом случае, как и в более простом выражении
(8.156), замена at на st или st на at не изменяет выражения.
Следовательно, сделанное выше заключение о тождественности кажущихся
констант Михаэлиса для активатора и субстрата [см. уравнение (8.157)]
будет применимо также и при использовании полных концентраций. Такого
рода данные были получены экспериментально в опытах с креатинкиназой.
Асконае [172] и Кьюби и др. [2620] обнаружили, что "кажущееся" сродство
фермента к данному иону металла при определенной концентрации ADP было
таким же, как и сродство фермента к ADP при концентрации металла, равной
концентрации ADP в первом случае. На рис. 8.23 приведены результаты
опытов Ас-
Рис. 8.23. Эквивалентность "кажущихся" величин сродства креатинкиназы (КФ
2.7.3.2) к активирующему металлу и субстрату [172]. Графики двойных
обратных величин построены для реакции между ADP и креатинфосфатом; с< -
полная молярная концентрация: ф ADP (+0,005 М Mg2+), О Mg2+ (+0.003 М
ADP), ¦ ADP (+0,005 М Mn2+), X Мп2+ (+0,003 М ADP).
конаса, характеризующие зависимость скорости реакции от полной
концентрации Mg2+ и Мп2+ в присутствии 0,003 М ADP или от полной
концентрации ADP в присутствии 0,005 М Mg2+ или Мп2+. Из этих графиков
видно, что Км для ADP в присутствии Mg2+ отличается от Км Для ADP в
присутствии Мп2+, но каждая из этих констант близка к Км для
соответствующего металла. Эти экспериментально полученные константы
Михаэлиса являются, вероятно, сложными функциями Kmas и Ка, о чем можно
судить по уравнению (8.160), однако если а и s достаточно велики по
сравнению с Ка, то уравнение (8.160) упрощается до
д-AS
(8.161)
Следовательно, константа Михаэлиса для истинного субстрата может быть
определена из зависимости скорости реакции от концентрации добавленного
субстрата при достаточно высокой концентрации активатора. В системе,
представленной уравнениями (8.153) и (8.154), истинным субстратом
фермента является комплекс активатор-субстрат, и вполне возможно, что
взаимодействие фермента с AS осуществляется - по крайней мере частично-
через активатор. В таком случае весьма вероятно, что фермент может
взаимодействовать не только с AS-комплексом, но и со свободным
активатором, при этом, однако, сродство к рассматриваемым реактантам не
обязательно должно быть одинаковым. Следовательно, наряду с реакциями
(8.153) и (8.154) нужно учитывать реакцию
E + A^=tEA. (8.162)
Анализ такого механизма как в равновесных, так и в стационарных условиях
приводит к следующему уравнению скорости:
^ Г- (8.163)
Ам Да
'М Аа / а
1 + -?-
где KiA - константа диссоциации комплекса ЕА. Если использовать суммарные
концентрации субстрата и активатора, то уравнение примет вид
V
Ингибирование и активация ферментов
553
В отличие от уравнений для предыдущего случая уравнения (8.163) и (8.164)
несимметричны относительно а и s, и получаемые константы Михаэлиса для
субстрата и активатора являются различными сложными функциями констант
равновесия и полных концентраций соответствующих реагентов. Следует
отметить, что графики зависимости I/о от 1/s при ряде фиксированных
концентраций А образуют семейство прямых, которые пересекаются в точке,
лежащей на оси I/о, а графики зависимости I/о от 1/а при ряде
фиксированных концентраций S образуют семейство прямых, которые
пересекаются в точке, лежащей выше оси 1/а. В последнем случае вторичный
график зависимости наклонов прямых от 1/s является прямой, проходящей
Предыдущая << 1 .. 57 58 59 60 61 62 < 63 > 64 65 66 67 68 69 .. 158 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed